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인체혈청 하에서 배양한 인체지방기질줄기세포의 표면항원 및 유전자 발현
전은숙,조현화,주혜준,김회규,배용찬,정진섭,Jun, Eun-Sook,Cho, Hyun-Hwa,Joo, Hye-Joon,Kim, Hoe-Kyu,Bae, Yong-Chan,Jung, Jin-Sup 한국생명과학회 2007 생명과학회지 Vol.17 No.5
인간중간엽줄기세포는(Human mesenchymal stem cells, hMSC) 골수, 지방, 피부, 근육, 혈액에 존재하며, 뼈, 연골, 지방, 근육, 신경세포로 분화가능성이 보고되어 손상조직의 재생을 위한 재료로서뿐만 아니라 유전자치료의 매개체로 이용될 수 있는 가능성이 제안되고 있다. 인간중간엽줄기세포의 적절한 배양조건에는 소 태아혈청(fetal bovine serum, FBS)이 요구되어지므로 세포치료에는 소 태아혈청이 다수 포함되어 있을 것이며 세포배양 배지 유래 소 태아혈청의 단백질에 의한 면역거부반응이 우려된다. 이미 앞선 연구에서 자가혈청 하에서 인체지방줄기세포 분리와 계속적인 세포배양을 실시하였을 때 인체지방줄기세포의 증식능력과 다 분화 능이 유지되며 면역결핍 생쥐에 골수의 말초혈액에서 유래된 CD34세포 이식 시 안착 능을 촉진함을 보였다. 본 연구에서 인체지방줄기세포가 인체혈청 하에서 배양되었을 때 소 태아혈청 하에서 배양할 때 발현하는 표면항원을 유지함을 확인했으며 microarray를 사용하여 유전자 발현을 비교했다. 유 세포 분석을 통하여 인체혈청 하에서 계속적으로 배양된 인체유래지방줄기세포에서 HLA-DR, CD117, CD29 와 CD44 의 발현이 소 태아혈청 하에서 배양했을 때와 비슷함을 밝혔다. 그러나 인체혈청 하에서 배양된 인체지방줄기세포의 유전자 발현형태와 소 태아혈청 하에서 배양된 세포의 유전자 발현형태 간에는 상당한 차이를 보였다. 그러므로 본 연구는 인체혈청 하에서 배양된 인체지방기질줄기세포가 임상적용을 위한 선행 데이터로써 직접적인 추정을 하기 위해서는 인체지방기질줄기세포 이식연구에 in vivo 동물실험연구가 수행되어져야 함을 제시하고 있다. Human mesenchymal stem cells(hMSC), that have been reported to be present in bone marrow, adipose tissues, dermis, muscles and peripheral blood, have the potential to differentiate along different lineages including those forming bone, cartilage, fat, muscle and neuron. Therefore, hMSC are attractive candidates for cell and gene therapy. The optimal conditions for hMSC expansion require medium supplemented with fetal bovine serum(FBS). Some forms of cell therapy will involve multiple doses, raising a concern over immunological reactions caused by medium-derived FBS proteins. Previously, we have shown that hADSC can be cultured in human serum(HS) during their isolation and expansion, and that they maintain their proliferative capacity and ability for multilineage differentiation and promote engraftment of peripheral blood-derived CD34 cells mobilized from bone marrow in NOD/SCID mice. In this study we determined whether hADSC grown in HS maintain surface markers expression similar with cells grown in FBS during culture expansion and compared gene expression profile by Affymetrix microarray. Flow cytometry analysis showed that HLA-DR, CD117, CD29 and CD44 expression in HS-cultured hADSC during culture expansion were similar with that in FBS-cultured cells. However, the gene expression profile in HS-cultured hADSC was significantly different from that in FBS-cultured cells. Therefore, these data indicated that HS-cultured hADSC should be used in vivo animal study of hADSC transplantation for direct extrapolation of preclinical data into clinical application.
