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      • KCI등재
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        Cyanobacterium Synechocystis PCC6803 내에서 Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 cryIVD 유전자의 발현

        이대원,박현우,진병래,정영호,박영목,강석권 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.2

        미생물 살충제로 사용되고 있는 B. thuringiensis를 모기유충방제에 적용하기 위한 시도는 B. thuringiensis가 수서생태계에서 부유하지 못하고 가라앉으며, 생활환을 이루지 못한다는 문제점으로 인해 적용에 어려움이 있다. 따라서 본 연구는 모기유충에 강한 독성을 갖는 B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14의 cryIVD 유전자를 모기유충의 먹이인 cyanobactrium에 도입하기 위하여 발현벡터 pCYASK 5-1을 제작하고, cyanobacterium Synechocystis PCC6803에 형질전환시켜, 세포내에서 cryIVD 유전자의 발현과 뇌염모기에 대한 독성을 조사하였다. 그 결과 형질전환체 내에서 cryIVD 발현은 immunoblot 분석을 통해 B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14에서 발현된 단백질과 같은 분자량으로 발현되는 것을 확인하였으며, 모기유충에 대한 형질전환체의 독성은 1.40×10^6 cells/ml 농도에서 약 80%의 치사율을 나타내었다. Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 is a gram-positive soil bacterium producing mosquitocidal parasporal inclusions composed of several crystal proteins. Among these crystal protein genes, cryIVD gene is one of major component which has 72 kDa in size. However, these parasporal inclusions sink quickly from the surface of water where mosquito larval feeding occurred. To develope mosquitocidal cyanobacterium, therefore, we constructed the expression vector, pCYASK 5-1 harboring cryIVD gene. The expression vector, pCYASk5-1 was transformed into the cyanobacterium Synechocystis PCC6803 reported as a natural mosquito larval food source and the transformants were selected with kanamycin. Expression of cryIVD gene in transformant was characterized by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and immunoblot analysis. The mosquitocidal activity of a transformant was determined electrophoresis (PAGE) and immunoblot analysis. The mosquitocidal activity of a transformant was determined with Culex tritaeniorhynchus. The results showed that the transformed cyanobacterium is toxic to mosquito larvae and will be expected as a potential agent that is used for mosquito control.

      • SCOPUSKCI등재

        Cyanobacterium Synechocystis PCC6803 내에서 Bacillus thuringiensis sunsp. morrisoni PG-14 cryIVD 유전자의 발현

        이대원,박현우,진병래,정영호,박영목,강석권,Lee, Dae-Weon,Park, Hyun-Woo,Jin, Byung-Rae,Chung, Young-Ho,Park, Young-Mok,Kang, Seok-Kwon 한국미생물 · 생명공학회 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.2

        Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 is a gram-positive soil bacterium producing mosquitocidal parasporal inclusions composed of several crystal proteins. Among these crystal protein genes, cryIVD gene is one of major component which has 72 kDa in size. However, these parasporal inclusions sink quickly from the surface of water where mosquito larval feeding occurred. To develope mosquitocidal cyanobacterium, therefore, we constructed the expression vector, pCYASK 5-1 harboring cryIVD gene. The expression vector, pCYASK5-1 was transformed into the cyanobacterium Syne- chocystis PCC6803 reported as a natural mosquito larval food source and the transformants were selected with kanamycin. Expression of IVD gene in transformant was characterized by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and immunoblot analysis. The mosquitocidal activity of a transformant was determined with Culex tritaeniorhynchus. The results showed that, the transformed cyanobacterium is toxic to mosquito larvae and will be expected as a potential agent that is used for mosquito control.

