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진동일 한국수정란이식학회 2000 한국수정란이식학회 학술대회 Vol.2000 No.1
Transgenic rabbits were produced by DNA microinjection using growth hormone receptor (GHR) and IGF-1 receptor (IGF-1R) genes. Overall efficiencies for production of transgenic rabbits were 3.2% and 3.1% in GHR and IGF-1R genes, respectively. Founder rabbits transmitted transgenes to their progenies through medelian fashion. Growth rate in GHR and ICF-1R transgenic rabbits was faster than non-transgenic rabbits. Transgenic rabbits grew larger (25% and 15% increase in body weight of GHR and IGF-1R transgenic rabbits, respectively) than non-transgenic rabbits and organ weight of transgenic rabbits increased, suggesting that GHR and IGF-1 genes affects growth rates in transgenic rabbits.
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진동일 선문대학교 ·중소기업기술지원연구소 1999 선문공대 연구/기술 논문집 Vol.4 No.1
토끼 배아세포(Embryonic Stem Cell)를 분리하기 위해 토끼 1-cell embryo를 채란하여 in vitro에서 blastocyst까지 배양한 후 mouse embryonic fibroblasts(MEF), rabbit embryonic fibroblasts(REF) 및 STO cell expressing Leukemia Inhibition Factor gene(SNL) feeder cell과 공배양하였다. 외관상 충실한 토끼 배아세포 8 개를 확보하였고 분리된 토끼 ES ceIl의 모양은 주위에 분화된 세포가 없는 전형적인 colony모양으로 성장하고 액체질소에 동결보존 및 3-5차례의 계대배양 후에도 이러한 모양은 계속 유지되었다 충분히 자란 dish를 1 : 2로 계대배양을 한 후 다시 confluent하게 자라는 데에 걸리는 시간(doubling time)은 빠른 경우 84시간으로 나타났다. 분리된 토끼 ES cell은 gelatin이 coating되지 않은 culture dish에 이식 배양하였을 때 부유상태로 증식하면서 내부에 강(腔)이 생기고 외배엽과 내배엽이 형성하는 전형적인 Embryoid body 모양을 나타내어 분리된 ES cell이 미분화상태의 stem cell임이 확인되었다. To establish rabbit Embryonic Stem (ES) cells, rabbit one-cell embryos were collected and cultured in vitro to blastocysts. Blastocysts were co-cultured with mouse embryonic fibroblasts (MEF), rabbit embryonic fibroblasts (REF) or STO cells expressing LIF (SNL). Although rabbit ES cells were isolated with low efficiencies, total 8 ES cell lines were kept in vitro with normal colony shape. Their doubling time was about 84 hours and their shapes were maintained with passing and freezing. These rabbit ES cells were differentiated into embryoid body following the culture in the uncoated dishes which indicated that they were undifferentiated stem cells.
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토끼에서 반복적인 과배란유도가 배란율과 난자의 체외 발육율에 미치는 영향
진동일,임경순,이홍미 韓國受精卵移植學會 1997 한국동물생명공학회지 Vol.12 No.3
토끼에서는 수정란 이식과 같은 기본적인 번식공학적 방법의 효율성이 아직 생쥐와 같은 실험동물에 비해 떨어지고 있어 생물공학적인 기술을 응용하는데 큰 어려움이 있다. 특히 유전자 이식에 의한 형질전환 토끼의 생산과 같은 생물공학적인 기술을 실용화하는데 효율이 높은 수정란이식 기술의 개발이 필수적이라고 할 수 있다. 본 연구에서는 토끼에서 수정란 이식 기술의 첫 단계인 과배란 유도를 효율적으로 이용할 수 있는 방법을 정립하기 위해 반복적인 과배란 유도가 배
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진동일,양무희 韓國受精卵移植學會 1997 한국동물생명공학회지 Vol.12 No.2
본 연구는 rat에서 PMSG도는 FSH 처리에 의한 과배란 유도가 배란율과 수정란의 질에 미치는 영향을 알아보기 위해 호르몬 처리하고 교미시킨 후 4일령에 난관과 자궁을 세척하여 정상 8-세포기 난자와 비정상 난자를 조사하였고 각 처리에서 채란된 난자 중에 정상난자를 골라 체외 배양하여 발육율을 비교 평가하였다. 미성숙 rat에서는 평균19.1개의 수정란이 채취되었으며 성숙rat에서는 14.2개가 채취되었고 미성숙 rat에서는 성숙 rat에 비해 더
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성장관련 수용체 유전자를 이용한 형질전환토끼의 생산과 분석
진동일 충남대학교 형질전환복제돼지연구센터 2004 논문집 Vol. No.8
Transgenic rabbits were produced by DNA microinjection using growth hormone receptor (GHR) and IGF-I receptor (IGF-IR) genes. Overall efficiencies for production of transgenic rabbits were 3.2% and 3.1% in GHR and IGF-IR genes, respectively. Founder rabbits transmitted transgenes to their progenies through medelian fashion. The mRNA expression of transgenes using Northern blotting with probes of IGF-IR and GHR genes was checked in liver of transgenic rabbits. Transgenic rabbits with IGF-IR and GHR genes more expressed mRNA than control non-transgneic rabbits. Growth rate in GHR and IGF-IR transgenic rabbits was faster than non-transgenic rabbits. Transgenic rabbits grew larger (25% and 15% increase in body weight of GHR and IGF-IR transgenic rabbits, respectively) than non-transgenic rabbits and organ weight of transgenic rabbits increased. Double transgenic rabbits were produced through the mating between IGF-IR and GHR single transgenic rabbits. Transmission pattern of double transgenic mice were almost the same as that of single transgenic rabbits. Growth of double transgenic rabbits (IGF-IR/GHR) were fastest compared with transgenic rabbits containing IGF-IR and/or GHR genes. The experiments demonstrated that these growth-related genes could constitutively promote growth of female and male rabbits and transgenic rabbits with these genes could be used as model animals for growth-related studies of other livestock animals.
