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        수지상세포의 방사선 저항성에 대한 연구

        김은실,김종순,이명호,범희승,민정준,정환정,김성민,허영준,송호천,이제중 대한핵의학회 2003 핵의학 분자영상 Vol.37 No.3

        목적 : 림프구와 비교되는 수지상 세포의 방사선 민감성을 보기 위하여 본 연구를 시행하였다. 대상 및 방법 : 말초혈액에서 분리한 T 림프구에 0 Gy, 10 Gy, 30 Gy의 방사선을 조사하고 4시간 후에 유세포 분석기를 이용하여 선량별 세포고사 빈도를 관찰하였다. 또한 조혈모세포에서 미성숙 및 성숙 수지상 세포를 단계적으로 분리 배양하여 각각 0 Gy, 10 Gy, 30 Gy, 100 Gy의 방사선을 조사하고 4시간, 24시간 그리고 48 시간 후에 선량별 세포고사 빈도를 관찰하였다. 사이토스핀(cytospin)슬라이드에 림프구와 미성숙 및 성숙 수지상세포를 3×104개 씩 분주하고 May Grunwald-Giemsa 염색한 후, 광학 현미경 하에서 각각의 세포군 당 100개의 세포에서 세포 면적당 핵의 면적 비를 측정하였다. 결과 : 림프구에서는 방사선조사 선량별로 세포고사 빈도가 유의하게 증가하였으나, 수지상 세포에서는 그 분화정도나 방사선조사 선량에 따른 세포고사의 빈도차이가 없었다. 또한 수지상 세포는 방사선선량과 관계없이 용량에 의존적으로 강력한 T-세포 자극능을 보였다. 림프구의 세포에 대한 핵의 면적 비는 미성숙 및 성숙 수지상세포의 세포에 대한 핵의 면적 비보다 현저히 큰 반면, 두 가지 수지상세포간에 유의한 차이는 없었다. 결론 : 수지상세포는 그 분화도와 상관없이 림프구에 비하여 방사선 저항성을 나타내었고, 이는 세포의 형태적 차이에 따른 표적의 크기와 관련이 있을 것으로 생각되며, 향후 분자 생물학적인 연구의 기초 자료로 활용할 수 있을 것으로 생각된다. Purpose : To evaluate radiation sensitivity of dendritic cells in comparison with lymphocytes. Materials and methods : T lymphocytes captured from peripheral blood were irradiated by 0 Gy, 10 Gy, 30Gy. Apoptosis was measured by flowcytometry for staining of Annexin V 4 hours after irradiation. Immature and mature dendritic cells processed from blood hematopoietic stern cell were irradiated by 0 Gy, 10 Gy, 30 Gy, 100 Gy respectively and apoptosis was measured by flowcytometry with time difference as 4h, 24h and 48h after irradiation. Morphometric analysis by percent nucleus was measured in three cell groups, also. Results : Lymphocytes showed radiation sensitivity by increasing apoptotic fraction according to radiation dose. However, both mature and immature dendritic cells showed consistent fraction of apoptosis in spite of increasing radiation dose. Percent nucleus ratio is significantly higher in lymphocytes than that of mature or immature dendritic cells. Stimulation of T-cell by dendritic cells was not changed after irradiation. Conclusion : Dendritic cells showed radioresistance which was associated with small size of nucleus in comparison with lymphocytes and this result would be used as a basal data of radio-labelling for the cellular trafficking studies in nuclear medicine fields.

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