      • KCI등재

        Cry11Aa 유전자로 형질전환된 Synechocystis PCC6803의 작은빨간집모기와 중국얼룩날개모기 유충에 대한 살충효과

        이대원 한국응용곤충학회 2004 한국응용곤충학회지 Vol.43 No.1

        Bacillus thuringiensis produces crystal proteins toxic to medically and agriculturally important pests during sporulation. To improve the activity of insecticidal crystal protein in applying to mosquito larval control, an expression vector, pSyn4D harboring the mosquitocidal cry11Aa gene under control of psbA promoter of Amaranthus hybridus was constructed. This expression vector was transformed into Synechocystis PCC6803 and a transformant, Tr2C was selected with kanamycin. The mosquitocidal cry11Aa gene was stably integrated Into genomic DNA of Tr2C in PCR detection using cry11Aa-specific primers. The transformant expressed 72-kDa Cry11Aa protein and median lethal time (LT$\sub$50/) was approximately 2.1 days for Culex tritaeniorhynchus larvae and 0.7 day for Anopheles sinensis larvae, respectively. These results suggest this transformant can be used for mosquito larval control as a biological control agent. Bacillus thuringiensis는 포자형성기 동안에 위생해충이나 농업해충에 독성을 보이는 내독소 단백질을 생성한다. 내독소 단백질의 모기 유충 방제효과를 높이기 위해, 광합성에 관여하는 psbA promoter로 모기 살충성 cry11Aa유전자를 발현하는 pSyn4D벡터를 제작하고, 모기 유충이 먹이로 이용하는 Synechocystis PCC6803에 형질 전환시켰다. 형질 전환체들은 kanamycin이 포함된 배지에서 선발되었으며, 정상적인 생물검정을 통해 형질 전환체 Tr2C를 선발하였다. cry11Aa 유전자는 형질전환체의 genomic DNA에 안정적으로 결합되어 있는 것을 PCR을 이용하여 확인하였다. 형질전환체 Tr2C는 약 72-kDa크기의 Cry11Aa 단백질을 발현하였으며, 작은빨간집모기(Culex tritaeniorhynchus) 3령 유충과 중국얼룩날개모기(Anopheles sinensis) 3령 유충에 75%가 넘는 살충력을 보였다. 모기 유충에 대한 형질전환체의 반수치사시간(LT$_{50}$)은 작은빨간집모기 유충과 중국얼룩날개모기 유충에 대해 각각 2.1일과 0.7일이었다. 이상의 결과들은 형질전환체 Tr2C가 모기 유충방제에 유용하게 이용될 수 있음을 보여준다.

      • 흡연하는 청소년의 실태와 관련한 요인분석: 사회통제이론(social control theory)을 중심으로

        이대원 한국지방정부학회 2021 한국지방정부학회 학술대회자료집 Vol.2021 No.5

        본 연구는 질병관리청의 ‘2020년 제16차 청소년건강행태조사’ 와 부산광역시에 거주하는 흡연하는 중·고등학교 청소년들을 대상으로 ‘찾아가서 금연교실’ 프로그램을 운영하면서 조사한 설문지를 중심으로 흡연 청소년의 흡연실태와 현황, 원인, 경로 등을 분석하기 위하여 ‘사회통제이론’에서 출발하였으며, 사회통제이론이 흡연과 관련한 변인들을 설명하고 있다는 것이다. 종합하여 조사결과를 보면 다음과 같다. 첫째, 처음 흡연을 시작한 시기는 초등학교 6학년(11.9%)때이며, 철저한 입구조절정책(input control)을 통하여 흡연이 발생하지 않도록 사전에 차단하는 적극적인 조치가 요구된다는 것이다. 둘째, 흡연하는 청소년들을 위한 다면적인 프로그램과 더불어 사회전체의 응집력을 높이는 정책이 병행되어야 될 것으로 본다. 셋째, 장기적인 안목의 로드맵을 통하여 효과를 극대화할 필요가 있다. 넷째, 청소년의 일일 측정량과 연령, 수준에 맞춘 개입의 프로그램 정책이 필요할 것으로 여겨진다. 다섯째, 낮은자아통제력이론의 낮은자아통제력요인은 ‘금연성공’ 여부와 관련하여 구조방정식의 모형 경로분석결과 통계적으로 유의한 것으로 나타났다. 여섯째, 사회유대이론의 교사만족도, 금연교실만족도가 낮은자아통제력에 미치는 행위와 금연프로그램 만족도가 금연성공 행위에 미치는 모형분석을 한 구조방정식 경로분석의 결과도 통계적으로 유의한 것으로 밝혀져 큰 영향을 미칠 수 있다는 것이다. 따라서 본 연구는 흡연하는 청소년들에 대한 기초자료로 제공되며, 금연 프로그램 및 정책 개발을 하는데 유용성을 제공하였다는데 큰 의의를 두고자한다.