최종렬,주종길,전은숙,고경래,이홍구,이규섭,김원규,Choi, Jong-Ryeol,Joo, Jong-Kil,Jun, Eun-Sook,Ko, Kyoung-Rae,Lee, Hong-Gu,Lee, Kyu-Sup,Kim, Won-Gyu 대한생식의학회 2010 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.37 No.2
Objective: It has been recently reported that very small stem cells with pluripotency are detected in murine and human. The purposes of this study are to confirm whether very small putative stem cells (VSPSCs), which have the proper characteristics of stem cells as well as the expression of stem cell markers, are detected in human endometrium. Methods: The endometrial cells of 5 women, which were obtained by endometrial biopsy, were cultured for 2 weeks and were confirmed for the expressions of alkaline phosphatase, OCT-4 and CXCR4 by immunochemistry. Subsequently VSPSCs were separated by percoll density gradient method and were cultured. Also VSPSCs and their derived cells were confirmed for the expressions of OCT-4 and CXCR4. Results: The colonies, which is composed with VSPSCs less than 3 ${\mu}m$ and the 5~15 ${\mu}m$ sized hyperchromatic round cells, were detected in the endometrium of all of women and showed the strong expressions of alkaline phosphatase, OCT-4 and CXCR4. In culture after the separation of VSPSCs by percoll, these cells showed the morphological and functional characteristics of stem cells; self-renewal, colony formation, embryoid body-like formation and differential plasticity. VSPSCs formed gradually the 5~15 ${\mu}m$ sized hyperchromatic round cells and the 10~20 ${\mu}m$ sized sphere-shaped cells by cell-to-cell aggregation or cell fusion. Then these cells differentiated the various cells including fibroblast-like cells, nerve-like cells and endothelium-like cells. VSPSCs and their derived cells often showed the strong expressions of OCT-4 and CXCR4. Conclusion: VSPSCs less than 3 ${\mu}m$ and their derived cells are detected in human endometrium and these cells have the proper characteristics of stem cells and the expressions of stem cell markers as alkaline phosphatase, OCT-4 and CXCR4. 목 적: 최근 다능성을 가진 극소형 줄기세포가 생쥐와 인간에서 발견된다고 보고되었다. 이 연구의 목적은 극소형 추정줄기세포들이 인간 자궁내막에 존재하는지, 그리고 이 세포들이 줄기세포의 고유 특성들과 줄기세포 표지자들을 발현시키는지 확인하기 위함이다. 연구방법: 자궁내막조직검사로부터 채취한 여성 5명의 자궁내막세포를 2주 동안 배양하였으며, alkaline phosphatase, OCT-4, CXCR4 면역화학염색을 통해 줄기세포 표지자 발현 여부를 확인하였다. 이후 percoll density gradient method 방법으로 극소형 추정줄기세포들을 분리하여 배양하였으며, 또한 극소형 추정줄기세포들과 그 유래의 세포들이 OCT-4와 CXCR4를 발현시키는지 확인하였다. 결 과: $3{\mu}m$ 미만의 극소형 추정줄기세포들과 5~15 ${\mu}m$의 과다염색질 원형세포들로 구성된 군집들이 모든 여성의 자궁내막세포에서 발견되었으며, alkaline phosphatase, OCT-4 및 CXCR4를 강하게 발현시켰다. Percoll을 이용하여 극소형 추정줄기세포들을 분리 배양한 결과, 극소형 추정줄기세포들은 자가재생, 배아체양 형성, 군집 형성, 분화 가소성과 같은 줄기세포의 형태학적 및 기능적인 특성들을 나타내었다. 극소형 추정줄기세포들은 세포간 응집 혹은 세포융합을 통하여 약 5~15 ${\mu}m$ 과다염색질 원형세포들과 약 10~20 ${\mu}m$ 구형세포들을 점진적으로 형성시켰다. 이후이 세포들은 섬유아세포 유사세포, 신경유사세포, 혈관내피유사세포를 포함하는 다양한 세포로 분화하였다. 또한 극소형 추정줄기세포들과 극소형 추정줄기세포에서 유래한 세포들은 흔히 OCT-4와 CXCR4를 강하게 발현시켰다. 결 론: 3 ${\mu}m$ 미만의 극소형 추정줄기세포들과 극소형 추정줄기세포에서 유래한 세포들이 인간 자궁내막에서 발견되며, 이 세포들은 줄기세포의 고유 특성들과 줄기세포 표지자인 alkaline phosphatase, OCT-4, CXCR4를 발현시킨다.
