RGP 콘택트렌즈 다목적 용액이 L929 세포에 미치는 저해효과

윤 영,김재민,이승아,신중섭,나명석,이종빈 대한시과학회 2000 대한시과학회지 Vol.2 No.1

L929 세포를 배양하여 현재 시중에서 유통되고 있는 8 개 회사의 Alcon Optiso와, Ciba SOLO care hard, Allergan Total Care, Boston Simplicity, B&L Wetting and Soaking Solution, Menicon pharma 02 Care, 새 한 Aquas - multi, 중외 제 약 앵 피 에스액 둥 8종류의 가스투과성 경성 콘택트렌즈를 위한 MPS를 25% 농도로 배양세 포에 처리하고 48시간 동안 배양한 후 MTT, SRB assay 그리고 NR assay로 세포 수준의 독성을 검정하였다. L929세포에 MPS를 처리하여 MTT assay한 결과 4종류 의 MPS 에서 세포 중식 저해율이 30% 이상으로 나타났고, 3종류의 MPS는 대조군과 유사하였다. SRB assay의 경우는 2종류를 제외한 모든 제품에서 30% 이하의 세포 중식 저해율이 나타났다. NR assay는 6종류의 MPS 에서 세포 증식 저해용이 30% 이상으로 나타났고 2종류의 MPS는 대조군과 유사하였다. 이러한 결과로 볼 때 일부 제품의 RGP 렌즈용 MPS가 L929세포 중식올 저해하는 것으로 사료된다. To investigate the i며1ibitoη effect of multipurpose solutions, L929 cells were cultured and treated with eight multi purpose solutions(MPSs) for RGP of eight companies(Alcon Opti - soak, Ciba SOLO care hard, Allergan Total Care, Boston Simplicity, B&L Wetting and S때선ng Solution, Menicon ph없ma 02 C따e, Saehan Aquas - multi, Junwae MPS solution). The cytotoxicity was measured by MTT, SRB and NR assay. 1n MTT assay at 48 hrs, four of them had over 30% of growth inhibitioin on L929 cells. 1n SRB assay at 48 hrs, six of them had less 30% of growth inhibitioin and in NR assay at 48 hrs, six of them had over 30% of growth inhibition on L929 cells.

다목적 콘택트렌즈 용액이 HCE 와 L929 세포에 미치는 저해효과

윤영,유근창,김재민,나명석,이종빈 대한시과학회 1999 대한시과학회지 Vol.1 No.1

HCE 세포와 L929 세포를 배양하여 현재 시중에서 유통되고 있는 6 개 회사의 Lens Mate. ReNu. ReNu MultiPlus. SoLo Care Soft. Complete, Hypa Opia 등 7종 류의 MPS 를 배양세포에 처리하고 48 시간 동안 배양한 후 MTT 와 SRB 염색방법을 사용하여 세포 수준의 독성을 검정히였다. HCE세포와 L929세포에 MPS 를 처리하여 MTT assay 결과 4종-류의 MPS에서 세포 증식 저해율이 30% 이상으로 나타났고. 3 종류의 MPS는 대조군과 유사하거나 더 높은 증식율을 보였다. SRB assay 결과 HCE 세포에서는 5종류의 MPS 에서 세포 증식 저해율이 30% 이상으로 나타났다. 그 러나 L929 세포에서는 모든 제품이 세포 -증식 저해율 30% 이하로 나타났다. MPS를 세포주에 처리할 경우 MTT 방법이 SRB 방법보다 더 민감하였다. 이러한 결과로 볼 때 일부 제품의 MPS 가 HCE 세포와 L929세포 증식을 저해하는 것으로 사료된다. 1'0 investigate the inhibitory effect of multi purpose solutions. HCE and L929 cells were cultured and treated with seven Multi Purpose Solutions( MPSs) of six companies (Lens Ma te‘ ReNu. ReNu MultiPlus. SoLo Care Soft. Complete. Hypa Opia). The cytotoxicity was measured by M1'T and SRB assay. In MTT assay. f()ur of them were showed over 30% of cell growth inhibition. Five of them had over 30% of growth inhibition on the HCE cells. but all of them were non cytotoxic 011 L929 cells in SRB assay. MTT assay was more sensitive than SRB assay in this study. We recommended that MPSs were removed by saline solution before lens insertion. We suggest that MTT assay is better than SRB assay to investigate cell growth inhibition rate.

