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저칼륨혈증 흰쥐 신장에서 Aquaporin mRNA와 단백 발현의 변화
김대성(Dae Sung Kim),이창배(Chang Bae Lee),배춘상(Choon Sang Bae),김백윤(Baik Yoon Kim),박성식(Sung Sik Park),안규윤(Kyu Youn Ahn) 대한해부학회 2009 Anatomy & Cell Biology Vol.42 No.1
There has been a general agreement that potassium depletion causes metabolic alkalosis and substantial morphological changes in kidney structure, and is associated with renal functional abnormalities, including a decrease in urinary concentrating ability. The present study was to examine the alterations of expression and distribution of AQP-1, 2, 3 and 4 mRNAs and proteins in the kidneys of normal and K-depleted rats using RT-PCR, Western blot analysis, and immunohistochemistry. Predicted size of AQP-1, 2, 3, and 4 mRNAs was 119, 822, 539, and 642 bp, respectively. AQP-1 mRNA expression was gradually decreased in K-depleted rats, particularly LK 2W. AQP-2, 3 mRNAs were markedly decreased in K-depleted rats. AQP-4 mRNA expression was markedly increased in K-depleted rats, particularly LK 2W. Western blot analysis demonstrated that AQP-1 protein expression was only decreased in LK 3D and others were comparable with normal rat. AQP-2, 3 proteins expression was markedly decreased in K-depleted rats, compared with normal rat. But, AQP-4 protein expression was markedly increased in K-depleted rats, particularly LK 3W. In immunohistochemistry, AQP-1 was detected in the apical membranes of proximal tubules and thin limb of Henle loop. In potassium-depleted kidney, the pattern of cellular labeling and signal intensity of AQP-1 protein is identical to that of normal rat. AQP-2 was detected in apical region and cytoplasm of the principal cells of entire collecting duct. In potassium-depleted kidney, the pattern of cellular labeling of AQP-2 protein is identical to that of normal rat, but signal intensity is markedly decreased. AQP-3 was detected in the bosolateral plasma membrane of principal cells of entire collecting duct. In potassium-depleted kidney, the pattern of cellular labeling of AQP-3 protein is identical to that of normal rat, but signal intensity is markedly decreased. AQP-4 was detected in the bosolateral plasma membrane of principal cells of entire collecting duct. In potassium-depleted kidney, the pattern of cellular labeling of AQP-4 protein is identical to that of normal rat, but signal intensity is markedly increased in outer and inner medullary collecting ducts. In summary, these results demonstrate that chronic hypokalemia shows the different expression pattern of AQP-1, 2, 3, and 4 mRNAs and proteins. These results suggest that a decrease in urinary concentrating ability is a major factor in the decreased AQP-2, 3 expression, and that is partly compensated by increased expression of AQP-4. 본 연구는 칼륨제한 식이 기간에 따른 흰쥐 신장 내 AQP-1, 2, 3 및 4의 발현 및 분포변화를 RT-PCR, Western 분석과 면역조직화학 방법으로 관찰하였다. RT-PCR 분석 소견에서 AQP-1 mRNA는 예견된 크기인 199 bp 근처에서 관찰되었고 칼륨제한 식이 군에서 정상 식이 군에 비해 감소하였다. Western 분석 소견에서 AQP-1 단백은 칼륨제한 식이 3일 군에서만 정상 식이 군에 비해 감소하였고 그 이후에는 유사하였다. AQP-2, 3 mRNA는 RT-PCR 분석 소견에서 예견된 크기인 822 bp, 539 bp 근처에서 관찰되었으며 정상 식이 군에 비해 칼륨제한 식이 군에서 뚜렷한 감소 경향을 나타냈었다. Western 분석 소견에서도 AQP-2, 3의 단백발현은 칼륨제한 식이 군에서 정상식이 군에 비해 크게 감소하는 것으로 나타났다. AQP-4 mRNA는 RT-PCR 분석 소견에서 예견된 크기인 624 bp 근처에서 관찰되었으며 다른 AQP과는 달리 정상 식이 군에 비해 칼륨제한 식이가 진행될수록 증가하는 양상을 보였다. Western 분석 소견에서도 AQP-4 단백은 발현양이 극히 낮았지만 칼륨제한 식이가 진행될수록 증가하는 경향이였다. 면역조직화학 소견상 AQP-1의 면역반응성은 토리쪽세관과 Henle 고리 내림부분의 첨부세포막에서 관찰되었다. 칼륨제한 식이 군의 AQP-1의 발현부위는 변화가 없었으나 발현 정도는 약간 감소하였다. AQP-2, 3의 면역반응성은 전 집합관에서 관찰되었다. 칼륨제한 식이 군의 AQP-2, 3의 발현부위는 변화가 없었으나 발현 정도는 현저히 감소하였다. AQP-4의 면역반응성은 전 집합관에서 발현되었다. 칼륨제한 식이 군의 AQP-4의 발현부위는 변화가 없었으나 발현 정도는 바깥속질집합관과 속속질 집합관에서 현저히 증가하였다. 이상의 결과로 저칼륨혈증시 신장 AQP-1, 2, 3, 4 mRNA와 단백발현 양상은 상호간에 차이를 나타내며, 요농축능의 감소는 AQP-2, 3에 의해 주로 일어나나 AQP-4가 발현의 증가로 보상적 기능을 할 것으로 생각되었다.
