쉬겔라 증균배지의 성능 비교

인예원(Ye-Won In),하수정(Su-Jeong Ha),김석중(Seok Joong Kim),오세욱(Se-Wook Oh) 한국식품영양과학회 2011 한국식품영양과학회지 Vol.40 No.12

본 연구는 식품으로부터 Shigella spp.를 분리하기 위해서 현재 사용되고 있는 증균배지를 대상으로 증균성능을 비교 하였다. GN broth, Shigella broth, SF broth, SC broth 총 4개의 증균배지를 비교하였다. S. sonnei에 대해 각 접종 수준에 대한 성장은 Shigella broth에서 101 cfu/mL 낮은 수준의 존재 시에도 성장이 확인되었다. 분리배지에서 거의 구분이 되지 않는 Morganella spp.에 대한 증균은 Shigella broth를 사용할 경우 성장이 저해되었다. 식품을 대상으로 한 S. sonnei의 증균성능은 돼지고기에서 GN broth와 SF broth가 높은 증균능력을 보였으며 소고기에서는 GN broth에서의 증균능력이 높게 나타났으나 Shigella broth에서 증균능력이 높지 않았다. 실험에 사용된 배지는 식품 종류에 따라 증균되는 특성이 상이하므로 식품에서 Shigella spp.를 분리 하고자 할 경우 우선적으로 식품 특성을 고려하여 증균배지를 선택하는 것이 바람직할 것으로 생각되었다. The object of this study was to compare the performance of commercial enrichment media used for Shigella spp. A total of four enrichment media, Gram negative (GN) broth, Shigella broth (SB), selenite-F (SF) broth, and selenite cystine (SC) broth, were tested. When S. sonnei was inoculated into each enrichment broth at 10 cfu/mL of concentration, the highest growth was observed in Shigella broth. Morganella spp., which was not differentiated in selective agar of Shigella spp. thus can be counted as false positive, did not grow in Shigella broth in enrichment step. When S. sonnei was artificially inoculated into pork, it was mostly recovered through an enrichment process with GN broth and SF broth. However, in the case of beef, S. sonnei was mostly recovered with GN broth but largely failed with Shigella broth. Therefore, enrichment media for Shigella spp. should be selected by considering the food matrix in order to increase the chance of isolating it from foods.

집단 발생한 Extended-spectrum β-lactamase(ESBL) 생산 Shigella sonnei 감염에 의한 세균성 이질에 관한 연구

임현택,이소희,이정화,김정은,김교순,정은주,이승현,강창규,홍성진,Lim, Hyun Taek,Lee, So Hee,Lee, Jung Hwa,Kim, Jeong Eun,Kim, Kyo Sun,Jeong, Eun Ju,Lee, Seung Hyun,Kang, Chang Gyu,Hong, Seong Jin 대한소아청소년과학회 2005 Clinical and Experimental Pediatrics (CEP) Vol.48 No.10