위암에서 Helicobacter pylori cagA 유전자와 숙주 Interleukin-1 Beta 및 Interleukin-1 수용체 길항제 유전자 다형성
이재승 ( Jae Seung Lee ),김광하 ( Gwang Ha Kim ),허정 ( Jeong Heo ),박도윤 ( Do Youn Park ),전은숙 ( Eun Sook Jun ),강대환 ( Dae Hwan Kang ),송근암 ( Geum Am Song ),조몽 ( Mong Cho ),양웅석 ( Ung Suk Yang ) 대한소화기학회 2003 대한소화기학회지 Vol.41 No.6
Background/Aims: Both Helicobacter pylori (H. pylori ) cagA genotype and host nterleukin-1 beta/interleukin-1 receptor antagonist (IL-1B/IL-1RN ) gene polymorphisms play a role in determining the clinical consequences of H. pylori infection. In this study, we investigated H. pylori cagA genotype and host IL-1B /IL-1RN polymorphisms in Korean patients to clarify their involvement in the occurrence of gastric carcinoma. Methods: The population comprised of 134 patients with H. pylori infection: 82 with gastric carcinoma and 52 with gastritis. The DNA was isolated from gastric biopsy sample and H. pylori cagA genotype was determined by PCR. The IL-1B ?11 polymorphism was genotyped by PCR-RFLP and the IL-1RN polymorphism was analyzed. Results: Infection with cagA+ H. pylori was not associated with an increased risk for gastric carcinoma. The IL-1B -511 *T carriers and IL-1RN *2 carriers did not show an increased risk for gastric carcinoma. Combining bacterial/host genotypes, cagA+ /IL-1B -511 *T carriers and cagA+ /IL-1RN *2 carriers showed no increased risk of gastric carcinoma. Classifying of gastric carcinoma into intestinal and diffuse type, the bacterial/host genotypes were also not associated with increased risk of each type. Conclusions: Combined H. pylori cagA gene and host IL-1B /IL-1RN polymorphisms showed no increased risk of gastric carcinoma. Therefore, it seems other endogenous or exogenous factors might play more important roles in the development of gastric carcinoma in Korean. (Korean J Gastroenterol 2003;41:438-446)
상부 위장관 질환에서 IL-1β 및 IL-1RN 유전자 다형성
이준홍 ( Joon Hong Lee ),김광하 ( Gwang Ha Kim ),허정 ( Jeong Heo ),박도윤 ( Do Youn Park ),전은숙 ( Eun Sook Jun ),강대환 ( Dae Hwan Kang ),송근암 ( Geum Am Song ),조몽 ( Mong Cho ),양웅석 ( Ung Suk Yang ) 대한내과학회 2003 대한내과학회지 Vol.65 No.1
Background : IL-1 β and IL-1 receptor antagonist (IL-1RN) genetic polymorphisms have been associated with development of gastric atrophy and increased risk of gastric carcinoma. This study aimed to determine the effects of these polymorphisms in gastroduo
교정용 밴드 제거 후 미생물 분포 및 치주 조직의 임상적 변화
양유미,김성식,전은숙,박수병 대한치과교정학회 2006 대한치과교정학회지 Vol.36 No.4
본 연구는 밴드 제거 직후 및 4주 경과 후 치주조직의 임상적인 환경변화와 미생물 분포 변화를 알기 위해 시행하였다. 최후방 구치에 밴드를 포함하는 고정식 교정 장치를 장착하고 교정 치료를 1년 이상 시행한 17명의 환자를 대상으로 하였다 (평균 나이 22세, 남자 6명, 여자 11명). 최후방 구치의 밴드를 제거한 직후와 제거 후 4주가 경과한 다음에 치주조직의 탐침 깊이와 출혈 빈도를 측정하였으며, 치은 연하의 치태를 채취하여 미생물의 분포를 조사하였다. 치주질환에 관련성이 깊은 미생물 중 Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola를 직접 Polymerase Chain Reaction 방법으로 존재 여부를 확인하였다. 밴드 제거 직후와 제거 후 4주가 경과한 시점의 치주조직의 탐침 깊이와 출혈 빈도, 병원성 미생물의 존재 여부를 통계적으로 비교하였다. 탐침 깊이와 출혈 빈도는 모두 하악 좌측 구치 협면에서 감소율이 가장 크게 나타났고, 상악 우측 구치 설면에서 감소율이 가장 작게 나타났다. 병원성 미생물 중 T. denticola가 밴드 제거 4주 후에 가장 높은 감소율을 보였으며, 하악보다 상악에서 감소율이 더 크게 나타났다. 이는 비록 밴드를 장착하여 치주 환경이 불량해졌다 하더라도 올바른 구강 위생 관리가 시행된다면 밴드를 제거한 후 정상적인 치주 상태로 회복될 수 있음을 예시한 것으로 생각되었다. Objective: The purpose of this study was to evaluate clinical and microbiological changes in periodontal tissue around the banded molars after debanding. Methods: This study included 17 young adult patients treated with fixed orthodontic appliances including bands on the last molars more than 1 years. Probing depth and bleeding frequency were measured and plaque samples were collected from the last banded molars in all quadrants of each patient. All the data were collected immediately after debanding and 4 weeks after debanding. Results: Using polymerase chain reaction based on 16S rDNA, the presence of Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia and Treponema denticola was detected. After debanding, probing depth, bleeding frequency, and prevalance of periodontopathogens were reduced. Probing depth and bleeding frequency were most decreased in the buccal site of the mandibular left molar and were least decreased in the lingual site of the maxillary right molar. Conclusion: The results of this study indicated that proper management of oral hygiene after debanding can recuperate unfavorable periodontal condition caused by orthodontic treatment.
