한국인 제2형 당뇨병 환자의 골격근에서 인슐린 신호전달체계의 결함

최준혁,이관우,김효정,이동훈,이종우,김정은,엄현채,김경미,최성이,정윤석,김현만 대한내분비학회 2002 Endocrinology and metabolism Vol.17 No.5

연구배경: 제2형 당뇨병에서 나타나는 인슐린 저항성은 간, 지방, 근육 같은 말초조직에서 인슐린의 작용이 떨어지는 것을 말한다. 제2형 당뇨병의 발생기전에 인슐린 저항성과 인슐린 분비능 저하가 같이 관여함은 잘 알려진 사실이다. 인슐린의 세포내에서의 저항성을 규명하기 위한 인슐린의 세포내 신호전달체계에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으며 몇몇 연구에서 인슐린 저항성을 가진 골격근육에서 IRS와 관련된 PI3-kinase의 활성감소와 Akt kinase의 활성감소를 보고하고 있으나 아직까지 명확하게 그 기작이 설명되어지지 않고 있다. 본 연구에서는 정상성인, 제2형 당뇨병 환자를 대상으로 경구당부하검사 및 인슐린 클램프검사를 시행하고 인슐린 클램프 검사시 대상인의 근육을 채취하여 인슐린 신호전달 체계(IR-β, IRS, Akt(PKB, Rac) kinase, GSK-3)를 연구하였다. 방법: 연구대상자는 한국인으로서 경구당부하검사상 정상인 및 당뇨병 환자 각각 11명, 9명을 대상으로 하였으며, 정상인은 건강인으로 과거력상 당대사에 영향을 줄 질환이 없고, 현재 당대사에 영향을 줄 약물 복용 및 다른 소견이 없는 경구당부하검사상 정성 내당능을 보이는 대상자로 하였다. 당뇨병환자는 모두 제2형 당뇨병 환자로 이환기간이 만 5년 이내인 경우로 하고, 인슐린으로 치료하는 대상자는 제외하도록 하였다. 대상자의 연령, 체질량지수, 체지방량, 공복시 총콜레스테롤, 중성지방, 고밀도지단백 콜레스테롤 및 HbA1c, 인슐린, C-peptide를 측정하였고, "HOMA model"을 이용하여 베타세포의 기능와 인슐린저항성 정도를 평가하였다. 정상혈당클램프 검사(euhlycemic hyperinsulinemic clamp test)를 시행하고 인슐린 투입 전과 인슐린 투입 30분후, 두차례에 걸쳐 대퇴부 근육생검을 실시한후 western 법으로 IR-β, IRS, Akt kinase, GSK-3의 인산화량을 측정하였다. 결과: 정상인 11명과 당뇨병 환자 9명을 대상으로 하였으며 대상자의 평균 연령, 평균 체질량지수, 체지방량, 허리/엉덩이 둘레의 비(waist hip ratio; WHR)는 두 군간에 차이가 없었다. 평균 공복혈당은 정상군 98.0±0.3㎎/dL, 당뇨병군 208.1±16.5㎎/dL(p<0.05), HbA1c는 정상군 5.4±0.5%, 당뇨병군 9.2±0.6%(p<0.05)였다. "HOMA model"을 이용한 베타세포의 기능과 인슐린저항성은 정상군 56.4±8.5%, 1.4±0.2, 당뇨병군 72.2±52.3%(p<0.01), 10.2±6.3(p<0.01)였으며 정상혈당클램프 검사상 포도당 이용률은 정상군 8.2±0.6㎎/㎏/min, 당뇨병군 3.7±1.1㎎/㎏/min(p<0.01)로 정상군과 당뇨병군간에 유의한 차이를 나타내었다. Western blot법으로 IR-β, IRS, Akt kinase, GSK-3의 인산화량을 인슐린 투입전과 인슐린 투입 30분후 측정하였을 때 IR-β에서는 정상군이 103.9±2.3에서 241.3±18.6, 당뇨군이 108.9±2.2에서 198.7±6.3으로 증가하였다(p=NS). 이는 인슐린 투입후 당뇨병군이 정상군과 비교하여 인산화량의 증가정도가 통계적인 차이가 없었다. IRS에서는 정상군이 111.6±7.3에서 295.6±17.2, 당뇨군이 114.5±6.1에서 222.0±23.2로 증가하였으며(p<0.05), 인슐린 투입후 당뇨병군이 정상군과 비교하여 인산화량의 증가정도가 약 24% 감소하였다. Akt kinase에서는 103.4±6.0에서 416.8±29.5로 증가하였으며(p<0.01), 인슐린 투입후 당뇨병군이 정상군과 비교하여 인산화량의 증가정도가 약 43% 감소하였다. GSK-3에서는 정상군이 107.7±6.7에서 595.7±28.1, 당뇨군이 104.3±4.8에서 443.3±12.9로 증가하였으며(p<0.01), 인슐린 투입후 당뇨병군이 정상군과 비교하여 인산화량의 증가정도가 약 25% 감소하였다. 