목 적 : ESBL 생산 S. sonnei에 의한 장염의 대규모 발생은 과거 국내는 물론 세계에서도 유래를 찾아볼 수 없었다. 저자들은 집단 발생한 ESBL 생산 S. sonnei에 의한 장염 환자의 임상적 특징과 치료에 대한 반응 등을 분석하여 ESBL 생산 S. sonnei 감염증에 대한 치료 지침을 마련하는데 도움이 되고자 한다. 방 법 : 연구 대상은 2004년 11월 충주 ${\bigcirc}{\bigcirc}$초등학교를 중심으로 집단 발생한 급성 장염 환자 중 분변 배양 검사상 S. sonnei가 검출되어 치료받은 환자 103명을 대상으로 하였다. 환자에서 분리된 S. sonnei에 대해 항생제 감수성 검사와 DNA 염기 서열 검사를 시행하였고, 환자들의 임상적 특징과 검사 소견, 그리고 항생제에 대한 반응 등을 후향적으로 분석하였다. 결 과 : 임상 증상은 발열 96.1%, 설사 93.2%, 복통 76.7%, 두통 71.8%, 구토 65.0%, 그리고 구역 41.7% 순으로 나타났다. 발열은 평균 2.0일간 지속되었고, 설사는 평균 3.9일간 지속되었다. 설사의 양상은 수양성 설사는 69%, 점액성 설사는 26%, 그리고 혈변은 5%에서 관찰되었다. 말초 혈액 검사에서 백혈구 증다증을 보이는 경우는 53.4%이었고, 혈청 검사에서 CRP 양성을 보이는 경우는 78.6%이었다. 대변 직접 도말 검사에서 백혈구가 고배율 당 50개 이상인 경우가 11.7%, 그리고 5-20개인 경우 9.7%이었다. 대변 잠혈 반응은 71%에서 양성이었다. 본 유행에서 분리된 ESBL의 유형은 염기 서열을 분석한 결과 CTX-M-14 유형으로 밝혀졌다. 항생제 투여에 대한 미생물학적 치료 결과는 ciprofloxacin 투여자 중 100%(9/9), azithromycin 투여자 중 100%(5/5), cefdinir 투여자 중 6.9%(5/72), ceftriaxone 투여자 중 0%(0/8), ceftizoxime 투여자 중 12.5%(1/8), TMP/SMX 투여자 중 0%(0/8), ampicillin/sulbactam 투여자 중 42.9%(3/7), amoxicillin/clavulanic acid 투여자 중 20%(1/5), 그리고 imipenem/cilastatin 투여자 중 68.8%(11/16)에서 추적 검사상 음전 되었다. 결 론 : 소아에서 발생한 ESBL 생산 S. sonnei에 의한 세균성 이질에 대한 항생제 선택에서 비용-효과 면이나 안전성 면에서 azithromycin이 매력적인 일차 선택약일 수 있을 것으로 사료된다. Ciprofloxacin은 비용-효과 면에서는 우수한 약제일 수는 있으나 소아에서의 사용은 아직 이르다고 생각된다. Purpose : An outbreak of ESBL-producing Shigella sonnei enteritis was unprecedented not only in Korea but throughout the world in the past. We intended to devise a management guideline for ESBL-producing shigellosis based on analysis of clinical manifestations and response to therapy. Methods : We analyzed 103 patients who were admitted to the hospital with acute GI symptoms and were shown positive result for S. sonnei on stool culture. We performed sensitivity test to the antibiotics and DNA sequencing of ESBL gene in the isolated S. sonnei colonies. In addition, we retrospectively analyzed their clinical characteristics, laboratory results, and clinical and microbiological responses to the antibiotics. Results : Among the clinical manifestations, fever was the most frequent(96.1%), followed by diarrhea(93.2%), abdominal pain(76.7%), headache(71.8%), vomiting(65.0%), and nausea(41.7%). The fever was sustained for average of 2.0 days and diarrhea for 3.9 days. Watery diarrhea was the most common(69%) followed by mucoid(26%), and bloody stool(5%). On peripheral blood smear, leukocytosis was noted in 53.4% of patients, and 78.6% of patients tested positive for serum CRP response. On stool direct smear, 11.7% of patients showed more than 50 WBCs/HPF, and 9.7% of patients between 5 to 20 WBCs/HPF. Stool occult blood was positive in 71% of patients. Production of CTX-M-14 type ESBL was reported for all S. sonnei strains isolated from this outbreak. Microbiological eradication rates to various antibiotics were as follows : 100%(9/9) to ciprofloxacin, 100% 5/5) to azithromycin, 6.9%(5/72) to cefdinir, 0%(0/8) to ceftriaxone, 12.5%(1/8) to ceftizoxime, 0%(0/ 8) to TMP/SMX, 42.9%(3/7) to ampicillin/sulbactam, 20%(1/5) to amoxicillin/clavulanic acid, and 68.8 %(11/16) to imipenem/cilastatin. Conclusion : It is presumed that azithromycin can be an attractive option for the treatment of ESBL-producing S. sonnei enteritis in pediatric population, given its cost-effectiveness and safety. Although ciprofloxacin is another cost-effective agent, its use in pediatric population may be a bit too premature.