인공누액과 식염수의 세포증식 억제효과에 관한 연구

고은경,김재민,윤 영,나명석,신중섭,이종빈 대한시과학회 2000 대한시과학회지 Vol.2 No.1

본 연구는 시중에서 유통되는 눈물분비 부족 및 접액부족으로 인한 안구건조증상 의 해소와 하드 콘택트렌즈의 윤활제로서 사용되는 인공누액(Artificial Tears) 10종 류와 렌즈 세척 후 행꿈과 습용 및 안구 세척에 이용되는 둥 가장 전반적으로 많이 사용되고 있는 점안제인 생리식염수(S머ine) 7종류를 배양 생쥐섬유모세포(L929 cell)에 25% 농도로 처리하고 48시간 동안 배양한 후 ELISA Reader(multi well microplate reader)를 사용해 MTT와 SRB Assay로 세포증식 저해 정도률 검정하였다. MTT Assay 결과, 인공누액의 경우 10종류 중 6종류 제품에서, 40% 이상의 세포증식 저해 가 나타났으며 식염수에서는 7종류 중 3종류에서 40% 이상의 세포중식 저해를 나타 냈다. SRB Assay결과, 인공누액 5종류에서 60% 정도의 세포중식의 저해와 식염수 3 종류에서 40% 이상의 세포중식 저해가 나타났다. 이러한 결과로 볼 때 일부 제품의 인공누액과 식염수에서 L929 세포중식올 저해하 는 것으로 사료된다. To investigate the cell growth inhibitory effect of artificial tears, which is used to solve the dη eye syndrome that is resulted from efficiency of tear and mucous secretion and is used to the conditioning solution of the hard contact lens, and saline solutions, that is used to rinsing, moisturing and washing of the eye broadly, L929 cells were cultured and treated with ten types of artificial tears and seven types of the saline solutions. After treating about 48 hrs, the cell growth inhibitorγ effect was measured by MTT and SRB assay. ln MTT assay, six of artificial tears had over 40% of growth inhibition on the L929 cells on artificial tears and three of salines were showed 40% of the cytotoxicity of L929 cells. ln SRB assay, five of them had over 60% of cell growth inhibition on artificial tears and three of salines were showed 30% of the cytotoxicity of L929 cells. This result suggest that 하tificial tears and salines should be tested by cytotoxicity in vitro.

생쥐 배양섬유 모세포주 L929에 미치는 중금속(Cd, Ni, Zn)류의 세포독성에 관한 연구

이종빈,나명석,황영진,위성욱,최진희,김선희,유춘만,김재민 한국환경보건학회 1997 한국환경보건학회지 Vol.23 No.2

The study on the cytotoxicity of heavy metals was carried out to evaluate the cytotoxic effect of those on mouse L929 fibroblast cell in 96-well microtiter plates. The cytotoxicity was assayed by the neutral red, tetrazolium MTT, total protein, micronuclei test. The cytotoxicity of the heavy metals by neutral red and tetrazolium MTT was showed in order, cadmium > zinc > nickel for the cationic metals tested. The effect of metal-metal interaction on the cytotoxicity showed a marked reduction of cadmium toxicity by zinc, to a lesser degree, by nickel. The amount of total protein in treated group added heavy metals was less than that of the control and treated cadmium alone was less than those of combination with nickel or zinc. At midpoint cytotoxicity values of heavy metals, the frequency of micronuclei on the cell treated heavy metals was more than that of control and treated cadmium alone was more than those of combination with nickel or zinc. From those results, it could be suggested that the heavy metals decreased the viability of mouse fibroblast L929 cells in a concentration-dependent manner and have cytogenic toxic effects, but mixed group decreased the cytotoxic and cytogenic toxicity on L929 cells.

