LC-MS/MS 와 GC를 이용한 인삼 중 잔류농약 (펜시쿠론, 풀루토라닐) 동시분석에 대한 연구

윤원갑 서울산업대학교 산업대학원 2007 국내석사

세계 자유 무역의 마찰 및 국내 유통 안전법규, 소비자의 웰빙에 대한 요구에 비해 기존 GC를 이용한 인삼의 잔류 농약 분석 방법은 신속 대처 및 대응할 수 없는 한계점을 갖고 있다. 특히 복잡한 매트릭스를 갖고 있는 인삼에서 잔류농약의 정성 및 정량분석이 매우 어려운 현실이다. 따라서 triple quadrupole LC-MS/MS을 이용하여 기존 GC 분석의 미량 정성 및 정량분석의 한계점을 개선하고자 하였고 본 실험에서는 Flutolanil, Pencycuron의 농약에 대한 동시 분석 조건을 최적화하여 복잡한 매트릭스을 갖고 있는 인삼에 보다 효율적인 분석법을 제시하였다. 본 연구에 필요한 시료는 강원도 홍천에 소재하는 인삼포 60칸 (180 ㎝×70 ㎝/1칸)을 임대하여 직접 4년근 인삼을 재배 사용 하였고 . 분석대상농약 표준용액의 상관계수는 GC분석에서는 0.9996-0.9998 이었고, LC-MS/MS에서는 0.9993-0.9995으로 GC 및 LC-MS/MS 분석결과 모두 0.99이상의 좋은 상관계수 값을 보여주었다. 검출한계는 GC 분석결과 0.027~0.036 mg/kg이었고, LC-MS/MS분석결과 0.01 mg/kg 으로 GC분석결과 보다 2.7-3.6배 이상의 매우 높은 감도를 보여주었다. 인삼에서의 분석대상 농약에 대한 회수율을 비교하기 위하여 농약을 살포하지 않은 대조구와 인위적으로 3회 반복 첨가한 처리구를 비교하여 정확한 회수율을 구하였으며 그 결과 GC를 이용한 경우에는 62%~134%의 회수율을 보였으며 LC-MS/MS분석결과 75%~112%의 회수율을 보였다. 복잡한 매트릭스의 영향으로 회수율의 차이를 보였으며 LC-MS/MS에서 더 정확한 분석 결과를 도출 할 수 있었다. The objective of this study was to improve current KFDA official analytical methods for pesticide residues in ginseng using liquid chromatography coupled to triple quadrupole mass spectrometry (LC-MS/MS). The pesticides (Pencycuron, Flutoranil) were applied to the cultivation field of ginseng, and they were harvested, dried and processed to make concentrates. chromatography was performed on a cadanza CD-C18 (75×2.0 mm, 3 um). The mobile phase was a gradient methanol with 10 mM ammonium acetate at flow rate of 0.2 mL/min. The GC separation and MS/MS optimization were studied to select the most appropriate operating conditions. The limits of detection (LOD) were ranged from 0.01 mg/kg to 0.04 mg/kg in GC and LC-MS/MS. Calibration curves for Pencycuron, Flutoranil (range 0.01 mg/kg-10 mg/kg) were linear, with coefficients of correlations better than 0.99. The recoveries of Pencycuron, Flutolanil in ginseng matrics fortified with standard solution 1-10 mg/kg were ranged from 62.22% to 134.36% in GC. Those of Pencycuron, Flutolanil were in the range of 75.14-112..32% in LC-MS/MS. The LC-MS/MS method developed is rapid and suitable for quantification and confirmation of pesticide residues in ginseng