2008년 영천시 지적장애인 학교와 경산시 재활원에서 발생한 세균성이질에 관한 역학조사

이현동(Hyun-Dong Lee),이순옥(Soon-Ok Lee),임현술(Hyun-Sul Lim) 한국농촌의학 지역보건학회 2009 농촌의학·지역보건 Vol.34 No.1

2008년 9월 경상북도 영천시 소재 Y 지적장애인 특수학교에서 설사 유행이 신고되었고, 일부 환자의 검체에서 Shigella sonnei가 검출되었다. 이에 Y 학교와 초발 환자 신OO이 기거하고 있던 경산시 소재 D 재활원에서 발생한 세균성이질에 관한 역학조사를 실시하였다. Y 학교와 D 재활원은 지적장애인을 위한 학교 및 생활시설로서 모두 직영급식을 하고 있다. 지적장애가 있는 학생과 원생들을 상대로 설문조사는 시행하지 않았고 교사와 직원들을 상대로 면담을 실시하였다. Y 학교와 D 재활원에서 직장도말 검사를 각각 298건, 361건 실시하고 환경검체 검사를 각각 60건, 20건을 실시하였다. 학교와 재활원의 환경조사를 실시하였고 음용수와 조리용수, 생활용수의 공급원을 파악하였다. 환자는 격리 치료하고 추가 환자 발생을 일일 능동 모니터링하였다. 환례는 2008년 9월 18일부터 9월 26일까지 Y 학교와 D 재활원의 구성원 중에서 설사(하루 2회 이상의 묽은 변)가 있는 경우 혹은 직장도말 배양검사 결과 Shigella sonnei 양성인 경우로 정의하였다. 환례 정의에 따라 조사 대상 659명 중 환례는 8명으로 1.2%의 발생률을 보였고 이들은 모두 Y 학교 학생이었다. 직장도말 배양검사 결과 Shigella sonnei가 5명의 학생에서 검출되었고, 이들 중 3명에서는 설사 증상이 있었으며 나머지 2명은 무증상이었다. 환례 8명 모두 단체숙식을 하고 있었는데 이들 중 2명은 Y 학교 기숙사 기린방에서 생활하였고, 4명은 D 재활원 온유방, 나머지 2명은 D 재활원의 까치방과 자비방에서 각각 생활하였다. Y 학교와 D 재활원의 환경조사 결과 특이사항이 없었으며, 공통적으로 음용수와 조리용수는 상수도에서 공급받고 화장실의 생활용수는 하수도에서 공급받고 있었다. D 재활원의 지하수 1건에서 대장균군이 양성이면서 일반세균이 20,000 CFU/mL으로 나왔다. Pulsed-Field Gel Electrophoresis 검사에서 5건 모두 동일한 DNA 절편 양식을 보였다. D 재활원과 Y 학교에서 발생한 세균성이질은 동일한 균주에 의한 유행으로 판단한다. D 재활원의 온유방에서 현성 또는 불현성 감염자인 교사나 자원봉사자와의 직·간접 접촉을 통해 최초로 1명 이상의 원생에게 전파시켰을 가능성이 있다. 그 후 환례들과 직·간접 접촉에 의하여 D 재활원의 온유방 내, 다른 방과 Y 학교 학생에게 전파되었을 가능성이 있다고 추정한다. 단체 시설의 교사와 자원봉사자에 대하여 손씻기의 중요성이 더 강조되어야 하고 전염이 가능한 증상이나 질병이 있을 때에는 접촉이나 봉사 활동을 자제해야 할 것이다. Objectives: In September 2008, an outbreak of diarrhea occurred among students attending Y school in Yeongcheon-si. Shigella sonnei was cultured from some of the rectal swabs. An epidemiological investigation was carried out to determine the source of the infection and the mode of transmission of the shigellosis outbreak. Methods: The index case lived in the D rehabilitation facility in Gyeongsan-si and an additional epidemiological investigation was carried out there. The cases could not be questioned due to their mental handicaps. The teachers were interviewed instead. A patient case was defined as a resident with diarrhea more than one time a day from September 18 to September 26, 2008 or a resident with confirmed Shigella sonnei at the Y school or the D rehabilitation facility. Results: The attack rate was 1.2% (8 persons) among 659 persons in the Y school and D rehabilitation facility. Five persons were microbiologically confirmed to have the infection and three persons were diagnosed on the basis of symptoms. Shigella sonnei was cultured from five of the 659 rectal swabs. However, 80 environmental specimens including drinking water, preserved foods, and cooking utensils were negative. All eight patients were Y school students and had been living in group boarding and lodging. Six of them lived in the D rehabilitation facility and two lived in the dormitory at the Y school. Five cases showed pulsed-field gel electrophoresis patterns that were identical for Shigella sonnei. Conclusions: The results of this study showed that the infection source of the shigellosis outbreak, in the two places, were identical. It is likely that the infections initially spread from a teacher or volunteer and then among the students.