결론: 제2형 당뇨병 환자에서 정상인과 비교하여 인슐린 자극후 IR-β는 인산화량의 증가정도가 큰 차이가 없었으나, IRS, Akt kinase, GSK-3에서는 인산화량의 증가 정도가 감소되는 것으로 보아 상위 인슐린 신호전단체계부터 결함이 있는 것으로 생각된다. Background: The glucose uptake rate is the limiting step in glucose utilization and storage. The failure of insulin to stimulate glucose uptake in muscle appears to be a primary defect of insulin resistance. This study was undertaken to examine the effect of physiological hyperinsulinemia on the phosphorylation of the insulin receptor (IR-β), insulin receptor substrate (IRS), Akt kinase and GSK-3 in isolated skeletal muscle, in people with type 2 diabetes(n=9) and control subjects(n=11). Methods: 75g OGTT and euglycemic hyperinsulinemic clamp test were done. And vastus lateralis muscle was obtained before and 30 min into the euglycemic clamp. Western blots were performed for tyrosine phosphroylation of insulin receptor substrate (IRS) and phosphorylation of the insulin receptor(IR-β), Akt and GSK-3. Result: There were no statistical differences in the mean age, BMI and body fat between the control subjects and diabetic patients. The fasting blood sugar and HbA_1c in controls and diabetic patients were 98.0±0.3 and 208.1±16.5ng/dl, and 5.4±0.5 and 9.2±0.6%, and 1.4±0.2 in the control subjects, and 72.2±52.3%(p<0.01) and 10.2±6.3(p<0.01) in the diabetic patients, respectively. The insulin resistance from the euglycemic hyperinsulinemic clamp test were 8.2±0.6㎎/㎏/min and 3.7±1.1ng/㎏/min in the control subjects and in the diabetic patients, respectively(p<0.01). Compared with the normal controls, insulin-stimulated IR phosphorylation was no different to that in the diabetic patients. However, insulin-stimulated IRS phosphorylation, insulin-stimulated Akt phosphorylation and insulin-stimulated GSK-3 phosphorylation were reduced in the diabetic patients compared with the normal controls by 24, 43 and 25%, respectively(p<0.05). Conclusion: In Korean type 2 diabetic patients, the insulin resistance may be due to the impairment of the upstream insulin signal molecular network. Further studies will focus on determining whether these signaling defects are the cause of the development of insulin resistance, or secondary to the altered metabolic state, associated with type 2 diabetes mellitus (J Kor Soc Endocrinol 17:685∼697, 2002).

