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호알칼리성 Bacillus sp. DK1122 균주가 생산하는 알칼리성 단백질 분해효소의 정제 및 특성
이형재 ( Hyungjae Lee ),유지승 ( Ji Seung Yoo ),배동훈 ( Dong Hoon Bai ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2016 한국미생물·생명공학회지 Vol.44 No.3
호알칼리성 protease를 분비하는 토양에서 분리된 Bacillus sp. DK1122 균주로부터 효소의 생산조건을 검토 후, 효소를 정제하고 특성을 알아보았다. 본 균주의 효소생산 최적 배지 조성은 0.5% (w/v) glucose, 0.8% (w/v) yeast extract, 0.5% (w/v) polypeptone, 0.1% (w/v) K2HPO4, 0.02% (w/v) MgSO4· 7H2O, 1% (w/v) Na2CO3, 3% (w/v) NaCl, pH 9.0이었으며, 종배양액 0.5% 접종시 40℃에서 24시간 배양했을 때 효소 생산량이 가장 높았다. Bacillus sp. DK1122가 생산하는 alkaline protease를 70% 포화 ammonium sulfate로 침전시키고, CM-Sepharose column chromatography에 의해 23.9%의 수율에 2.8배의 정제도를 지니는 효소를 얻을 수 있었다. SDS-PAGE를 통해 정제된 protease는 27 kDa의 크기의 단일 subunit으로 확인되었고, 정제된 효소의 최적 pH는 9.0, 최적온도는 60℃였으며, 50℃에서 1시간까지 열에 안정하였고, 60℃에서 10 mM CaCl2 첨가 후 3시간까지 90%의 활성을 유지하여 Ca2+에 의해 열안정성이 증가하였다. 본 연구를 통해 정제된 호알칼리성 protease는 식품, 세제 및 관련산업에서의 응용성이 매우 높을 것으로 기대된다. An alkaline protease was purified and characterized from an alkalophilic microorganism, Bacillus sp. DK1122, isolated from soil in central Korea. The optimum temperature and pH for the growth of the producer strain were 40℃ and pH 9.0, respectively. The protease was produced aerobically at 40℃ after 24 h incubation in modified Horikoshi I medium (pH 9.0) containing 0.5% (w/v) glucose, 0.8% (w/v) yeast extract, 0.5% (w/v) polypeptone, 0.1% (w/v) K2HPO4, 0.02% (w/v) MgSO4·7H2O, 1% (w/v) Na2CO3, and 3% (w/v) NaCl. The alkaline protease was purified by 70% ammonium sulfate precipitation of the culture supernatant of Bacillus sp. DK1122, followed by CM-Sepharose chromatography. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 27 kDa on the basis of SDS-PAGE. The optimum temperature and pH for the protease activity were 60℃ and pH 9.0, respectively. Addition of CaCl2 increased the thermal stability of the purified protease, where 90% of protease activity was retained at 60℃ for up to 3 h. Consequently, it is expected that the alkaline protease from this study, exhibiting stability at pH 7-9 and 60℃, may be promising for application in the food and detergent industries.
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알칼리성 단백질 분해효소를 생산하는 토양 분리 호알칼리성 균주의 동정
이형재 ( Hyungjae Lee ),유지승 ( Ji Seung Yoo ),박영서 ( Young Seo Park ),배동훈 ( Dong Hoon Bai ) 한국산업식품공학회 2015 산업 식품공학 Vol.19 No.4
An alkalophilic microorganism, strain DK1122 producing an alkaline protease was identified. DK1122 was isolated from soil collected in central Korea. The strain DK1122 was Gram-positive, 0.7×2-4 μm in size, and its colony was yellowish white, The strain DK1122 was found to be spore-forming, catalase positive, oxidase positive, caseinolytic, and reduce nitrate to nitrite. The protease was produced aerobically on Horikoshi I agar medium (pH 9.0) with 1% (w/v) skim milk at 40°C for 24 h. Through 16S rRNA gene partial sequencing, the strain DK1122 had the 99.7% sequence similarity to 16S rRNA gene sequence of Bacillus pseudofirmus. Based on the biochemical and physiological properties as well as phylogenetic analysis, the isolated strain was named as Bacillus sp. DK1122. It is expected that Bacillus sp. DK1122 may be a promising candidate for a proudcer of an alkaline protease applicable to the food and detergent industries.
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박수빈 ( Soo Been Park ),유지승 ( Ji Seung Yoo ),이기용 ( Ki Yong Lee ) 한국정보처리학회 2018 한국정보처리학회 학술대회논문집 Vol.25 No.1
본 논문에서는 푸드트럭의 정보를 제공함으로써 고객들에게 푸드트럭 이용 편의성을 제공하고, 푸드트럭 운영자들에게 사용자 유치 및 수익성을 제공하는 앱을 개발한다. 본 논문에서 개발한 앱은 푸드트럭 운영자가 자신의 트럭 영업정보(메뉴, 위치, 영업시간 등)를 올려 사용자들에게 트럭 정보를 제공하고, 홍보하며, 사용자들의 피드백을 받을 수 있는 기능을 제공한다. 특히 트럭 운영 중 특정상황이 발생했을 때 자신의 트럭을 찜한 사용자들에게 알람을 보낼 수 있는 기능을 제공한다. 일반 사용자는 푸드트럭을 여러 검색 조건으로 찾아볼 수 있으며, 트럭마다 게시판을 제공함으로써 사용자와 운영자 간의 상호 커뮤니케이션이 가능하다.
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