LLDPE(선형저밀도 폴리에틸렌)의 가지구조에 따른 LLDPE/지방족 폴리에스테르 블렌드의 상용성 및 분해성 연구

구본철,윤건상,박헌진,김효열,강혜정 한국고분자학회 1997 한국고분자학회 학술대회 연구논문 초록집 Vol.1997 No.4

In Vitro hEPO-CTP Fusion 단백질 발현의 분자생물학적 분석

구본철,김도향,김민지,노지열,권모선,김태완 한국동물번식학회 2010 Reproductive & Developmental Biology(Supplement) Vol.34 No.2s

인간과 디지털 생명체의 상호작용 구상 (p.2253-2288)

구본철 한국HCI학회 2006 한국HCI학회 학술대회 Vol.2006 No.2

hEPO 유전자의 발현이 조절되는 형질전환 닭의 생산

구본철,김태완 사단법인 한국동물생명공학회 2010 Reproductive & developmental biology Vol.34 No.3

We report here the production of transgenic chickens that can regulate human erythropoietin (hEPO) gene expression. The glycoprotein hormone hEPO is an essential for viability and growth of the erythrocytic progenitors. Retrovirus vector system used in this study has two features including tetracycline-controllable promoter and woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulator element (WPRE). The former is for to reduce the possibility of physiological disturbance due to constitutional and unregulated expression of hEPO gene in the transgenic chicken. The latter is for maximum expression of the foreign gene when we turn-on the gene expression. A replication-defective Moloney murine leukemia virus (MoMLV)-based vectors packaged with vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G) was injected beneath the blastoderm of non-incubated chicken embryos (stage X). Out of 325 injected eggs, 28 chicks hatched after 21 days of incubation and 16 hatched chicks were found to express the hEPO gene delivered by the vector. The biological activity of the recombinant hEPO in transgenic chicken serum was comparable to its commercially available counterpart. The recombinant hEPO in transgenic chicken serum had N- and O-linked carbohydrate simillar to that produced from in vitro cultured cells transformed with hEPO gene.

ERRATUM: "NEAR-INFRARED SPECTROSCOPY OF YOUNG GALACTIC SUPERNOVA REMNANTS" (PKAS, 30(2), 145 ~ 148[2015])

구본철,이용현,KOO, BON-CHUL,LEE, YONG-HYUN 한국천문학회 2020 天文學論叢 Vol.35 No.1

Production of Transgenic Chickens Constitutively Expressing Human Eythropoietin (hEPO): Problems with Uncontrollable Overexpression of hEPO Gene

구본철,권모선,김도향,김상아,김남형,김태완 한국생물공학회 2017 Biotechnology and Bioprocess Engineering Vol.22 No.1

The chicken is a promising candidate as a bioreactor for the economical mass production of human therapeutic proteins. Here, we report the successful generation of transgenic chickens that produce high concentrations of human erythropoietin (hEPO) in the blood. Using a Moloney murine leukemia virus (MoMLV)- based pseudotyped retrovirus vector packaged with vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G), the hEPO gene under the control of cytomegalovirus (CMV) promoter was introduced to the blastoderm of freshly laid chicken eggs (stage X). Out of 200 injected eggs, 12 chicks were hatched after 21 days of incubation, and all of the G0 hatched chicks expressed the vector-encoded hEPO gene. One of the G0 roosters successfully transmitted the hEPO gene to its G1 progeny by crossing with non-transgenic hens. The concentration of hEPO protein in the chicken blood serum was as high as 90 μg/mL. Although humans and chickens belong to different classes of the phylogenetic tree, human EPO caused devastating problems in transgenic chickens, including sudden death, polycythemia, vasodilation, and so on, which may be due to the uncontrolled constitutive expression of exogenous protein in the chicken body. Despite many disorders, however, we were able to generate chicks of G2 generation sired by a rooster of G1 generation confirming successful establishment of a new line of transgenic chicken characterized by high expression of the hEPO gene. With these chickens, we believe that studies on the evaluating the possibilities of the transgenic animal-mediated bio-pharming and on the hEPO-induced physiological side effects will be greatly facilitated.

MoMLV-based Retrovirus Vector System을 이용한 hEPO 형질전환 닭의 생산

구본철,권모선,이지원,노지열,김태완 한국동물번식학회 2008 Reproductive & Developmental Biology(Supplement) Vol.32 No.2s

In Vitro에서의 경구 투여용 인간 성장 호르몬의 생산

구본철,권모선,노지열,김민지,김태완 한국동물번식학회 2012 Reproductive & developmental biology Vol.36 No.2