다목적 용액의 계면활성제 Tyloxapol 과 Tromethamine 이 L - 929 세포에 미치는 저해효과와 단백질 제거효과의 비교

유근창,박현주,김재민,이종빈 대한시과학회 2001 대한시과학회지 Vol.3 No.1

본 연구는 콘택트렌즈의 세척용으로 사용되는 여러 가지 계면활성제중 널리 사용 되고 있는 Tyloxapol과 Tromethamine의 단백질 게거 효과와 L-929세포에 미치는 저해효과를 서로 비교하기 위하기 위해 먼저 렌즈를 인공누액에 65시간 담근 후 계 면활성제의 처리시간에 따라 단백질 제거효과를 UV Photo-spectrometer를 이용하여 측정하였다. 또한 계면활성제의 L-929세포에 미치는 저해효과는 MTT assay, LDH assay 방법으로 측정하였다. 연구 결과 계면활성제가 L-929세포에 미치는 저해효과는 통일 농도에서 Tyloxapol 이 Tromethamine보다 높은 것으로 나타냈으며, 세포 수도 농도 의폰적으로 감 소하였다. 독성의 차이는 LDH assay 보다 MTT assay가 더 민감도를 보였다. 침착 된 단백질에 대한 세척효과는 동일농도에서 Tyloxapol 이 Tromethamine보다 뛰어났 다. 단백질 제거효과는 농도 의존적으로 효과가 높은 것으로 조사되었으며, Tyloxapol과 Tromethamine의 세포증식 저해를 나타내는 최저농도에서 Tyloxapol 이 Tromethamine보다 단백칠 제거효과는 월둥히 뛰어났다. The purpose of this study was to be comparative of protein removal effects and cytotoxicity in the L-929 cell Line by Tyloxapol and Tromethamine. To investigate the inhibitory effect of cell growth by two surfactants, L -929 cells were cultured and treated with Tyloxapol and Tromethamine. The cytotoxicity was measured by MTT assay and LDH leakage assay. In MTT assay, the inhibitory effect of cell growth by Tyloxapol was significantly higher than Tromethamine. MTT assay was more sensitive than LDH leakage assay in this study. To investigate the cleaning efficacy of these surfactants, UV spectrometer was used for measuring protein deposit. The deaning efficacy by Tyloxapol was significantly higher than by Tromethamine.