Propofol이 정맥 마취 유도 및 유지시 심혈관계에 미치는 영향

최세진,박세린,조희경,김만수,임정혁 충남대학교 의과대학 지역사회의학연구소 1993 충남의대잡지 Vol.20 No.2

The cardiovascular response to anesthesia with the aqueous emulsion formulation of propofol was studied in healthy patient (ASA I or II; aged 20-61 years) premedicated with atropine 0.01mg/kg who underwent superficial minor surgery. Anesthesia was induced in all patient with propofol 2mg/kg - 2.5mg/kg immediately maintained by a continuous intravenous infusion of 6mg/kg/hr to supplement 50% nitrous oxide. We compared the cardiovascular changes of preinduction and post-induction. The results were as follows; 1) Heart Rates remained unchanged but increased in response to laryngoscopy and tracheal intubation from pre-laryngoscopy values and there were no significant changes. 2) Systolic and diastolic arterial pressure were decreased significantly at 1 minute after induction (p<0.01), 5 minutes after intubation (p<0.05), 10 minutes after intubation (p<0.001). Although the arterial pressure increased in response to tracheal intubaton and surgical stimuli, there were no significant changes.

동통성 안근마비를 나타낸 양측성 자발성 경동맥해면정맥동루 2례

전성만,박경원,차재관,김상호,김재우,최순섭 대한신경과학회 1997 대한신경과학회지 Vol.15 No.5

TiN/TiSi₂-bilayer 형성과 전기적 특성

서경수,황찬용,이광만,최치규,강민성 濟州大學校 基礎科學硏究所 1997 基礎科學硏究 Vol.10 No.2

TiN/TiSi₂-bilayers were formed by reactive sputter deposition in mixed gas of Ar+N₂ on the TiSi₂/Si(100) substrate, which TiSi₂ film was grown by means of the Ti sputtering, and the coevaporation of Ti and Si(Ti : Si = 1 : 2) on the Si(100)-2 ×1 substrate followed by in-situ annealing in ultrahigh vacuum. Stoichiometric Ti??N?? films with (111) texture determined XRD, RBS and XPS were grown at substrate temperature over 600℃, while films prepared at substrate temperature below 600℃ showed N-rich TiN, and the high quality TiSi₂ film was obtaind from the Ti/Si(100) and (Ti+2Si)/Si(100) samples annealed at 700℃. It is capping effect that the TiSi₂ film in the TiN/TiSi₂/Si(100) structure does not occure the agglomeration phenomena. The sheet resistance of the TiN/TiSi₂-bilayer prepared at 700℃ showed 0.39Ω/㎝².

Distribution and Potential Toxicological Effects of 2,2',4,4'-tetrabromodiphenyl Ether (BDE-47) as a Endocrine Disrupting Chemical in Human and Animals

Jung, Eui-Man,Yang, Hyun,An, Beum-Soo,Lee, Geun-Shik,Hyun, Sang-Hwan,Choi, Kyung-Chul,Jeung, Eui-Bae 韓國受精卵移植學會 2011 한국동물생명공학회지 Vol.26 No.4

Polybrominated diphenyl ethers (PBDEs) are a class of "brominated" (bromine containing) man-made chemicals used as flame retardant additives in plastics, foams, and textiles. PBDEs are found in various environmental contaminants in air, soil, sediment, and water, and 209 individual forms (congeners) of PBDE exist. Among these, 2,2',4,4'-tetrabromodiphenyl ether (BDE-47) is the dominant congener found in the environment. Exposure to BDE-47 is now worldwide, and levels of BDE-47 have been detected in the blood of animals, including humans. BDE-47 can adversely affect the developmental system in both humans and animals. BDEs have structural similarities to polychlorinated biphenyls and thyroid hormones. However, recent studies have shown that BDEs may act as hormonal disrupting chemicals with detrimental effects. Therefore, a reliable assessment of BDE-47 toxicological action is required to understand the detrimental impacts of BDE-47 on human health. In this review, we overview recent studies on the distribution and potential toxicological effects of BDE-47 in humans and animals.