191개의 아미노산으로 구성된 인간 성장 호르몬(human Growth hormone, hGH)은 성장 촉진뿐만 아니라 근육량 증가, 뼈 강화, 체내 지방 분해 등의 약리적 작용을 가지며, 이와 연관된 여러 질환에 대한 치료 및 기타 치료보조제(미용 및 노화억제 분야 등)로 사용되고 있다. hGH를 비롯한 대부분의 단백질 치료제는 98% 이상이 주사제로 투여되고 있는데 이 러한 투여 방식은 환자의 통증 및 감염 가능성 뿐만 아니라 투여 횟수가 많은 경우에는 시 간적, 비용적, 편리성의 측면에서 환자에게 부담이 가중된다. 본 연구에서는 이러한 문제점 을 해결하기 위하여 감염의 우려도 없으며 주사공포증 없이 복용할 수 있는 hGH와 hTf 단 백질을 융합시킨 형태의 경구 투여용 hGH를 생산하고자 하였다. hGH와 hTf 융합 단백질의 유전자 서열은 HepG2 세포에서 분리한 RNA로부터 RT-PCR 을 수행하여 cloning한 hTf 유전자의 서열과 cDNA로 합성한 hGH 유전자 서열을 cyclo peptide linker나 helical peptide linker로 연결하여 retrovirus vector에 도입하였다. 구축한 각 virus vector는 virus 생산 세포주인 GP2 293과 VSV-G 피막단백질 유전자를 이용하여 retrovirus로 생산한 후, 닭의 배아섬유아세포인 CEF와 CHO 세포에 감염시켰다. 각 세포에서 hGH-hTf 유전자의 발현은 RT-PCR, Western blot, ELISA 실험을 통하여 확인하였다. RT-PCR 실험 결과에서는 virus에 감염된 세포주와 감염되지 않은 세포주에서 GAPDH 유전자에 대한 증폭 단편이 확인된 데 반해, hGH 유전자와 WPRE 서열에 대한 증폭은 virus 에 감염된 세포주에서만 이루어 졌다. Virus에 감염된 세포에서 hGH 단백질과 hTf 단백 질의 발현 양상을 확인하기 위하여 각각의 세포 배양액과 세포에서 분리한 단백질을 이용 하여 Western blot을 실시하였다. 세포 배양액과 세포에서 분리한 단백질에서의 hGH와 hTf 발현을 비교한 결과, 두 단백질 모두 세포 배양액에서의 발현이 강한 것으로 확인되었다. hGH 단백질은 약 20 kD의 크기를 나타내었으며 hTf 단백질은 80 kD의 크기를 가지는 것 으로 확인되었다. 각 virus에 감염된 세포에서는 hGH 단백질이 hTf 단백질과 융합된 형태 로 발현되어 약 100 kD의 크기를 가지는 것으로 확인되었다. ELISA 분석 실험에서도 virus 에 감염된 각 세포에서의 hGH 단백질의 발현 및 분비를 확인하였다. 본 연구에서 확보한 경구 투여용 인간 성장 호르몬인 hGH-hTf는 차후 형질전환 동물의 개발이나 물질 생산 세포주의 확립을 통해서 대량생산함으로써 주사용으로만 개발되어 있 는 바이오의약품의 경구용화 관련 연구에 필요한 핵심 기술을 제공할 수 있을 것이다.

간접흡연으로 인힌 흰쥐 호흡기점막의 변화에 대한 전자현미경적 연구

구본철,전진석 대한의생명과학회 2000 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.6 No.2

본 연구는 전자현미경적인 방법을 이용하여 흰쥐 기관지와 폐조직에 미치는 간접흡연의 영향을 조사하였다. 실험동물은 1일 3회씩 매회 15분간, 4주 동안 비주류 담배연기를 흡입하도록 하였다. 간접흡연 그룹의 폐조직에서는 세포질내에 다수의 용해소체을 함유하고 있는 중성구, 그리고 다양한 크기의 용해소체와 잔사체를 함유하는 대식세포가 관찰되었다. 또한 폐포격벽은 팽대되었으며 섬유화현상이 나타났다. 기관지상피는 섬모상피세포가 점차 소실되었고, 분비세포 또는 배상세포들은 그 수가 증가하였으며, 섬모가 소실되고 표면적이 확장된 배상세포도 관찰되었다. 본 연구결과 이러한 미세구조의 변화는 간접흡연에 의한 세포상해의 전형적인 결과로 파악된다. The bronchus and alveoli from young rats have been examined by electron microscope following the exposure of cigarette smoking. Experimental animals were exposed to the sidestream smoke in an experimentally designed cage for 45 minutes per day during four weeks. In the smoking group, transmission electron micrographs of lung tissues showed a large number of neutrophils with electron densed several lysosomes, numerous macrophages with many small lysosomes, and many residual bodies in alveolar space. Scanning electron micrographs revealed that the ciliated epithelial cells in bronchus of smoking group were replaced by goblet cells including loss of cilia, and increased cell size of many goblet cells in bronchus. These results depicted that the ultrastructural changes are due to the passive smoking, involving airway cell injury.

염산 메트폴민을 함유하는 경구방출제어형 제제의 제조 및 용출특성

구본철,김정수,이계원,지웅길 忠南大學校 生命科學硏究院 醫藥品開發硏究所 2006 藥學論文集 Vol.21 No.-

Metformin is an antihyperglycemic agent of the biguanide class used in the treatment of non-in-sulin-dependent diabetes mellitus. Metformin hydrochloride has intrinsically poor permeability in the lower portion of the GI-tract leading to absorption almost exclusively in the upper part of the GI-tract. Its oral bioavailability is in the range of 50 to 60%. It also has a very high water solubility. In this study, we prepared sustained release matrix system containing metformin hydrochloride using various characteristics of polyethylene oxide (PEO). The metformin hydrochloride matrix tablets were prepared by direct compressed method and wet granulation compressed method with various molecular weight of PEO. Even though the molecular weights of PEOs used were 900K, 2,000K, and 5,000K. Moreover, three types of matrix tablets were formulated compositions were same, the hardness was different. The release kinetics were studied for 9 hours in pH 1.2 simulated gastric fluid and pH 6.8 simulated intestinal fluid, using a dissolution tester at 37.5℃, 50 rpm. As the molecular weight of PEO increased, the release rate decreased due to the slower swelling and dissolution of PEO. For the effect of hardness of matrix tablets, the rate of drug release was decreased with increasing hardness.