Stimulation of Trout CYP1A Gene Expression in Mouse HEPA-1 Cells by 3-Methylcholanthrene

Lee, Soo Young,Sheen, Yhun Yhong 梨花女子大學校 藥學硏究所 1998 藥學硏究論文集 Vol.- No.7

Trout CYP1A-CAT expression construct was generated by cloning-3.5kb 5' flanking DNA of trout liver CYP1A gene in front of CAT gene at pCAT-basic vector. Hepa 1 cells, which an known to contain a functional arylhydrocarbon receptor' were transfected with trout CYP1A CAT using lipofectin. 3-Methylcholanthrene (1 nM) was added into hepa 1 cells in culture in order to examine if 5' flanking DNA of trout CYP1A gene could interact with mouse transactivating factors to bring about transcription of the chloramphenicol acetyltransferase(CAT) reporter gene. The level of CAT protein was measured by CAT ELISA and the level of CAT mRNA was determined by RTPCR. The treatment of 1 nM 3-methylcholanthrene resulted two fold increases in CAT protein as well as CAT mRNA compared to untreated control hepa cells. These data indicate that arylhydrocarbon receptors of mouse hepa 1 cells are function to activate exogenously transfected trout CYP1A-CAT construct in terms of both transcription and translation of CAT. We also examined the effect of 3-methylcholanthrene on endogeno cyp1a1 activity in hepa 1 cell. 3-Methylcholanthrene (1 nM) treatment to hepa 1 cell transfected with trout CYP1A-CAT construct stimulated the level of cyp1a1 mRNA by two folds and the activity of ethoxyresorufin-O-deethylase by two fold compared to that of contra cell. In this study we reported that trout CYP1A-CAT reporter gene expression construct could be expressed by 3-methylcholanthrene treatment in mouse hepa 1 cells. Thus trout CYP1A-CAT could serve as a good model to study the mechanism of regulation of CYP1A1 get expression.

Stimulation of Trout CYP1A Gene Expression in Mouse HEPA-1 Cells by 3-Methylcholanthrene

Lee, Soo-Young,Sheen, Yhun-Yhong The Pharmaceutical Society of Korea 1997 Archives of Pharmacal Research Vol.20 No.5

Trout CYP1A-CAT expression construct was generated by cloning -3.5 Kb $5^I$ flanking DNA of trout liver CYP1A gene in front of CAT gene at pCAT-basic vector. Hepa 1 cells, which are known to contain a functional arylhydrbcarbon $receptor^I$ were transfected with trout CYP1A-CAT using lipofectin. 3-Methylcholanthrene (1 nM) was added into hepa 1 cells in culture in order to examine if $5^I$ flanking DNA of trout CYP1A gene could interact with mouse transactivating factors to bring about transcription of the chloramphenicol acetyltransferase(CAT) reporter gene. The level of CAT protein was measured by CAT ELISA and the level of CAT mRNA was determined by RTPCR. The treatment of 1 nM 3-methylcholanthrene resulted in two fold increases in CAT protein as well as CAT mRNA compared to untreated control hepa 1 cells. These data indicate that arylhydrocarbon receptors of mouse hepa 1 cells are functional to activate exogenously transfected trout CYP1A-CAT construct in terms of both transcription and translation of CAT. We also examined the effect of 3-methylcholanthrene on endogenous cyplal activity in hepa 1 cell. 3-Methylcholanthrene (1 nM) treatment to hepa 1 cells trahsfected with trout CYP1A-CAT construct stimulated the level of cyp1a1 mRNA by two folds and the activity of ethoxyresorufin-O-deethylase by two fold compared to that of control cells. In this study we reported that trout CYP1A-CAT reporter gene expression construct could be expressed by 3-methylcholanthrene treatment in mouse hepa 1 cells. Thus trout CYP1A-CAT could serve as a good model to study the mechanism of regulation of CYP1A1 gene expression.