      • KCI등재

        Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 cryIVD 유전자로 형질전환된 Synechocytis PCC6803의 특성과 학질모기에 대한 살충효과

        이대원,박현우,김호산,진병래,유효석,김근영,강석권 한국응용곤충학회 1996 한국응용곤충학회지 Vol.35 No.1

        Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14의 cryIVD 유전자를 포함하고 있는 발현벡터 pCYASK5-1을 제작하여 Synechocystis PCCC6803에 형질전환시킨 후, 학질모기(Anopheles sinensis)유충에 대한 독성을 검정하였다. Kanamycin이 포함된 BG-11배지에서 선발된 형질전환체의 cryIVD 유전자 발현은 SDS-PAGE와 West-ern blot분석으로 확인하였다. 형질전환체는 A. sinensis 유충에 대해 높은 독성을 나타내었으며, 성장은 야생주인 Synechocystis Pccc6803과 유사하였다. 또 수심에 따른 형질전환체의 분포도 조사에서 전체적으로 살충농도의 세포수로 분포함을 확인하였다. 이러한 결과들은 B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14의 cryIVD 유전자로 형질전환된 Synechocystis PCCC6803이 모기유충 방제에 효율적으로 이용될 수 있음을 나타내었다. For the effective control of mosquito larvae, Anopheles sinensis, the expression vector pCYASK5-1 containing cryIVD gene of Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 was constructed and transformed into the cyanobacterium Synechocystis PCC6803. The transformants were selected on BG-11 medium containing kanamycin. The expression of cryIVD gene in transformant was confirmed by SDS-PAGE and Western blot analysis. The mortality of A. sinensis larvae was scored for 3 days. Furthermore, growth and distribution rate of transformant were examined. The results showed that Synechocystis PCC6803 transformed with cryIVD gene of B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 was highly toxic to A. sinensis larvae, demonstrating that it will be a potential agent for mosquito control.

      • KCI등재

        무용전공 대학생의 외모태도, 지각된 행동통제, 섭식의도와 건강섭식행동 간의 관계: 조절된 매개효과

        이대원 학습자중심교과교육학회 2023 학습자중심교과교육연구 Vol.23 No.12

        목적 본 연구의 목적은 계획된 행동이론(the Theory of Planned Behavor: Ajzen, 1985)을 토대로 무용전공 대학생의 섭식의도가 외모에 대한 사회문화적 태도와 건강섭식행동 간의 관계를 매개하는지를 검증하고, 섭식의도의 매개효과가 지각된 행동통제 수준에 의해 조절되는지를 검증하는데 두었다. 방법 연구대상은 무용학과 대학생 472명(남학생 70명, 여학생 402명)이며, 평균 나이는 20.26(SD=1.62)세이었다. 조사도구는외모태도, 건강 섭식의도, 지각된 행동통제 및 건강 섭식행동을 평가하는 질문지가 사용되었다. 자료는 기술통계, 확인적 요인분석, 상관분석 그리고 연구가설 검증을 위해 SPSS용 PROCESS(Model No.=58)를 이용하는 위계적 회귀분석을 통해 처리되었다. 결과 위계적 회귀분석의 결과는 다음과 같다. 첫째, 무용전공 대학생의 건강 섭식의도는 외모에 대한 사회문화적 태도와 건강 섭식행동 간의 관계를 매개하는 역할을 한다. 둘째, 건강 섭식의도가 높은 대학생은 건강한 섭식을 위해 자신의 행동을 통제하는 수준이높을수록 건강한 섭식행동을 하는 경향이 강하지만, 건강 섭식의도가 낮은 대학생은 자신의 행동을 통제하는 수준이 낮을수록 건강섭식행동이 낮다. 결론 본 결과는 무용전공 대학생들이 건강한 섭식행동을 지속하기 위해서는 무용수로서 외모와 체형에 대한 과도한 사회문화적 태도에 민감하게 반응하는 대신에 건강한 섭식행동을 관리하고 유지하기 위해 자신을 적극적으로 통제하려는 노력이 요구된다는 것을시사한다.

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