콘택트렌즈 단백질 제거제 ( Protein Remover ) 의 세포독성과 효능에 관한 연구

최선미,서은선,박현주,김재민,이종빈 대한시과학회 2001 대한시과학회지 Vol.3 No.1

본 연구는 시중에 유통되고 있는 콘택트렌즈 단백질 제거제로 4개회사의 제품(국 내 2종, 국외 2종)을 선별한 후, 세포 독성과 단백질 제거 효능의 관계를 조사하였다. 단백질 제거제가 녹아 있는 식염수에 12시간 동안 담근 콘택트렌즈를 L929 세포주 (생쥐섬유모세포주) 위에 직접 올려놓아 용출된 용액으로 인한 세포 생사를 Trypan blue 염색올 통해 판별하는 USP Elution Assay 법을 사용하였다. 그리고 단백질 제거 제를 직접 배양세포에 15분간 처리하여 MTT Assay 인 세포 독성을 검정하였다. 또 한 단백질 제거제 효능을 조사하기 위해 FDA에서 분류한 IV group lens를 조성한 인공누액에서 단백질을 홉착시킨 Bradfod Assay 법을 통해 측정 비교하였다. MTT 결과는 1 종류의 제품에서 40% , 3종류의 제품은 70% 이상의 세포증식 저해율이 나타 났다. USP Elution Assay에서는 동물성 단백질 제거제 Pancreatin 이 주성분인 1 종 류의 제품은 1 등급, 나머지 3종류는 O등급을 나타내였다. 또한 Bradford Assay 방법 을 이용하여 단백질 제거제의 효능을 겁정하였는데, Subtilisin A가 주성분인 A사 8 시간, Subtilisn 이 주성분인 B사 5분, Pancreatin 이 주성분인 C사 6 시간, Papain 이 주 성분언 D사는 8시간이 지난 후에 단백질 제거제 효능이 최대 효과가 나타났다. The present study was carried out of to investigate protein cleaner effect and cytotoxicity in the protein contact lens protein-removers of four companies (korea : 2, foreign : 2). After soaked the lens for 12 h, We laid Contact lens contaning protein remover solution in L929 cell. and investigated of cell viability used σyphan blue stain by detection of USP Elution Assay and L929 cell treated of Prot려n -remover solution in directly for 15 rnin. and detected of cell growth inhibition assesed of MTT assay. Moreover investigated and Compared effects of protein-remover used Bradford assay by detection of falling protein contents to the contact lens soaked in Artificial Tears for 6 h. The first results was that cell growth decreased 40% in product of one company and decreased 70% in products of three companies by MTT assay. the second results was that one company was investigated 1 level and the others (3) was investigated 0 level by USP Elution Assay. Third results was that the time of highest effect deterrnined each 8 h(A Company), 5 min{B Company), 6 h(C Company), 8 h(D Company).

냉동보존 기간 동안 L-929 섬유아세포의 생존에 대한 세포내 트레할로즈의 보호 효과 및 작용 기작

이종호,김현용,신동명,황윤회,진오성,김형국,한동욱 한국생체재료학회 2010 생체재료학회지 Vol.14 No.3

Recently, there has been much interest in using trehalose and other small carbohydrates to preserve mammalian cells in the dried state as an alternative to cryopreservation. In this study, we have aimed at testifying the hypothesis that the deleterious effects of cryopreservation of mammalian cells can be ameliorated by the addition of disaccharides,such as sucrose, maltose and trehalose, to the storage media. For this purpose, the protective effects of disaccharides on unilamella vesicles (ULVs) of dimyristoylphosphatidylcholine (DMPC) and L-929 fibroblasts were investigated by monitoring the change of ULVs diameter and assaying the cell viability, respectively. The mean diameters of ULVs with different disaccharide contents were measured by using photon correlation spectroscopy. For investigating the cryoprotective effects of intracellular disaccharides, L-929 cells were cryopreserved in complete culture media containing various concentrations (0.5, 1.0 and 2.0 mM) of sucrose, maltose or trehalose at −25oC, −75oC and −150oC during 4 d. After quick thawing at 37oC, the cellular viability was determined with water-soluble tetrazolium salt assay. Cryoprotective effects of trehalose were better than those of other disaccharides and DMSO. The mechanism of cryoprotective action of intracellular trehalose could be explained in part by the high flexibility of glycosidic bond in trehalose molecules and their interaction with phospholipid bilayers of cells. It is suggested that trehalose may be effectively applied for various fields as the storage of cell therapeutics and biological agents, the longer-term preservation of transplantable tissues and artificial organs as well as tissue engineering and regenerative medicine

Effect of Paclitaxel on the β-actin, Fibronectin, Laminin and Fine Structure in HeLa and L929 Cells

김주영(Joo-Young Kim),류인(Yin Liu),성훈기(Hoon-Ki Sung),박정현(Jeong-Hyun Park),송인환(In-Hwan Song),성언기(Eon-Gi Sung),이융창(Yungchang Lee) 대한해부학회 2001 Anatomy & Cell Biology Vol.34 No.1