자궁경부 세포진 검사에서 비정형 선세포의 임상병리학적 중요성

서동수,윤만수,최경운 부산대학교 병원 암연구소 2009 부산대병원학술지 Vol.- No.25

CVD에 의한 비정질불화탄소 박막의 유전상수의 열처리 의존성

오 데레사,이광만,김경식,최치규 제주대학교 공과대학 첨단기술연구소 2003 尖端技術硏究所論文集 Vol.14 No.2

Fluorinated amorphous carbon films were deposited by using an inductively coupled plasma chemical vapor deposition with mixture of carbon tetrafluoride(CF₄) and methane(CH₄) gases. The chemical bonding structure was also characterized by using X-ray photelectron spectroscopy. a-C films such as a -C:H films or a-C:F films is termed 'amorphous carbon or diamond like carbon, because of their bond structure similar amorphous silicon. 'The structure is confirmed from sp^(3) carbon spectra of polycrystalline diamond by using X-ray photelectron spectroscopy. Fluorinated amorphous carbon films consist of the bonding structure with the sp^(3) carbon. The bonding structure consisted of sp^(3) carbon means partial cross link or cross link which improve the adhesion and hardness. The balanced cross link structureof a-C:F films decrease the dielectric constant and also improve the mechanical properties because of good adhesion and hardness like diamond.