백서의 치아이동 시 피질골 천공이 치주조직의 MMP-1,-8, -13 mRNA의 발현에 미치는 영향
곽춘,김성식,박수병,손우성,김용덕,전은숙,박미화 대한치과교정학회 2008 대한치과교정학회지 Vol.38 No.3
Objective: The aim of this study was to determine whether cortical punching stimulates the expression of matrix metalloproteinase-1, -8, and -13 in orthodontic tooth movement in rats. Methods: A total of 32 male sprague-dawley rats at 15 weeks old were divided into two groups of 16 rats each, to form the tooth movement with cortical punching (TMC) group and tooth movement only (TM) group. A total of 20 gm of orthodontic force was applied to rat incisors to cause experimental tooth movement. Cortical punching was performed on the palatal side near the central incisor with a 1.0 mm width microscrew in the TMC group. The duration of tooth movement was 1, 4, 7, and 14 days. Results: Measurements of the mRNA expression were selected as the means to determine the identification of expression of MMP-1, -8, and -13. In the TMC group, the expression of collagen type I was greater than that of the TM group from day 4 to day 14. Expression of TIMP-1 in the TM group was greater than that of the TMC group in the pressure side of PDL and alveolar bone cell at day 4. In the TMC group, TIMP-1 was expressed at the osteoclast, but not at the tooth surface of the TM group at day 14. Maximum induction of the mRNA of MMP-1 was observed on day 4 in the TMC group, but it was observed on day 7 in the TM group. MMP-8 mRNA of the TMC group was twice greater than that of the TM group at 4 days. In the TMC group, maximum induction of MMP-13 mRNA was observed on day 1. Conclusions: These findings suggested that cortical punching can stimulate remodeling of PDL and alveolar bone connective tissues during experimental orthodontic tooth movement in rats. 본 연구는 피질골 천공을 동반한 교정적인 치아이동이 통상의 교정적인 치아이동과 조직 재형성의 정도에 차이가 존재하는지 알아보기 위하여 시행하였다. 실험동물은 15주령 군 300 - 350 g의 자성 백서(Sprague-Dawley Rat)를 사용하였으며 피질골 천공을 동반한 치아이동 실험군(TMC group, n = 16)과 단순 치아이동 대조군(TM group, n =16)으로 나누었다. 모든 실험동물에 20 gm 이하의 힘으로 전치부를 이개시키는 치아 이동을 시행하였으며, 실험군은 상악전치부의 직후방 구개측에서 치근을 손상시키지 않도록 직경 1.0 mm의 microscrew를 사용하여 피질골 천공을하였다. 모든 실험동물은 1, 4, 7, 14일에 희생시켜서 matrix metalloproteinase (MMP)-1, -8, -13 효소의 RT-PCR과 I형 교원질(Collagen type I)과 Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)의 면역조직화학염색(immunohistochemistry) 을 시행하였다. MMP-1은 실험군에서 4일째에 가장 활발한 발현을 보이다가 7일째와 14일째에 조금씩 감소하는 경향을 보인 반면에, 대조군에서는 실험 7일째에 가장 높은 발현을 보이다가 14일째 들어서 감소하는 양상을 보였다. MMP-8은 실험 1일째부터 실험군이 대조군에 비해서 더 많은 발현을 보였으며, 특히 4일째의 실험군에서는 대조군보다 두 배 이상 발현되었다. MMP-13은 실험 1일째의 실험군에서 가장 높은 발현도를 보였으며, 대조군에서는 오히려 미처치 대조군에 비해 더 낮게 발현되었다. I형 교원질의 면역조직화학염색 결과는 실험 4일째부터 압박측 에서는 실험군에서 대조군보다 더 많은 교원질의 소실을 보였고, 인장측에서는 대조군이 실험군보다 더 많은 교원질의 염색 소견을 보였다. TIMP-1은 실험 4일째에는 압박측에서 대조군이 실험군보다 치주인대와 치조골의 골세포에서 좀 더 균일한 염색 소견을 보였다. 이상의 실험 결과에서 피질골 천공은 백서의 실험적 치아이동에 있어 치주인대와 치조골 결합 조직의 재형성 속도를 증가시키는 것으로 판단된다.