Catalpol Inhibits Tregs-to-Th17 Cell Transdifferentiation by Up-Regulating Let-7g-5p to Reduce STAT3 Protein Levels

Lingling Zhou,Yuxi Di,Mingfei Zhang,Yichang Chen,Ruonan Sun,Meiyu Shen,Fengxiang Tian,Pei Yang,Feiya Qian 연세대학교의과대학 2022 Yonsei medical journal Vol.63 No.1

Purpose: Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic systemic autoimmune disease, and Th17 cells are key factors in the pathogenesis of human inflammatory conditions, such as RA. Catalpol (CAT), a component in Rehmanniae Radix (RR), has been found to regulate human immunity. However, the effects of CAT on Th17 cell differentiation and improvement of RA are not clear. Materials and Methods: Collagen-induced arthritis (CIA) mice were constructed to detect the effects of CAT on arthritis and Th17 cells. The effect of CAT on Th17 differentiation was evaluated with let-7g-5p transfection experiments. Flow cytometry was used to detect the proportion of Th17 cells after CAT treatment. Levels of interleukin-17 and RORγt were assessed by qRT-PCR and enzyme-linked immunosorbent assay. The expression of signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) was determined by qRT-PCR and Western blot. Results: We found that the proportion of Th17 cells was negatively associated with let-7g-5p expression in CIA mice. In in vitro experiments, CAT suppressed traditional differentiation of Th17 cells. Simultaneously, CAT significantly decreased Tregs-to-Th17 cells transdifferentiation. Our results demonstrated that CAT inhibited Tregs-to-Th17 cells transdifferentiation by up-regulating let-7g-5p and that the suppressive effect of CAT on traditional differentiation of Th17 cells is not related with let-7-5p. Conclusion: Our data indicate that CAT may be a potential modulator of Tregs-to-Th17 cells transdifferentiation by up-regulating let-7g-5p to reduce the expression of STAT3. These results provide new directions for research into RA treatment.

The effects of pro-inflammatory cytokines and glutamate on l-arginine transport in a human microglial cell line (HMC-3)

Latif Sana,Kang Young-Sook 한국약제학회 2024 Journal of Pharmaceutical Investigation Vol.54 No.1

Purpose Neuroinflammation and microglial activation are the key factors in neurodegenerative motor neuron diseases. Microglial activation has been link to disease progression in humans. This study investigated the transport and potential effects of l-arginine under pathological conditions in a human microglial cell line. Methods Transport study was performed using [ 3H]l-arginine isotope and uptake was measured in the human microglial clone 3 (HMC-3) cell line. MTT assay was performed for cell viability analysis. mRNA expression of cationic amino acid transporter-1 (CAT-1) was also determined. Results The transport of l-arginine was time- and concentration-dependent in HMC-3 cell lines. Kinetic parameters revealed carrier-mediated arginine transport via CAT-1, with high affinity and low capacity at high-affinity sites and low affinity and high capacity at low-affinity sites. HMC-3 cells pretreated with glutamate exhibited decreased viability. [ 3H]l-arginine uptake increased markedly with glutamate pretreatment, whereas co-treatment with arginine further increased the uptake. After tumor necrosis factor α and lipopolysaccharide pretreatment, [ 3H]l-arginine uptake significantly increased. In contrast, the uptake was significantly decreased after co-treatment of the cells with unlabeled l-arginine. The mRNA expression of CAT-1 showed a similar uptake pattern. Various pharmacological drugs including donepezil, quinidine, verapamil and tramadol significantly inhibited the uptake of [ 3H]l-arginine in HMC-3 cell line. Conclusion These results suggest that l-arginine supplementation may play an effective role against inflammatory states in neurodegenerative diseases.

한쪽 미로를 제거한 고양이에서 자발안진, 두위안진, 두위변환안진, 두진후안진의 측정

채세용,전은주 대한이비인후과학회 1999 대한이비인후과학회지 두경부외과학 Vol.42 No.3

정상 고양이에서 온도 안진과 시성 억제 효과의 3차원적 측정

박시내,여상원,전은주,채세용,박용수,서병도 대한이비인후과학회 2001 대한이비인후과학회지 두경부외과학 Vol.44 No.5

한탄강댐 상류 농업용 저수지를 고려한 하천유출량 평가

장철희 ( Jang Cheolhee ),김현준 ( Kim Hyeonjun ),김덕환 ( Kim Deokhwan ) 한국물환경학회 2020 한국물환경학회·대한상하수도학회 공동 춘계학술발표회 Vol.2020 No.-