국내에서 분리된 Shigella sonnei균에 대한 PFGE를 이용한 Molecular typing

김성한,전정훈,김준영,박미선,유재연,강연호,이복권 국립보건연구원 1999 국립보건원보 Vol.36 No.-

Shigella sonnei에 의한 증후성 요로감염 1례

박진선,오필수,김제우,이영아,최하주,윤혜선,송원근,김현태,Park, Jin Sun,Oh, Phil-Soo,Kim, Je Woo,Lee, Young Ah,Choi, Ha Ju,Yoon, Hae-Sun,Song, Won Keun,Kim, Hyun Tae 대한소아감염학회 1998 Pediatric Infection and Vaccine Vol.5 No.1

Shigella spp. cause classic bacillary dysentery that rarely result in extraintestinal complications. Urinary tract infections(UTIs) due to Shigella spp. are rare, and Shigella sonnei UTIs are extremely rare. We report a case of symptomatic UTI due to S. sonnei. A 9-year-old female presented with a history of fever, abdominal pain, loose form diarrhea, vomiting, and dysuria for 1 day. S. sonnei was identified from urine culture and stool culture result was no Salmonella and Shigella isolated. She was treated with gentamicin and cefuroxime intravenously for 5 days, which suscessfully controlled clinical features of infections.

성인에서 발생한 Shigella sonnei 균혈증 1예

강소영,이희주,서진태 대한임상병리학회 2001 대한임상병리학회지 Vol.21 No.3

Real-time PCR-based quantification of Shigella sonnei in beef and a modified Gompertz equation-based predictive modeling of its growth

채창훈,장해진,오세욱 한국응용생명화학회 2016 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.59 No.1

Shigella sonnei shares many physiological aspects with Escherichia coli; thus, so far no culture-based method has been developed to detect and quantify S. sonnei separately from E. coli. Therefore, little information is available for the growth characteristics of S. sonnei in food. This study aimed to address a systematic scheme to quantify S. sonnei in beef separately from E. coli using quantitative real-time polymerase chain reaction (qRTPCR) and subsequently predict its growth characteristics. The use of S. sonnei-specific primers in qRT-PCR allowed to obtain growth curves of S. sonnei in beef at different temperatures, and the fitting of curves into a modified Gompertz model let us analyze the growth characteristics such as the lag time, maximum growth rate, and maximum quantity of S. sonnei in beef at different temperatures. A systematic scheme for RT-PCR-based quantification and a predictive modeling described in this study may be a useful means to analyze S. sonnei growth in food.

국내에서 분리된 Shigella sonnei의 병원성 유전자 및 분자역학적 분석

박진홍,문지영,장철훈,김영부 대한임상미생물학회 2005 Annals of clinical microbiology Vol.8 No.2

Background: Most of the shigellosis outbreaks in Korea have been caused by Shigella sonnei since late 1990's. We analyzed 36 strains of S. sonnei isolated in South Korea from 1998 to 2001 by molecular epidemiologic tools to understand genetic relationship of the outbreaks. Methods: The 36 strains of S. sonnei were tested for the presence of virulence genes ( ial, ipaH, stx, set1A, set1B and sen) using polymerase chain reaction (PCR) method and for the production of Shiga-toxin using latex agglutination test. Seventeen representative strains were selected and their genetic relevance was analyzed by plasmid profile and pulsed-field gel electrophoresis(PFGE). Results: By PCR, ipaH gene was detected in all 36 strains, set1B gene in 15 strains (41.7%), and sen gene in 16 strains (44.4%); all strains were negative for set1A gene. Although stx gene was positive in four strains by PCR method, the toxin was negative by latex agglutination test. The strains were differentiated into 11 groups by plasmid profile and 1 type with 3 subtypes (A-1, A-2 and A-3) by PFGE. Conclusion: There was a wide range of diverse virulence genes present in the outbreak strains of S. sonnei. PFGE analysis indicated that all the strains tested were related with each other despite minor genotypic and phenotypic differences. A genetically identical clone of S. sonnei was estimated to be the cause of the outbreaks.