한국인 알코올 의존 환자에서 알코올 대사 효소 유전자형 빈도의 남녀 차이
김성곤,김철민,이덕기,황인복,이현숙,김성연,전은숙,송영상,박제민,최병무,김명정 大韓神經精神醫學會 2005 신경정신의학 Vol.44 No.2
Objectives : There are a number of preceding epidemiological studies reporting gender differences in the genetic etiology of alcohol dependence. The author investigated gender difference in the frequencies of ADH2 and ALDH2 genoypes between the patients with alcohol dependence and normal control. Methods : The subjects were 141 alcohol dependent patients (104 males, 37 females) and 138 normal control (79 males, 59 females). The frequencies of 1/1 and 1/2+2/2 (2+ afterward) genotypes for ADH2 and ALDH2 were investigated in male and female between alcohol dependence and normal control group. DNA was extracted from WBC in peripheral venous blood and PCR-RFLP method was used out for genotyping. Results : First, the frequency of ADH2 1/1 genotype was significantly higher in alcohol dependent patients than normal control in both genders. Second, while there was no gender difference in the frequency of ADH2 1/1 genotype in normal controls, in the patient group however, the frequency was significantly higher in females than males. Third, in male subjects with alcohol dependence, the frequency of ALDH2 1/1 genotype was significantly higher than in male normal control subjects. On the other hand, in female subjects with alcohol dependence, the frequency of ALDH2 2+ genotype was significantly higher than in female normal control subjects. Conclusion : These results suggest that while the risk of alcohol dependence is predominantly affected by ALDH2 1/1 geno-type in male, the female ADH2 1/1 genotype is mainly associated with the risk of alcohol dependence. This means that there are gender differences in the genetic etiology of alcohol dependence.
백서의 치아이동 시 피질골 천공이 치주조직의 OPG, RANK, RANKL의 발현에 미치는 영향
박우경,김성식,박수병,손우성,김용덕,전은숙,박미화 대한치과교정학회 2008 대한치과교정학회지 Vol.38 No.3
치아이동 시 피질골 천공이 치조골 재형성에 미치는 영향을 알아보기 위해서 생후 15주된 자성백서를 사용하여 피질골 천공 후 치아이동을 실시한 실험군(Tooth movement with cortical punching: TMC group, n = 16)과 교정적 치아이동만 실시한 대조군(Tooth movement only group: TM group, n = 16)의 치아주위조직을 면역조직화학염색을 통하여 관찰하였다. 실험군과 대조군의 실험동물에 20 gm의 힘으로 상악 전치부 사이를 이개시키는 치아이동을 시행하였으며 실험군에서는 상악 전치부 구개부위에 피질골 천공을 실시하였다. 치아이동 후 1, 4, 7, 14일째에 실험군과 대조군의 실험동물을 희생시켰다. 면역조직화학염색법으로 OPG, RANK, RANKL의 발현을 비교한 결과, OPG의 발현은 양 군 모두에서 미처치 대조군에 비하여 감소되었으나, 실험군에서의 발현이 대조군보다 컸으며, RANK, RANKL은 피질골 천공을 시행한 경우에 더 강한 발현을 보이는 것이 관찰되었다. 따라서 피질골 천공이 치주조직의 OPG, RANK, RANKL의 발현에 영향을 미치며 치조골의 재형성을 향상시키는 것을 알 수 있었다. Objective: The purpose of this study was to investigate whether cortical punching could stimulate the expression of OPG, RANK, and RANKL during tooth movement by immunohistochemistry. Methods: 34 sprague-dawley rats (15 weeks old) were allocated into 3 groups: TMC group (experimental group; Tooth Movement with Corticotomy, n = 16), TM group (control group; Tooth Movement only group, n = 16), and non-treatment group (n = 2). 20 gm of orthodontic force was applied to rat incisors by inserting elastic bands. The duration of force application was 1, 4, 7 and 14 days. A microscrew (diameter 1.2 mm) was used for cortical punching of the palatal side of the upper incisors in the TMC group. Results: Distributions of OPG, RANK, and RANKL were evaluated by immunohistochemistry. OPG, RANK and RANKL were observed on experimental and control groups. On the compression side, the degree of the expression of OPG decreased in both groups. The expression of RANK was most prominent in the experimental group of day 4. The expression of RANKL was most intensive and extensive in the experimental group of day 7. However, the expression of OPG was decreased in the experimental and control groups compared to the non treatment group. The expression of OPG, RANK and RANKL after force application were decreased at day 14. Conclusions: These findings suggested that cortical punching might stimulate remodeling of alveolar bone during a 2 week period of tooth movement without any pathologic change.