대하천 주변 광역상수도 공급지역은 가뭄 발생시에도 안정적으로 물이용이 가능하나, 중소하천을 수원으로 하는 하천의 상류지역은 가뭄시 물공급 안정성이 취약하다. 따라서 중소하천을 대상으로 가뭄시 물 공급시설의 효율적 운영, 물부족 위험도 평가, 가용 수자원의 최적이용 등 종합적인 대책 마련을 위해서는 신뢰성 높은 수문량(하천유출량 및 수자원가용량) 예측이 필요하다. 기존의 가뭄시 하천유출량 예측정확도 평가는 통계적 회귀분석을 통한 가뭄지수 기반의 가뭄상황의 예측에 치중하여 불확실성이 크며 국내 유역의 복잡한 물이용체계를 고려하지 않아 시·공간적인 규모에 따라 상이한 결과를 나타내며 실측자료 기반의 하천유출량과 비교하면 정확도가 대부분 60% 이하로 나타난다(이상은 등, 2015). 본 연구에서는 농업용 저수지의 상세 물이용체계를 고려한 정도 높은 유역 하천유출량의 평가를 위하여 한강권역 내의 한탄강댐 상류 유역을 시험유역으로 선정하였다. 한탄강댐 상류유역은 다수의 복잡한 농업용 저수지 운영에 따른 하천유출량 예측정확도가 매우 낮은 지역으로 본 연구를 통해 정도 높은 하천유출량의 예측정확도를 확보하기에 적정한 유역이라 판단하였다. 하천유출량을 평가하기 위한 모형은 한국건설기술연구원에서 개발된 CAT3.2(Catchment hydrologic cycle Assessment Tool 3.2)를 이용하였다. CAT 3.2는 중소하천 유역 내의 인위적인 물이용체계(광역급수, 재이용, 지하수 취수, 하천수 취ㆍ배수 등)를 반영한 수문량(하천유출량 및 수자원가용량) 평가 및 예측이 가능한 모형으로 기존 개념적 매개변수 기반의 집중형 수문모형과 물리적 매개변수 기반의 분포형 수문모형의 장점을 최대한 집약하여 개발되었다. 한탄강댐 상류유역의 물리적 매개변수는 최대한 기 구축된 GIS 자료를 활용하여 추출하였다. 토지이용현황은 산림과 농업지역이 대부분을 차지하여 농업용수 공급이 대부분인 물이용체계를 가지고 있다. 따라서 한국농어촌공사에서 관리하는 11개 농업용 저수지에 대한 취수현황 및 제원, 국가지하수센터의 유역내 지하수사용량, 하폐수처리량을 기본 입력 자료로 사용하였다. 특히 농업용 저수지의 경우에는 저수지출구점을 기준으로 저수지 상류유역 및 한국농어촌공사에서 기 구축된 관개면적 공간자료를 기본으로 수혜구역을 세분화하여 모형을 적용하였다.

한탄강댐 상류 농업용 저수지를 고려한 하천유출량 평가

장철희 ( Jang Cheolhee ),김현준 ( Kim Hyeonjun ),김덕환 ( Kim Deokhwan ) 한국물환경학회 2020 한국물환경학회·대한상하수도학회 공동 춘계학술발표회 Vol.2020 No.-

대하천 주변 광역상수도 공급지역은 가뭄 발생시에도 안정적으로 물이용이 가능하나, 중소하천을 수원으로 하는 하천의 상류지역은 가뭄시 물공급 안정성이 취약하다. 따라서 중소하천을 대상으로 가뭄시 물 공급시설의 효율적 운영, 물부족 위험도 평가, 가용 수자원의 최적이용 등 종합적인 대책 마련을 위해서는 신뢰성 높은 수문량(하천유출량 및 수자원가용량) 예측이 필요하다. 기존의 가뭄시 하천유출량 예측정확도 평가는 통계적 회귀분석을 통한 가뭄지수 기반의 가뭄상황의 예측에 치중하여 불확실성이 크며 국내 유역의 복잡한 물이용체계를 고려하지 않아 시·공간적인 규모에 따라 상이한 결과를 나타내며 실측자료 기반의 하천유출량과 비교하면 정확도가 대부분 60% 이하로 나타난다(이상은 등, 2015). 본 연구에서는 농업용 저수지의 상세 물이용체계를 고려한 정도 높은 유역 하천유출량의 평가를 위하여 한강권역 내의 한탄강댐 상류 유역을 시험유역으로 선정하였다. 한탄강댐 상류유역은 다수의 복잡한 농업용 저수지 운영에 따른 하천유출량 예측정확도가 매우 낮은 지역으로 본 연구를 통해 정도 높은 하천유출량의 예측정확도를 확보하기에 적정한 유역이라 판단하였다. 하천유출량을 평가하기 위한 모형은 한국건설기술연구원에서 개발된 CAT3.2(Catchment hydrologic cycle Assessment Tool 3.2)를 이용하였다. CAT 3.2는 중소하천 유역 내의 인위적인 물이용체계(광역급수, 재이용, 지하수 취수, 하천수 취ㆍ배수 등)를 반영한 수문량(하천유출량 및 수자원가용량) 평가 및 예측이 가능한 모형으로 기존 개념적 매개변수 기반의 집중형 수문모형과 물리적 매개변수 기반의 분포형 수문모형의 장점을 최대한 집약하여 개발되었다. 한탄강댐 상류유역의 물리적 매개변수는 최대한 기 구축된 GIS 자료를 활용하여 추출하였다. 토지이용현황은 산림과 농업지역이 대부분을 차지하여 농업용수 공급이 대부분인 물이용체계를 가지고 있다. 따라서 한국농어촌공사에서 관리하는 11개 농업용 저수지에 대한 취수현황 및 제원, 국가지하수센터의 유역내 지하수사용량, 하폐수처리량을 기본 입력 자료로 사용하였다. 특히 농업용 저수지의 경우에는 저수지출구점을 기준으로 저수지 상류유역 및 한국농어촌공사에서 기 구축된 관개면적 공간자료를 기본으로 수혜구역을 세분화하여 모형을 적용하였다.

