신생아 분변으로부터 분리한 Bifidobacterium 균주의 모유 올리고당 이용능 및 비타민 B 생성능 연구

정혜수,김경렬,김경현,김홍만,임상현,정명준,전체옥 한국미생물학회 2020 미생물학회지 Vol.56 No.3

Utilization of indigestible oligosaccharides and human milk oligosaccharide (HMO) and biosynthesis of vitamin B by four Bifidobacterium strains (B. longum subsp. infantis CBT BT1, B. bifidum CBT BF3, B. breve CBT BR3, and B. longum CBT BG7) harboring genes associated with fructooligosaccharide (FOS), galactooligosaccharide (GOS), and HMO, 2'-fucosyllactose and 3'-sialyllactose, metabolism and folate, nicotinate, and riboflavin synthesis, which were isolated from infant feces, were experimentally verified. Indigestible oligosaccharides, HMO, and vitamin B compounds were analyzed using LC-QTOF/ MS. All Bifidobacterium strains utilized GOS better than FOS and especially, B. longum subsp. infantis CBT BT1 had a good ability to utilize GOS. Strains CBT BT1 and CBT BF3 utilized 2'-fucosyllactose well and B. bifidum CBT BF3 had an ability to utilize 3'-sialyllactose as well as 2'-fucosyllactose. Vitamin B biosynthesis tests showed that the Bifidobacterium strains produced folate at very low concentrations even in the presence of 4-aminobenzoic acid as the precursor. However, all Bifidobacterium strains highly produced nicotinate in blood liver and SM7 media supplemented with nicotinamide as the precursor. B. bifidum CBT BF3 also highly produced riboflavin in media supplemented with guanine as the precursor. This study suggests that the Bifidobacterium strains may have potential values as probiotics having abilities to utilize indigestible oligosaccharides and HMO and to produce vitamin B. 난소화성 올리고당인 fructooligosaccharide (FOS)와 galactooligosaccharide (GOS), 모유 올리고당(HMO, human milk oligosaccharide)인 2'-fucosyllactose와 3'-sialyllactose의 이용능과 folate, nicotinate, riboflavin의 생합성 유전자를 보유한신생아 분변에서 분리된 4종의 Bifidobacterium속 균주(B. longum subsp. infantis CBT BT1, B. bifidum CBT BF3, B. breve CBT BR3, B. longum CBT BG7)의 난소화성 올리고당과 모유 올리고당의 이용능, 비타민 B군 생합성능을 실험적으로 검증하였다. 난소화성 올리고당과 모유 올리고당, 비타민 B 군 화합물은 LC-QTOF-MS를 사용하여 분석하였다. 실험에사용한 모든 Bifidobacterium 균주는 FOS보다 GOS를 더 잘 이용하는 것으로 나타났는데, 특히 B. longum subsp. infantis CBT BT1균주는 높은 GOS 이용능을 보여주었다. CBT BT1 균주와 CBT BF3 균주는 2'-fucosyllactose를 잘 이용하였고 CBT BF3 균주는 2'-fucosyllactose뿐만 아니라 3'-sialyllactose 이용능도 가지고 있었다. 비타민 B 생합성 실험에서, Bifidobacterium 균주는 그 전구체인 4-aminobenzoic acid를 첨가한 배지에서도 folate의 생성능이 4종의 균주 모두에서 매우 낮은 것으로 확인되었다. 하지만 모든 Bifidobacterium 균주는 nicotinamide를전구체로 첨가한 BL배지와 SM7배지에서 매우 높은 nicotinate 생성능을 보였다. Riboflavin의 경우 guanine을 전구체로 첨가한 BL배지와 SM7배지 모두에서 CBT BF3 균주가 높은 생성능을 보였다. 이 연구는 Bifidobacterium 균주가 난소화성 올리고당과 모유 올리고당에 대한 이용능과 비타민 B 생성능을가진 프로바이오틱 균주로서 잠재적 가치가 있음을 시사한다.