최근 5년 동안 국내에서 분리된 Shigella sonnei의 항균제 내성 유형과 내성유전자형 분석

허완,이상조,권기석,장종옥,이중복,Huh, Wan,Lee, Sang-Jo,Kwon, Gi-Seok,Jang, Jong-Ok,Lee, Jung-Bok 한국미생물학회 2007 미생물학회지 Vol.43 No.1

This study has been carried out for investigating the relatedness of representative 135 Shigella sonnei strains isolated from 2000 to 2004 by using biotyping and antimicrobial resistance. All strains showed typical biochemical characterisics of Shigella strain. Among 135 strains,79 (58.5%) strains were biotype "g",54 (40.0%) strains were biotype "a" and 2 (1.5%) strains were biotype "e". The results of susceptibility test against 16 antimicrobial agents were like this. Most of strains were susceptible to AN, CIP, C and GM. 129 (95.6%) strains were resistant to SXT, 126 (93.3%) strains were resistant to TE and 122 (90.4%) strains were resistant to SM. One hundred thirty two (97.8%) strains were resistant to more than two antimicrobial agents. R28 type (antimicrobial resistance patterns 28: resistant to AM, SAM, TE, TIC, SXT, K, SM and AmC) were 42 strains (31.1%). The other strains were showed 33 kinds of R patterns. The results of $bla_{TEM}$, sulII, tetA and strA gene detection were coincided with phenotype of antimicrobial resistance by disk diffusion method. But some strains which had sulII and strA genes were not showed the resistance against SXT and SM. 2000-2004년 국내에서 분리된 S. sonnei 135주를 선별하여 16종의 항균제 내성 유형, $bla_{TEM}$, suulII, tetA, strA등의 내성유전자형을 PCR등의 방법으로 항생제내성 표현형과 유전자형의 유연관계를 파악하였다. 균주들의 생화학적 성상은 전형적 인 이질성 세균의 특성을 나타내었으며, biotyping에서는 g type이 58.5%(79주), a type이 40.0%(54주), e type이 1.5%(2주)로 나타났다. 항균제 16종의 항균제 내성 패턴은 AN, CIP, C, GM등의 약제에는 감수성을 보였으나, SXT 약제에는95.6% (129주), TE 약제에는 93.3% (126주), SM에는 90.4% (122주)등의 순으로 내성을 나타내었다. 두 가지 이상 약제 내성균이 97.8% (132주), 그 중에서 R28 (AM, SAM, TE, TIC, SXT, K, SM, AmC : 8제 약제 내성) 형이 31.1% (42주)를 차지하였으며, 33가지 형태의 다양한 내성 패턴을 나타내었다. $bla_{TEM}$, sulII, tetA 및 strA등의 내성유전자 분포에서는 Disk diffusion법에서 내성을 보인 경우에는 모두 각각의 유전자 증폭산물이 검출되었다.

Possibility of CTX-M-14 Gene Transfer from Shigella sonnei to a Commensal Escherichia coli Strain of the Gastroenteritis Microbiome

조승학,한순영,강연호 질병관리본부 2014 Osong Public Health and Research Persptectives Vol.5 No.3

Objectives: To investigated whether the CTX-M-14 gene could be transferred from a clinical Shigella sonnei strain to commensal Escherichia coli strain in the gastroenteritis microbiome. Methods: E. coli strains were isolated from 30 stool samples of S. sonnei infected students in a gastroenteritis outbreak in 2004 and were characterized by antibiotic resistance analysis, in vitro conjugation and in vivo transfer of CTX-M-14 gene and molecular assays. Results: One strain of Escherichia coli that had high levels of resistance to cefotaxime was isolated from a patient infected with S. sonnei. Isoelectric focusing showed that the E. coli and S. sonnei strains produced a b-lactamase with an isoelectric point of 8.1. Moreover, polymerase chain reaction analysis indicated that both strains possessed the same DNA sequences for CTX-M-14. The results of in vitro and in vivo conjugation showed that the efficiency of CTX-M-14 transfer from S. sonnei to E. coli was similar to CTX-M-14 transfer between E. coli strains. Conclusion: The data suggest that the acquisition of the extended-spectrum blactamases gene by pathogenic bacteria in the human intestinal tract to commensal microbiome bacteria can cause serious infectious diseases.