결핵의 진단법으로서 중합효소 연쇄반응 검사의 가치

서상철,은상진,김한길,송경은,서장수,최성만,이원길,김재식,김중명 慶北大學校 醫科大學 1994 慶北醫大誌 Vol.35 No.1

목적 : 결핵균 동정을 위한 중합효소 연쇄반응을 임상병리검사로서 적용하기 위한 기초 실험으로 분석학적 예민도와 특이도를 알아보고 검토된 조건에 의한 중합효소 연쇄반응을 실제 임상 가검물에 적용하기 위함이다. 재료 및 방법 : Ziehl-Neelsen염색 양성인 객담, 뢰벤스타인-젠센(Loewenstein-Jensen) 배지에서 분리된 결핵균 및 M. tuberculosis H37Rv를 비롯한 항산균 표준균주 11주와 비항산균 10주를 사용하여 2가지 DNA의 분리법, 3set 프라이머, 3종류 중합효소, 2가지 미량 원심시험관 및 Easy-Cycler^R(Ericomp사, 미국)와 수조형으로 검사를 시행하여 DNA 증폭 산물을 비교하였다. 또한 이미 지일-닐슨 염색법에 의한 선별검사에서 음성을 나타낸 객담 53예, 소변 101예, 삼출액 128예, 뇌척수액 54예 등 총 370예의 임상가검물을 대상으로 하여 위에서 검토된 중합효소 연쇄반응 조건으로 검사한 성적과 지일-닐슨 염색법, 배양법 성적과 비교하였다. 결과 : DNA분리방법 2가지와 3가지 중합효소는 분석학적 예민도와 5fg로 나타나 차이를 발견할 수 없었으며, 프라이머 P1, P2쌍은 예민도가 5fg, 프라이머 INS1, INS2쌍과 프라이머 Pt3, Pt6쌍의 예민도는 0.5fg이었다. Easy-Cycler^R가 수조형에 비해 높고, 미량 원심시험관은 Robbins사 제품이 Sarstedt사 제품에 비해 높은 분석학적 예민도를 나타냈다. 프라이머 P1, P2쌍과 프라이머 INS1, INS2와 Pt3, Pt6 2쌍의 프라이머의 특이도에 있어서는 항산균 표준균주 중 M. tuberculosis H37Rv, M. tuberculosis ATCC 27294, M. bovis ATCC 29312의 3주에서 특이 증폭 띠를 관찰할 수 있었다. 그러나 비결핵성 항산균 8주에는 특이 증폭 띠를 나타내지 않았다. 또 비항산균 10주에도 특이 증폭 띠가 관찰되지 않았다. 따라서 Robbins사의 미량 원심시험관과 proteinase-K법에 의한 DNA분리방법에 Easy-Cycler^R를 사용하여 프라이머 INS1, INS2쌍으로 일차 중합효소 연쇄반응을 시행한 후 프라이머 Pt3, Pt6쌍으로 이차중합효소 연쇄반응을 시행하는 방법을 370예의 임상가검물에 시행하였고 지일-닐슨 염색법과 결핵균배양검사도 동시에 시행한 결과 중합효소 연쇄반응 양성은 106예(28.6%), 배양 양성은 27예(7.3%) 및 염색 양성은 18예(4.9%)였으며, 결핵환자는 141명(38.1%)였다. 370예의 임상 가검물로 시행한 중합효소 연쇄반응의 진단학적 예민도와 특이도, 양성결과 예측치 및 음성결과 예측치는 68.8%, 96.1%, 91.5% 및 83.3%로 각각 나타났다. 결론 : 결핵균 동정을 위한 중합효소 연쇄반응은 배양검사에 비해 신속하며, 분석학적인 예민도와 특이도가 뛰어나므로 결핵 진단을 위한 임상병리검사로서 유용하다고 사료됨. In this study, We investigated the optimal conditions of polymerase chain reaction(PCR) assay for the rapid identification of Mycobacterium tuberculosis in clinical specimens as routine laboratory test. So we have compared two DNA isolation methods, 3 polymerases, 2 set of primer, 2 kinds of thermocycler and 2 microtubes. We evaluated two DNA isolation methods, bead-beating method and proteinase-K method, the latter was more sensitive than the former. In comparision of two sets of primers, P1 and P2 primers detecting 123-base pair fragment of IS6110 made from Biosnthesis(U. S. A.) and INS1 and INS2 primers detecting 245-base pair fragment of IS986 showed equally sensitive results ie. 5fg. Specificity of primers were tested and INS1 and INS2 primers gave 245-base pair product from M. tuberculosis H37Rv, M. tuberculosis ATCC 27294 and Mycobacterium bovis ATCC 29312 but not from 8 nontuberculous mycobacterial strains such as M. kansasii ATCC 12478, M. terrae ATCC 15755, M. intracellurae ATCC 13950, M. avium ATCC 25281, M. gordonae ATCC 14470, M. fortuitum ATCC 6841, M. smegmatis ATCC 19420, M. scrofulaceum ATCC 19981. Coagulase-positive staphylococcus, coagulase-negative staphylococcus, streptococcus, Esccherichia coli, Serra-tia marcescens, Klebsiella pneumoniae, Enlerobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Acinetobacter calcoaceticus, Pseudomonas aerugonosa showed no 245-base pair amplification product. PCR by the P1 and P2 primers showed 123-base pair amplification product from M. tuberculosis H37Rv, M. tuberculosis ATCC 27294 and Mycobacterium bovis ATCC 29312 but not from 8 nontuberculous mycobacterial strains such as M. kansasii ATCC 12478, M. terrae ATCC 15755, M. intracellularae ATCC 13950, M. avium ATCC 25281, M. gordonae ATCC 14470, M. fortuitum ATCC 6841, M. smegmatis ATCC 19420, M. scrofulaceum ATCC 19981. Coagulase-postive staphylococcus, coagulase-negative staphylococcus, streptococcus, Escherichia coli, Serratia marcescens, Klebsiella pneumoniae, Enlerobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Acinelobacler calcoaceticus, Pseudomonas aeruginosa showed no 123-base pair amplification product. In comparision of polymerase, Taq DNA polymerase^R(Promega Co., U. S. A.) was more cost effective than Ampli Tag^R(Perkin-Elmer Cetus, U. S. A.), but these two were equally sensitive and specific in the detection of M. tuberculosis-specific DNA. Tac polymerase (Korea'Biotech, Korea) showed many nonspecific bands. In comparision of thermocycler, Easy-Cycler^R(Ericomp, U. S. A.) was more sensitive than water-bath type and in that of microtubes Robbin's were more sensitive than Sarstedt's PCR results were compared with results of culture for M. tuberculosis and Ziehl-Neelsen stain in 370 clinical specimens that were negative by initial Ziehl-Neelsen stain. There were 27 specimens(7.3%) that were positive for M. tuberculosis by culture, 18(4.9%) specimens that were positive by Ziehl-Neelsen stain, and 106 specimens(28.6%) that were positive for PCR and 141 cases that were positive for tuberculosis. Overall sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value were 68.8, 96.1, 91.5 and 83.3% respectively, for PCR; 19.1, 100, 100, and 66.8%, respectively for culture; and 12.8, 100, 100, and 59.0% respectively for Ziehl-Neelsen stain.