한탄강댐 상류 농업용 저수지를 고려한 하천유출량 평가

장철희 ( Jang Cheolhee ),김현준 ( Kim Hyeonjun ),김덕환 ( Kim Deokhwan ) 한국물환경학회 2020 한국물환경학회·대한상하수도학회 공동 춘계학술발표회 Vol.2020 No.-

대하천 주변 광역상수도 공급지역은 가뭄 발생시에도 안정적으로 물이용이 가능하나, 중소하천을 수원으로 하는 하천의 상류지역은 가뭄시 물공급 안정성이 취약하다. 따라서 중소하천을 대상으로 가뭄시 물 공급시설의 효율적 운영, 물부족 위험도 평가, 가용 수자원의 최적이용 등 종합적인 대책 마련을 위해서는 신뢰성 높은 수문량(하천유출량 및 수자원가용량) 예측이 필요하다. 기존의 가뭄시 하천유출량 예측정확도 평가는 통계적 회귀분석을 통한 가뭄지수 기반의 가뭄상황의 예측에 치중하여 불확실성이 크며 국내 유역의 복잡한 물이용체계를 고려하지 않아 시·공간적인 규모에 따라 상이한 결과를 나타내며 실측자료 기반의 하천유출량과 비교하면 정확도가 대부분 60% 이하로 나타난다(이상은 등, 2015). 본 연구에서는 농업용 저수지의 상세 물이용체계를 고려한 정도 높은 유역 하천유출량의 평가를 위하여 한강권역 내의 한탄강댐 상류 유역을 시험유역으로 선정하였다. 한탄강댐 상류유역은 다수의 복잡한 농업용 저수지 운영에 따른 하천유출량 예측정확도가 매우 낮은 지역으로 본 연구를 통해 정도 높은 하천유출량의 예측정확도를 확보하기에 적정한 유역이라 판단하였다. 하천유출량을 평가하기 위한 모형은 한국건설기술연구원에서 개발된 CAT3.2(Catchment hydrologic cycle Assessment Tool 3.2)를 이용하였다. CAT 3.2는 중소하천 유역 내의 인위적인 물이용체계(광역급수, 재이용, 지하수 취수, 하천수 취ㆍ배수 등)를 반영한 수문량(하천유출량 및 수자원가용량) 평가 및 예측이 가능한 모형으로 기존 개념적 매개변수 기반의 집중형 수문모형과 물리적 매개변수 기반의 분포형 수문모형의 장점을 최대한 집약하여 개발되었다. 한탄강댐 상류유역의 물리적 매개변수는 최대한 기 구축된 GIS 자료를 활용하여 추출하였다. 토지이용현황은 산림과 농업지역이 대부분을 차지하여 농업용수 공급이 대부분인 물이용체계를 가지고 있다. 따라서 한국농어촌공사에서 관리하는 11개 농업용 저수지에 대한 취수현황 및 제원, 국가지하수센터의 유역내 지하수사용량, 하폐수처리량을 기본 입력 자료로 사용하였다. 특히 농업용 저수지의 경우에는 저수지출구점을 기준으로 저수지 상류유역 및 한국농어촌공사에서 기 구축된 관개면적 공간자료를 기본으로 수혜구역을 세분화하여 모형을 적용하였다.

한탄강댐 상류 농업용 저수지를 고려한 하천유출량 평가

장철희(Cheol Hee Jang),김현준(Hyeon Jun Kim),김덕환(Deok Hwan Kim) 대한토목학회 2020 대한토목학회 학술대회 Vol.2020 No.10