Paclitaxel로 처리한 HeLa 및 L929 암세포주에서 생기는 β-actin, fibronectin 및 laminin의 세포질 내 분포의 변화가 형태학적인 변화와는 어떤 연관이 있는지를 알아보기 위해 본 실험을 시행하였다. 이 약제에 의한 세포증식의 조절에 관하여는 MTT 분석을 하였고, 위에서 언급된 세포질 내 단백질들의 변화는 면역세포화학적 방법과 analySIS AUTO로 분석하였다. 세포의 형태적인 변화들은 도립현미경과 투과전자현미경으로 관찰하였다. MTT 분석 결과로는 paclitaxel 1 μM과 10 μM의 농도에서 HeLa 세포는 세포성장이 대조군에 비해 20~80% 억제되었고 L929 세포는 27~44% 억제되었으며, 그 효과는 약제의 용량과 시간에 따라 증가되었다. β-actin, fibronectin 및 laminin의 분포는 핵 주변부에서 강한 반응을 보였던 것이 약제 처리 후 세포질 전체에 고루 분포하면서 약한 반응을 나타냈다. 형태학적인 변화로는 2가지 종류의 세포 모두에서 이질염색질의 증가, 과립형질내세망의 부착리보소체의 떨어짐 및 골지복합체의 절편화를 쉽게 볼 수 있었다. 따라서, paclitaxel에 의한 이들 세포의 성장억제와 형태학적인 변화들은 위의 세가지 종류의 단백질들의 재배열과 그 합성의 감소와 밀접히 연관될 것으로 생각된다. The aim of this investigation was to elucidate the changes in the cytoplasmic distribution of β-actin, fibronectin, and laminin through mainly the morphological changes occurring in HeLa and L929 cancer cell treated with paclitaxel. Whether or not paclitaxel regulates cell proliferation was assessed with MTT assay. Possible influence on the distribution of β-actin, fibronectin, and laminin in these cells was confirmed with immunocytochemistry and analySIS Auto software program. The changes in cell morphology were observed under inverted and electron microscope. The MTT assay showed that 1 μM and 10 μM concentrations of paclitaxel inhibited HeLa cell growth approximately by 20% to 80% and L929 cell by 27% to 44% in a dose- and time-dependent manner. The distribution of these proteins was changed from the condensed around nucleus and strong reaction to the weak throughout cytoplasm. The morphological changes indicated that paclitaxel changes the location or number of protein synthesis apparatus: damages of RERs, Golgi complex, and increase of heterochromatin. These data suggest that the growth inhibition and morphological changes of tumor cells induced by paclitaxel might be modulated by the rearrangement and decreased production of β-actin, fibronectin, and laminin in cytoplasm.

Cytotoxicity evaluation of different commercially available absorbent feminine hygiene products and a transdermal patch using direct contact and extract exposure methods

Alisha Wehdnesday Bernardo Reyes,Tran Xuan Ngoc Huy,Son Hai Vu,Trang Thi Nguyen,Wongi Min,Hu Jang Lee,Suk Kim 한국예방수의학회 2020 예방수의학회지 Vol.44 No.4

We investigated the cytotoxic potential of three different commercially available absorbent feminine hygiene products and one transdermal patch using direct contact and extract exposure methods. Two different cell lines were used - mouse fibroblast L929 and normal human skin fibroblast CCD-986sk cell lines. The test samples were extracted using three different methods in accordance to International Organization for Standardization (ISO). Viability of cells was analyzed using MTT assay and morphology of the cells were also observed using phase contrast microscopy. Overall, the direct contact method using L929 cells showed that all the test samples had no toxic effect when exposed to extracts for 1 h. For the exposure method, no toxic effect was observed in both L929 and CCD986sk cells incubated with all the test samples regardless of the extraction methods used.

Paclitaxel이 HeLa 및 L929 세포의 β-actin, fibronectin, laminin 및 미세구조에 미치는 영향

김주영,류인,성훈기,박정현,송인환,성언기,이융창 대한해부학회 2001 Anatomy & Cell Biology Vol.34 No.1