더덕(Codonopsis lanceolata)의 항당뇨 효능검증 및 기능성 소재 개발

윤원갑 안동대학교 2014 국내박사

This study aimed to develop Codonopsis lanceolata for the treatment and prevention of diabetes by evaluating its antidiabetic and health effects and demonstrating the superiority of this substance that originates in the region of Korea. C. lanceolata (100 g dry weight basis) consists of 33.18% carbohydrates, 28.56% protein, 19.18% fat, and 19.08% crude ash. Total sugar levels of C. lanceolata were 890.23 mg/g from water extract and 521.45 mg/g from ethanol extract, and reducing sugar levels were 521.45 mg/g and 375.74 mg/g, respectively. Total protein levels were 44.30 mg/g from water extracts and 65.93 mg/g from ethanol extract, and free amino acid levels were 7.82 mg/g and 15.23 mg/g respectively. Total polyphenol levels were 35.61 mg/g from water extracts and 10.58 mg/g from 70% ethanol extract. During verification of antioxidant activity, the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) RC50 value was 4,714 ?g/mL from water extract, 12,339 ?g/mL from ethanol extract, while those of 2,2′-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6 sulfonic acid) (ABTS) were 2,254 and 3,351 ?g/mL, respectively. Using 3T3-L1 cells to evaluate anti-obesity effects, after treating with 100 ?g/mL ethanol extract, there was no cellular cytotoxicity without decreasing lipid levels. For the antidiabetic in vitro experiment, inhibition of α-glucosidase was measured, which revealed that water and ethanol extracts displayed 1.03 and 0.59% less inhibitory activity, respectively, at a concentration of 1,000 ?g/mL. The present study was designed to investigate the antihyperlipidemic effect of C.lanceolata in C57BL/6J mice. The mice were divided into four groups: normal diet (ND), high fat diet (HFD), positive control with 0.05% metformin(PC), and 60% ethanol extract (CL) in C. lanceolata. After 5 weeks, the body weights in the HFD group had significantly increased, while those of the CL group had decreased. In addition, liver and adipose tissue weights in the CL group were significantly decreased. The plasma triglyceride (TG) and total cholesterol levels of the CL-supplemented group were significantly lower than those of the HFD group. On the other hand, the CL group showed increased high-density lipoprotein cholesterol. Sterol regulatory element-binding protein (SREBP)-1c, acetyl coenzyme A carboxylase (ACC), and fatty acid synthase (FAS) protein expressions were down-regulated in the livers of mice in the CL group compared to those in the HFD group. In conclusion, the results showed that C. lanceolata extract possesses significant antihyperlipidemic effects in C57BL/6J mice. According to western blot results, the addition of C. lanceolata increased the expression of peroxisome proliferator-activated receptor-α(PPARα), which plays a role in lipid metabolism. All of the following things were decreased as well: SREBP-1, which acts to control body fat in animals; FAS, which is involved in production of fatty acid synthase; and ACC, which plays a role in TG synthesis in hepatocytes. The extraction yields of processed and aged C. lanceolata, indicating steaming and drying treatments to C. lanceolata showed higher values than C. lanceolata. DPPH and ABTS antioxidant experiments revealed that C. lanceolata treated with 4 times steaming and drying showed higher antioxidant activity, exhibiting 2,880 ?g/mL of DPPH RC50 in water extrat and 9,624 ?g/mL in ethanol extrat. ABTS RC50 values were 987 ?g/mL in water extract and 1,542 ?g/mL in ethanol extract respectively. Single-aged C. lanceolata produced DPPH RC50 values of 3,297 ?g/mL and 10,611 ?g/mL for water and ethanol, respectively, while ABTS RC50 values were 1,548 ?g/mL and 1,954 ?g/mL, respectively. As for in vitro antidiabetic effects, the results were not substantial; however, on using the aging process, it was confirmed that the digestive enzyme inhibitory potency was enhanced. The flavor components of C. lanceolata, including hexanol, cis-3-hexanol, and trans-2-hexanol, were not detected in processed C. lanceolata but were seen in dried C. lanceolata produced by a modified version of the traditional mortar method in which 2-propanol, 2-propanol, and methyl ethyl ketone were discovered. Methyl formate, 2-methyl-1,3-dioxolane, propyl acetate, allyl alcohol, pentanal, methyl laurate, butyl alcohol, styrene, furfural were not detected in raw C. lanceolata, subsequently confirming the presence of fragrances produced through the steaming process.

계룡산 학하마을 문화유산 활용에 대한 연구

윤원갑 공주대학교 문화유산대학원 2022 국내석사

본 연구는 조선 중기 “정감록” 등에서 피난처이며 십승지지(十勝之地)라 했던 계룡산에 군부대가 들어오고 존치한 곳이라도 도시화의 물결로 복합 도·농·산촌으로 변천하는 모습에 따라 기존의 문화유산을 살리면서 잘 활용할 수 있는지에 대하여 살펴보았다. 계룡산은 산태극, 수태극을 이루는 명산이다. 계룡산에는 피난처로 알려진 신도안과 금병산(숯골)은 군부대가 계룡대, 자운대가 들어섰고 학하마을의 피난처만 남아 있지만, 점차 본래의 모습을 떠나 다른 모습으로 변하는 시기에 이르렀다. 이 마을은 천왕봉을 중심으로 대전광역시 유성구 학하동행정복지센터 관할 (학하동, 복용동, 계산동, 덕명동) 일대인데 계룡산 자락의 빈계산 아래에 위치하고 있다. 학하마을은 별봉 남쪽으로 월봉이 있고 가까운 교촌동 칠성당의 고인돌, 대정동의 한우물마을 고인돌에 새겨진 별자리 모양 바위구멍(성혈) 등은 모두 연관성이 있다고 생각된다. 이곳에는 계룡산의 금수봉, 도덕봉, 빈계산 등 수려한 자연경관과 별봉, 월봉, 학무정, 영당, 수통골 등이 있고 송시열, 탄허 스님, 김상만 동아일보사장, 도선국사, 암행어사 박문수, 이만형 광주이씨 입향조, 고려대 유진오 총장 등이 머물렀던 곳이다. 그들의 자취가 살아있는 문화유산을 활용하여 인근의 현충원에서 애국심을 갖게 하고 아기자기한 도예공원, 도예촌, 동학사, 유성온천과 고려유적 터, 금병산 숯골 등을 관광지로 연계하여 역사마을, 관광마을로 거듭날 수 있다. 계룡산과 빈계산에서 흘러내리는 화산천을 중심으로 진잠 방향의 학하동, 계산동, 유성방향의 복용동, 학하동이 있다. 앞으로 도시개발을 통하여 학하마을이라는 이름으로 문화유산탐방코스가 개발된다면 이곳의 문화유산이 잘 보존되고 알려지게 될 것이며 후손들의 삶의 질을 높이어 평생 살아가고 싶은 마을로 변화될 것이다. 본 연구의 목적은 오늘날 도시화의 물결로 학하마을의 정겨운 모습이 사라져가고 있지만, 지역 문화유산을 발굴하고 활용하여 역사마을, 관광마을, 도·농·산촌 복합 체험마을로 변화할 수 있도록 함에 있다.

Proteome analysis of human amniotic fluid using 2-D PAGE and MALDI-TOF MS

윤원갑 서울대학교 대학원 2004 국내석사