금은화 약침액의 암세포 성장 저해 효과

손윤희,임종국,최혜경,남경수,배만종 경산대학교 생명자원개발연구소 1999 생명자원과 산업 Vol.3 No.-

한방에서 염증, 종양 억제 등에 사용되는 금은화로 약침액을 조제하여 쥐와 사람의 암세포 성장억제효과를 살펴 보았을 때 금은화 약침액 10×, 5×농도는 mouse EATC에 대해 90% 및 86% 세포 성장 억제율이 있었으며, 열수추출액 10×, 5× 농도는 89% 및 87% 세포 성장억제효과가 있었다. 같은 농도의 약침액을 Hepalclc7에 처리했을 때는 89.5%, 69.7%의 억제효과가 있었고 열수추출액은 85.7%, 67.3%의 hepalclc7 세포 성장억제율을 보였다. 사람의 암세포주 A549, HeLa 세포에 대한 금은화 약침액 및 열수추출액의 세포독성 실험에서도 A549 세포에 약침액 10×, 5×를 처리했을 때 82.0%, 46.1% 세포 성장억제효과가 나타났으며 금은화 역수추출액은 75%, 50%의 세포 성장 억제율이 나타났다. HeLa 세포에서는 약침액이 열수추출액보다 세포 성장 억제효과가 더 높았다. 금은화 약침액을 처리한 세포(EATC,Hepalclc7과 human A549, HeLa)의 현미경 관찰에서는 세포수의 감소와 형태의 변화를 관찰할 수 있었다. Lonicerae flos Aqua-acupuncture Solution(LFAS) and Lonicerae flos Water-extracted Solution(LFWS) were prepared and tested for their potential antitumor activities. It was shown to possess considerable toxicity toward various tumor cell lines. Concentration of LFAS at 10× and 5× resulted in more than 50% inhibition of growth in Ehrich ascites tumor cells(EATC), Hepalclc7, and HeLa cells after 72 hours. Toxicity of LFWS to A549 revealed that more than 50% inhibition of growth at LFAS conentration of 10× after 72 hours. Concentration of LFWS at 10× and 5× showed more than 50% inhibition of growth with EATC, Hepalclc7, HeLa and A549. In morphological study, the number of cells were decreased, and the shape of cells was round form in EATC, Hepalclc7, HeLa, and A549.

경막외마취 환자에서 10% Pentastarch 용액의 혈장확장효과

이정은,박병룡,김은경,김만수,최세진 충남대학교 의과대학 지역사회의학연구소 1993 충남의대잡지 Vol.20 No.1

In order to compare the effect of 10 % pentastarch solution with Ringer's lactate solution on plasma volume expansion in thirty epidural anesthetic patients, systolic arterial blood pressure (SABP), diastolic arterial blood pressure(DABP), heart rate(HR), central venous pressure(CVP), cardiac output(CO) and changes of hemoglobin(Hb) were measured. The patients were devided into three groups Group Ⅰ (n=10) ; Epidural anesthesia was performed without fluid infusion previously(control) Group Ⅱ (n=10) ; 500 ml of Ringer's lactate solution was rapid infused intravenously before epidural anesthesia Group Ⅲ (n=10) ; 500 ml of 10% pentastarch solution was rapid infused intravenously before epidural anesthesia All data were collected before fluid infusion, at 15 min, at 30 min, at 45 min, at 60 min, at 120 min and at 180 min after epidural local anesthetic injection. The results are as follows. 1. SABP, DABP, HR, CVP and CO were decreased significantly (p<0.05) at 30, 45 minute after local epidural anesthetic injection in Group Ⅰ and Group Ⅱ. There was no any significant differences between two groups. 2. SABP, DABP, HR and CO were not changed significantly, Besides CVP was increased significantly (p<0.05) after 10% pentastarch solution infusion in group Ⅲ. 3. Changes of Hb were increased in group Ⅲ.