쌀 발효제품 제조를 위한 마크로파지활성 비피더스균의 선발

차성관,홍석산,지근억,목철균,박종현 한국산업미생물학회 1999 한국미생물·생명공학회지 Vol.27 No.6

아밀라아제 효소활성 및 면역 증강능이 높은 비피더스 균주를 이용한 쌀 발효식품을 개발하기 위하여 다양한 연령층의 성인 및 유아들 지원자로부터 변시료를 제공받아 전분이 첨가된 고체배지에서 자라는 Bifidobacterium 중 amylase 효소활성이 높은 47균주를 분리하였다. 이들 amylolytic Bifidobacterium들이 면역활성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 macrophage 세포에 해당하는 murine macrophage cell line RAW 264.7을 이용하였고, 조사된 면역 매개 물질로서는 tumor necrosis factor(TNF-a), interleukin(IL)-6 등의 cytokine과 nitric oxide(NO)를 대상으로 하였다. 실험 결과 Bifidobacterium longum으로 잠정적으로 동정된 KFRI 1535 균주와 B. breve로 동정된 KFRI 1550 두 균주가 TNF-α와 IL-6의 높은 생성능을 보여 주었다. 균체의 농도가 증가할수록 cytokine 생산능이 일반적으로 증가하였지만 균체의 농도가 250㎍/ml 수준에 달하였을 때 일부의 균주에서 cytokine 생산능이 감소하는 경우도 있었다. 대체로 cytokine 증가능이 클수록 NO의 수준도 크게 증가시켰지만 cytokine에 비하여는 균주별 차이가 뚜렷하지 못하였다. 쌀 사과박 발효제품의 제조를 위한 선발된 균주들의 발효특성 조사가 이루어졌고, 최종적으로 선발된 KFRI 1535 균주를 이용하여 쌀당화액과 사과박의 비율을 달리하여 발효한 제품의 pH와 적정산도를 측정한 결과 쌀당화액이 사과박의 2배농도에서 가장 우수한 발효특성을 보였다. Forty seven amylolytic Bifidobacterium strains were isolated on starch-containing agar medium from the faecal samples of the various age groups of Korean. From these amylolytic Bifidobacterium spp., two strains of KFRI 1535, identified temporarily as Bifidobacterium longum, and KFRI 1550, identified as Bifidobacterium breve, showed great macrophage-stimulating activity for the production of tumor necrosis factor-α and inteleukin-6. As the cell concentration increased the cytokine production increased, although in some strains the cytokine levels started to decline over cell concentration of 250㎍/ml. The strains which showed high cytokine-stimulating activity generally showed greater production of nitric oxide even though differences were less between strains. Selected Bifidobacterium strains were compared for their fermentation capability in saccharified rice solution and in apple pomace mixture.

Molecular Identification of Predominant Bifidobacterium Strains Isolated from Korean Feces

So, Jae Seong,Lee, Ki Yong,Jeakal, Soo,Heo, Tae Ryeon,Kim, Seung Cheol 한국미생물 · 생명공학회 2002 Journal of microbiology and biotechnology Vol.12 No.1

In order to isolate and identify Bifidobacterium spp. that originated in Korea, feces were sampled from healthy Korean adults and children living in three villages, the first having a history of longevity and the other two where the diet did not include fermented milk or any pharmaceutical preparations. Through the use of Gram staining and microscopic examination for cell morphology, 23 bacterial strains presumed to be the Bifidobacterium genus were isolated from the feces of 13 out of a total of 59 Korean people. To identify the Bifidobacterium strains at the genus level, these bacteria were then analyzed by TLC and the fructose-6-phosphate phosphoketolase (F6PPK) test. The result showed that 22 of the isolated strains were confirmed to be members of the genus Bifidobacterium. All of these bifidobacteria were also identified as Bifidobacterium spp. by the fermentation test. Using a RFLP analysis, an attempt was made to identify the Bifidobacterium spp. that had been isolated from both Korean adults and children. In a genomic Southern blot analysis after digestion with two restriction enzymes (EcoRI, HindⅢ), all of the 14 randomly selected Korean isolates showed patterns identical to those of three different B. longum species. Another restriction enzyme, CfoI (4-bp recognition enzyme), was then used to identify the strain. Interestingly, all the Korean isolates were identified as B. longum ATCC 15708, indicating that a RFLP analysis was effective for identifying Bifidobacterium spp. at both the strain and species levels.