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백서의 우울모형에서의 칼슘통로 길항제 에타베린(Ethaverine)의 항우울효과
이상경,김선희,김록우,윤성환,김용관,김경태,김영훈 대한신경정신의학회 2000 신경정신의학 Vol.39 No.2
연구목적: 본 전임상연구에서는 우울증의 두가지 동물모형을 통해 에타베린이 단독 혹은 이미프라민과 병용처치 되었을 때의 효과를 알아보고자 하였다. 방법: 표준화된 검사법인 강제수영검사를 사용하여 옹성백서에게 에타베린(20mg/kg) 및 이미프라민 (20mg/kg)을 단독 혹은 병용 처치하였을 때의 부동시간의 변화를 관찰하였고, 경도의 만성 스트레스를 3주간 가한 후 4주간 에타베린과 이미프라민을 단독 혹은 병용 처치하였을때의 자당섭취량의 변화를 관찰하였다. 결과: 약물을 1회 단기처치 및 7일간 장기처치한 강제수영검사에서 이미프라민 및 에타베린 단독처치는 대조군에 비하여 부동시간의 단축을 보였고 에타베린은 이미프라민의 부동시간 감소에 대한 증강작용을보였다. 경도의 만성스트레스 실험에서도 3주간의 스트레스로 인하여 감소된 백서의 자당섭취량을 이미 프라민 및 에타베린이 회복시켰으며, 치료초기에 두 약물의 병용처치효과가 두드러졌다. 결론: 본 연구의 결과는 에타베린이 향우울 효과를 가지고 있음을 시사하며, 삼환계 항우울제인 이미프라민의 항우울효과를 증강시키므로 에타베린의 임상적 활용 가능성을 보여준다. Objectives: This pre-clinical study was performed to assess the effects of ethaverine in the two kinds of behavioral models of depression in rats. Methods: We observed the changes of the immobility time in the froced swimming test and the quantity of sucrose consumed in the chronic mild stress model, using ethaverine(20mg/kg) alone, imipramine(20mg/kg) alone, or ethaverine and imipramine concomitantly. Results: In the forced swimming test, both single treatment and chronic treatment(for 7days) with imipramine or ethaverine significantly reduced the immobility time, and concomitant chronic treatment with ethaverine potentiated the effect of imipramine. In the chronic mild stress model, both imipramine and ethaverine reversed the decreased sucrose consumption induced by 3-week stress and concomitantly treated ethaverine potentiated the effect of imi-pramine in the early phase of treatment. Conclusions: The data suggest that ethaverine can be used alone or concomitantly with other antidepressants in the clinical situation.
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위 평활근에서 비교감성 비콜린성 이완반응과 Substance P에 의한 조절
허광식 ( Gwang Sik Heo ),장성종 ( Sung Jong Chang ),박찬국 ( Chan Guk Park ),김만우 ( Man Woo Kim ),장인엽 ( In Youb Jang ),김진호 ( Jin Ho Kim ),신무경 ( Moo Kyoung Shin ),염철호 ( Cheol Ho Yeum ),윤평진 ( Pyung Jin Yoon ),전제열 대한소화기학회 2003 대한소화기학회지 Vol.41 No.5
Background/Aims: In a gastric fundic strip, electrical field stimulation (EFS) evokes TTX-sensitive biphasic responses, consisting firstly of cholinergic contraction followed by a transient relaxation. It is well known that nonadrenergic noncholinergic (NANC) inhibitory nerve mediates a transient relaxation. This study was performed to investigate the characterization of relaxation and its modulation by substance P. Methods: Using Guinea-pig gastric fundic smooth muscle tissues, we recorded mechanical contractions induced by EFS in the organ bath with platinum. Results: NG-nitro-L-arginine methyl ester, an inhibitor of nitric oxide synthase, reduced EFS-induced relaxation and these effects were reversed by L-arginine, a precursor of nitric oxide (NO). Sodium nitroprusside, a NO-donor, suppressed the fundic basal tension. Cell permeable 8-bromo-cGMP inhibited noradrenaline-induced contraction. The application of substance P increased basal tension and EFS-induced contraction and relaxation. NK-1 receptor antagonist ([D-Pro9-(spiro--lactam)9,10-Trp11]-Substance P) inhibited substance P-induced effects. TEA and apamin, K+ channel blockers, increased basal tension and EFS-induced relaxation. Conclusions: These results indicate that NANC inhibitory responses are mainly mediated by NO in the guinea-pig fundus and the release of NO is modulated by substance P through NK-1 receptor and by prejunctional K+ channels. (Korean J Gastroenterol 2003;41:358-365)
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