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Complementation System for Helicobacter pylori
김진문,Sung-Whan Kim,Sungil Jang,D. Scott Merrell,차정헌 한국미생물학회 2011 The journal of microbiology Vol.49 No.3
Previously Langford et al. (2006) developed the pIR203C04 complementation system for Helicobacter pylori,which can be used to complement and restore phenotypic effects in H. pylori mutant, and furthermore they used the complementation system in vivo experiments to animals without altering the ability of strain SS1 to colonize mice. In their previous study, the pIR203C04 was able to transform 26695, SS1, J99, and 43504 H. pylori strains by an electroporation method. However, in the present study using a natural transformation the pIR203C04 transformed only 26695 H. pylori but not SS1, J99, 7.13, and G27 H. pylori strains. Since the useful complementation system has a limitation of narrow selection among H. pylori strains, we redesigned the complementation system for the improvement. The same intergenic chromosomal site between hp0203 and hp0204 was utilized for the new complementation system because the insertion at the intergenic site didn’t show any polar effects and disruption of other H. pylori genes. The genome sequence analysis showed that the intergenic regions among H. pylori strains may have too low homology to each others to do a homologous recombination. Thus, in addition to the short intergenic region, the fragments of the new complementation system included 3′ conserved parts of hp0203 and hp0204 coding regions. Between the fragments there are a chloramphenicol acetyltransferase cassette and multicloning sites, resulting in pKJMSH. DNA fragment of the interest can be cloned into the multicloning sites of pKJMSH and the fragment can be integrated at the intergenic region of H. pylori chromosome by the homologous recombination. Indeed, by the natural transformation, pKJMSH was able to transform all five H. pylori strains of 26695,SS1, J99, 7.13, and G27, which are common for the investigation of molecular pathogenesis. Thus, the new pKJMSH complementation system is applicable to most H. pylori wild-type stains.
김진문 세계기독교통일신령협회 2004 統一世界 Vol.- No.7
내 신앙기준은 ‘첫째로 남녀 문제에 조심하고, 둘째는 공금을 잘 쓰자’의 두 가지이다. 이 두 가지만 잘하면 기본적으로 식구가 된다고 생각한다. 공금에는 십의 일조도 포함된다. 즉 십의 일조는 내 것이 아니고 하나님의 것이다. “십일조를 잘하면 창고가 비지 않으리라”는 성서말씀과 같이 오늘날까지 정기적 정액을 받아 본 적이 없었으나 아직까지 굶지 않고 살아가고 있다.
김진문 세계기독교통일신령협회 2002 統一世界 Vol.- No.12
무의미한 실천성 없는 기성세대의 잔소리 반항적 소음으로 가사의 내용을 알아들을 수 없는 젊음의 난무 과격한 소음과 난무는 청각장애를 부르고 근육을 약화시켜 마약을 부르고 성적 자극을 주어 남녀 혼란상을 부른다 반항은 비판은 되나 대안은 안 된다 하늘 심정을 생각하며 기성세대와 젊은이들은 모두 반성해야!