Bifidobacterium을 이용한 콩·쌀 혼합 발효유의 필수아미노산 조성, 유산균 생존율 및 isoflavone 농도

盟元在,洪熙玉 대한민국 학술원 2007 학술원논문집 : 자연과학편 Vol.46 No.1

본 연구에서는 콩과 쌀을 혼합하여 Bifidobacterium으로 발효시킨 후 발효 전인 콩·쌀 혼합유와 발효 후인 콩·쌀 혼합 발효유 내에 함유된 기능성 물질인 isoflavone함량과 필수아미노산의 함량을 규명하였다. 또한 기호도 조사를 위하여 관능검사를 실시하였으며, 콩·쌀 혼합 발효유의 보존성 및 이동성의 우수함을 규명하고자 유산균 생존균수를 측정하였다. 두유와 미유를 일정비율로 혼합하여 만든 발효유 중 8:2 비율의 콩·쌀 혼합 발효유가 다른 시료들보다 비교적 높은 기호도 점수를 받았다. 발효 전과 발효 후, 필수아미노산의 함량은 두유의 함유율이 증가할수록 높았고 특히 쌀의 제한 아미노산인 isoleucine과 lysine함량은 두유의 함유율이 증가할수록 증가하여 단백질의 품질이 향상되었다. 총 isoflavone의 함량은 293.63~457.97ug/g를 나타내며 두유의 함유율이 증가할수록 높았고 모든 시료들에서 발효 전에 비하여 발효 후 유의하게 증가하였다(p<0.05). 총 isoflavone 함량에 대한 aglycone의 퍼센트를 비교해 보면 8:2 비율의 콩·쌀 혼합유와 혼합 발효유에서 genistein의 aglycone 함량이 41.01%와 39.52%를 각각 나타내며 다른 시료들보다 유의하게 높았다(p<0.05). 기호도가 가장 우수하다고 조사된 8:2 비율의 콩·쌀 혼합 발효유의 일부는 동결 건조시킨 후 분말 상태로 만들어 액상의 발효유와 함께 4℃와 실온에 보관하면서 유산균의 생균수를 측정한 결과 4℃에 보관하였을 경우는 시간이 경과됨에 따라 생균수의 변화가 없었고 실온에서는 보관 2일이 지나면서 액상 발효유의 생균수가 감소하는 경향을 보인 반면에 분말상 발효유의 생균수는 변화가 없었다. In this study, soy-rice milks composed of soy milk(SM) and rice milk(RM) at ratios of 5:5(SM/RM5:5), 6:4(SM/RM6:4), 7:3(SM/RM7:3), 8:2(SM/RM8:2), 9:1(SM/RM9:1), and 10:0 (SM/RM10:0), respectively were fermented with Bifidobacterium(lactic acid bacteria) and the contents of various isoflavones(aglycones, glucosides), essential amino acid contents, and total number of Bifidobacterium were investigated. The fermented SM/RM 8:2 were more prefered than other samples by the sensory evaluation. The more soy milk were added, the more contents of essential amino acids, especially isoleucine and lysine were increased. Therefore, the essential amino acid contents of unfermented SM/RM 10:0 were significantly higher than those of unfermented and fermented SM/RM5:5(p<0.05). However, isoleucine and lysine contents did not show any difference between the unfermented and the fermented SM/RM 10:0 and SM/RM 8:2, respectively. All samples contained 293.63~457.97ug/g of total isoflavone contents and fermented samples were significantly higher than unfermented samples in the isoflavone contents (p<0.05). The percentage of free genistein(genistein aglycone) to total isoflavone content in the unfermented and the fermented SM/RM 8:2 were 41.01%, and 39.52%, respectively, which were higher than those of other samples significantly(p<0.05) because free genistein contents in same samples were the highest. When liquid and powder of unfermented and fermented SM/RM 8:2 were stored at 4℃, total numbers of Bifidobacterium did not show any difference between two samples. But when those samples were stored at room temperature, total numbers of Bifidobacterium of liquid sample tended to decline after 2 days but those of powder one maintained few change during 6 days.