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진동일 선문대학교 자연과학대학 1998 자연과학대학 논문집 Vol.1 No.-
본 연구는 2-, 4- 또는 8-세포기 생쥐 수정란으로부터 분리된 단일 할구의 발달 및 동결 후 생존능력을 조사하기 위하여 실시하였다. 2-, 4- 또는 8-세포기 생쥐 수정란에서 각각 223개, 60개, 188개의 할구를 분리하여 96시간 배양하였는데 이 중 2-세포기 수정란으로부터 분리된 할구는 111개(49.8%)가 배반포기까지 발육하였으며, 4-세포기와 8-세포기 수정란으로부터 분리된 할구는 각각 12개(20.0%)와 31개(16.5%)가 배반포기까지 발육하였다. 분리된 할구를 완만 동결한 후 융해하여 배양하여 배반포기까지의 발육율은 2-세포기 할구는 27.1%(16/50), 4-세포기 할구는 34.4% (4/11) 그리고 8-세포기 할구는 17.6%(3/17)였으며, 융해 후 할구 회수율은 각각 54.2%(65/120), 46.4% (13/28), 24.3%(17/70)을 나타내었다. 2-세포기 할구를 동결 융해한 후 동기화 시킨 생쥐 자궁에 이식하여 1마리가 정상적으로 발달하였고 융해하지 않은 할구로부터는 2마리의 태아가 발달하였다. The development of single blastomeres isolated from 2-, 4- and 8-cell mouse embryos and the ability of such blastomeres to survive deep freezing were studied. Of 223, 60 and 188 single blastomeres isolated from 2-, 4- and 8-cell mouse embryos, respectively, 111 blastomeres (49.8%) from 2-cell embryos, 12 blastomeres (20.0%)) from 4-cell embryos and blastomeres (16.5) from 8-cell embryos developed into blastocysts after culture for 96 hrs. The survival of frozen-thawed blastomeres from 2-. 4- and 8-cell embryos was 27.1% (16/50), 34.4% (4/11) and 17.6% (3/17), and the recovery rate was 54.2% (65/120), 46.4% (13/28) and 24.3% (17/70), respectively. One apparently normal fetus was obtained from the transferred frozen-thawed blastomere from 2-cell embryos and two fetuses from the transferred unfrozen blastomeres.
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진동일 한국수정란이식학회 1997 한국수정란이식학회 학술대회 Vol.1997 No.2
외래 유전자를 이식하여 형질전환동물을 생산하는 방법은 현재 약 3가지 정도가 실제 이용되고 있다. 현재 가장 많이 사용되고 있는 방법으로는 DNA 미세주입법인데 생쥐와 비교하여 다른 동물에서의 형질전환효율은 상당히 낮은 것으로 나타나 형질전환가축의 생산을 위해서는 많은 비용과 시설 및 노동이 필요하여 실용성에 문제를 갖고 있다. 각 가축에 적합한 DNA 미세주입 조건을 확립시키고 형질전환동물의 생산효율을 높이는 연구가 필요하다. 가축에서 형질전환기술이 실제로 응용되고 있는 분야로는 대량생산이 어려운 의약품을 형질전환가축의 젖으로 합성 분비시키게 함으로써 생리적으로 활성이 있는 의약품의 대량생산이 가능할 것으로 예상된다. Growth Hormone이나 Growth Factor들을 이용한 성장과 관련된 형질전환가축의 기술은 예상했던 것보다 큰 성과는 없었는데 이식 유전자의 과잉발현으로 인한 부작용으로 실용화될 수 없었다. 그러므로 형질전환동물의 실용화를 위해서는 효율적인 유전자 이식방법의 개발과 이식 유전자의 발현으로 인한 부작용을 최소화하면서 좋은 표현형을 얻을 수 있도록 이식유전자의 발현을 인위적으로 조절할 수 있는 regulatory system의 개발과 가축의 경제형질에 관여하는 유전자의 식별이 필요하다.
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