모유수유와 분유수유에 따른 영아 장내 미생물 군집의 특징

김경순,신정,심지수,연수지,이평안,정문규,Kim, Kyeong Soon,Shin, Jung,Sim, JiSoo,Yeon, SuJi,Lee, Pyeong An,Chung, Moon Gyu 한국미생물학회 2019 미생물학회지 Vol.55 No.3

장 내에 존재하는 microbiome은 생활환경, 나이와 섭취하는 음식물에 따라 변하게 된다. 본논문에서는 모유를 섭취한 영아와 분유를 섭취한 영아들에 대한 장내미생물 군집의 변화를 비교하였다. 미생물의 군집변화를 차세대 염기서열 분석기법을 이용하여 분석하였으며 총 80개의 영아 분변을 통해 미생물 군집변화를 확인하였다. 모유그룹(BIG)과 분유그룹(FIG-A, FIG-B, FIG-C)간의 장내세균의 군집을 비교한 결과 BIG에서는 Actinobacteria 문이 전체 군집의 $74.22{\pm}3.48%$로 우점을 차지하였다. 분유그룹의 Actinobacteria 문을 비교하였을 때 FIG-A는 $73.46{\pm}4.12%$였지만 FIG-B와 FIG-C는 $66.52{\pm}5.80%$와 $68.88{\pm}4.33%$로 BIG와 FIG-A에 비해 낮은 비율을 보였다. 속(genus) 수준에서 살펴보면 Bifidobacterium이 전체 미생물군집에서 가장 높은 비율로 분포하고 있었으며 BIG가 $73.09{\pm}2.31%$로 가장 높았고 FIG-A, FIG-B 및 FIG-C는 각각 $72.25{\pm}4.93%$, $63.81{\pm}6.05%$ 및 $67.42{\pm}5.36%$를 차지하였다. Bifidobacterium 종의 경우 모든 그룹에서 Bifidobacterium longum이 우점을 차지하고 있었으며 BIG와 FIG-A가 전체 군집의 $68.77{\pm}6.07%$와 $66.85{\pm}5.80%$를 차지하였다. 이에 반해 FIG-B와 FIG-C는 각각 $58.94{\pm}6.20%$와 $61.86{\pm}5.31%$로 BIG와 FIG-A보다 낮은 비율로 분포하는 것을 분석하였다. FIG-A가 섭취한 분유는 Bifidobacterium의 선택적 증식이 우수하다고 알려진 갈락토올리고당, 갈락토실락토스, 시너지올리고당, 비피도올리고 및 장내균총개선소재를 혼합한 5-Bifidus factor 복합물이 포함되어 있다. 이와 같은 5-Bifidus factor라는 유산균에 대한 증식능이 우수한 프리바이오틱스를 혼합하였기 때문에 모유를 섭취한 영아의 장내에 존재하는 Bifidobacterium 속의 군집과 유사하게 나타난 것으로 판단된다. The intestinal microbiomes vary according to the factors such environment, age and diet. The purpose of this study was to compare the gut microbial diversity between Korean infants receiving breast-fed milk and formula-fed milk. We analyzed microbial communities in stool samples collected from 80 Korean infants using next generation sequencing. Phylum level analysis revealed that microbial communities in both breast-fed infants group (BIG) was dominated by Actinobacteria ($74.22{\pm}3.48%$). Interestingly, the phylum Actinobacteria was dominant in formula-fed infants group A (FIG-A) at $73.46{\pm}4.12%$, but the proportions of phylum Actinobacteria were lower in formulafed infants group B and C (FIG-B and FIG-C) at $66.52{\pm}5.80%$ and $68.88{\pm}4.33%$. The most abundant genus in the BIG, FIG-A, FIG-B, and FIG-C was Bifidobacterium, comprising $73.09{\pm}2.31%$, $72.25{\pm}4.93%$, $63.81{\pm}6.05%$, and $67.42{\pm}5.36%$ of the total bacteria. Furthermore, the dominant bifidobacterial species detected in BIG and FIG-A was Bifidobacterium longum at $68.77{\pm}6.07%$ and $66.85{\pm}4.99%$ of the total bacteria. In contrast, the proportions of B. longum of FIG-B and FIG-C were $58.94{\pm}6.20%$ and $61.86{\pm}5.31%$ of the total bacteria. FIG-A showed a community similar to BIG, which may be due to the inclusion of galactooligosaccharide, galactosyllactose, synergy-oligosaccharide, bifidooligo and improvement material of gut microbiota contained in formula-milk. We conclude that 5-Bifidus factor contained in milk powder promotes the growth of Bifidobacterium genus in the intestines.

가축의 장관에서 분리되는 Bifidobacterium속 세균의 특성조사 및 장내세균총 분포에 관한 연구

이완규,Lee, Wan-kyu 대한수의학회 1994 大韓獸醫學會誌 Vol.34 No.1

The present study was undertaken to obtain the basic knowledge on the distribution of intestinal microflora and characterization of Bifidobacterium isolated from the intestine of cattle, pigs, chicken and dogs. Bacteroidaceae and Streptococcus were isolated from the feces of cattle as predominant organisms, and Bifidobacterium was in counts of $8.65{\pm}0.21$ log 10 organisms. Bacteroidaceae, Eubacterium and Peptococcaceae counts on the feces of pigs were particularly high, but Bifidobacterium did not isolated. In hens and dogs, the counts of Bifidobacterium were $7.60{\pm}0.71$ and $8.15{\pm}2.04$ log 10 organism, respectively. Isolated 7 Bifidobacterial strains were identified respectively to B. thermophilum from cattle, B. pullorum and B. animalis from pigs, and B. longum, B. adolescentis and B. pseudolongum from dogs by their carbohydrate fermentation ability.

소량의 Bifidobacterium 배양액에서 genomic DNA 추출을 위한 신속 /간단한 방법

제갈수,박희경,송지은,허태련,소재성 한국산업미생물학회 1995 한국미생물·생명공학회지 Vol.23 No.6

본 연구에서는 Bifidobacterium spp.의 genomic DNA를 빠르고, 간단하게 3 ㎖ 배양액에서부터 추출하는 방법을 확립하였다. 배양조건이 까다롭고, 세포벽이 단단한 Bifidobacterium spp.의 genomic DNA의 신속한 추출방법은 이 균주의 유전공학연구에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다. 이 방법을 이용하여 B. longum으로부터 total genomic DNA를 분리한 후, 제한효소와 T4 DNA ligase로 처리하여 전기영동으로 확인하였다. A method is described for the rapid and simple isolation of genomic DNA from 3 ㎖ culture of Bifidobacterium. The method is expected to be used in gene manipulation of Bifidobacterium spp. The isolated DNA using this method is shown to be an excellent substrate for restriction endonuclease digestion and ligation with T4 DNA ligase.

Bioactive Compounds / Food Microbiology : Enhanced Acid Tolerance in Bifidobacterium longum by Adaptive Evolution: Comparison of the Genes between the Acid-Resistant Variant and Wild-Type Strain

( Yunyun Jiang ),( Fazheng Ren ),( Songling Liu ),( Liang Zhao ),( Huiyuan Guo ),( Caiyun Hou ) 한국미생물 · 생명공학회 2016 Journal of microbiology and biotechnology Vol.26 No.3

Acid stress can affect the viability of probiotics, especially Bifidobacterium. This study aimed to improve the acid tolerance of Bifidobacterium longum BBMN68 using adaptive evolution. The stress response, and genomic differences of the parental strain and the variant strain were compared by acid stress. The highest acid-resistant mutant strain (BBMN68m) was isolated from more than 100 asexual lines, which were adaptive to the acid stress for 10th, 20th, 30th, 40th, and 50th repeats, respectively. The variant strain showed a significant increase in acid tolerance under conditions of pH 2.5 for 2 h (from 7.92 to 4.44 log CFU/ml) compared with the wildtype strain (WT, from 7.87 to 0 log CFU/ml). The surface of the variant strain was also smoother. Comparative whole-genome analysis showed that the galactosyl transferase D gene (cpsD, bbmn68_1012), a key gene involved in exopolysaccharide (EPS) synthesis, was altered by two nucleotides in the mutant, causing alteration in amino acids, pI (from 8.94 to 9.19), and predicted protein structure. Meanwhile, cpsD expression and EPS production were also reduced in the variant strain (p < 0.05) compared with WT, and the exogenous WT-EPS in the variant strain reduced its acid-resistant ability. These results suggested EPS was related to acid responses of BBMN68.

프락토올리고당을 함유한 야콘 추출물의 비피더스균에 대한 잠재적인 프리바이오틱 효과

김수정(Su Jeong Kim),손황배(Hwang Bae Sohn),권빈(Bin Kwon),박명수(Myeong Soo Park),홍수영(Su Young Hong),남정환(Jeong Hwan Nam),서종택(Jong Taek Suh),이종남(Jong Nam Lee),김기덕(Ki Deog Kim),장동칠(Dong Chil Chang),김율호(Yul Ho Kim 한국식품과학회 2020 한국식품과학회지 Vol.52 No.2

본 연구에서는 야콘 덩이뿌리 추출물이 프로바이오틱스인 비피더스균과 락토바실러스균의 생장에 미치는 영향을 구명하고자 하였다. 야콘의 당함량을 HPLC로 분석한 결과, 생체 중 100 g 당프락토올리고당 함량이 7.60 g으로 가장 많았으며, 유리당은 수크로스가 0.72 g, 프럭토스 0.34 g, 글루코스 0.26 g 순의 함량을 보였다. 야콘 추출물이 장내 유산균 활성에 미치는 영향을 구명하기 위해 락토바실러스 3종(L. acidophilus AD031, L. plantarum BH02 and L. fermentum BH03)과 비피더스 3종(B. bifidum BGN4, B. longum BORI, B. lactis AD011) 등 6종을 대상으로 대조군과 야콘처리군 배지에서 유산균의 생장속도를 비교하였다. 락토바실러스 3종의 균주들은 대조군과 야콘처리군에서 대수기에 도달하는 시간이 비슷하였고, 생균수에서도 비슷하거나 감소하는 경향을 보였다. 하지만, 비피더스 3종의 경우 야콘처리군에서 모두 생장이 증가되었고, 특히, B. longum BORI 균주는 배양10시간 이후부터 대조군과의 확연한 차이를 나타냈다. 이와 같은 결과로, 야콘 추출물은 장내 유익균 중에서도 비피더스균에 특이적인 증식 효과를 보이며, 야콘의 프락토올리고당이 비피더스균 증식에 적합한 영양원임을 확인하였다. This study was conducted to investigate the potential prebiotic activity of an extract from yacon tuberous root on the growth of probiotic strains Bifidobacterium and Lactobacillus. Results showed that the amount of fructooligosaccharides per 100 g fresh root was the highest (7.60 g), followed by sucrose (0.72 g), fructose (0.34 g), and glucose (0.26 g). The in vitro culture test of intestinal beneficial bacteria, including Bifidobacterium longum BORI, B. bifidum BGN4, and B. lactis AD011 showed effective growth on the MRS-Yacon medium containing yacon extract, whereas the growth of Lactobacillus acidophilus AD031, L. plantarum BH02, and L. fermentum BH03 did not differ from that of the control groups. In particular, B. longum BORI showed better growth than the control group after 10 h of incubation. These results indicate that yacon can be a natural prebiotic source of fructooligosaccharides, which can exert a prebiotic effect on intestinal microflora by selectively enriching Bifidobacterium.

산소와 염농도가 한국전통 발효식품에서 생장하는 혐기성 세균과 Bifidus균의 생육에 미치는 영향

정은영,이진성,배재근,이완규,김병홍 한국산업미생물학회 1993 한국미생물·생명공학회지 Vol.21 No.1

한국 전통 발효식품의 숙성에 절대 혐기성 세균이 관여하는지를 보기 위해 김치류와 장류 14종의 시료를 복합 BL 배지 혹은 bifidus 세균 선택 배지인 BS agar에 접종하여 절대 혐기적으로 배양한 결과 복합 BL 배지에서 10^7∼10^8/g 시료의 세균이 생장하였으며, BS agar에서는 10^3∼10^6/g 시료의 colony가 형성되었다. 이들은 모두 호기성 조건에서도 생장할 수 있었으며, BS 배지에서 생장하는 세균은 fructose-6-phosphate phosphoketolase를 합성하지 않는 것으로 나타났다. 또한 표준 Bifidobacterium속 세균은 3% NaCl을 함유하는 배지에서는 생장할 수 없었다. 이상의 결과로부터 김치류와 장류 등 염 농도가 높은 발효식품에는 bifidus균은 생장할 수 없다고 판단된다. Fourteen samples of kimchies and soy bean pastes were used to isolate strictly anaerobic bacteria on complex BL agar and on a selective BS agar for bifidus bacteria. About 10^7∼10^8 colonies per g sample were developed on BL agar under strictly anaerobic conditions, while BS agar supported the growth of 10^3∼10^6 colonies per gram sample at the same condition. All colonies developed on BS agar at anaerobic conditions grew in aerobic conditions and did not show fructose-6-phosphate phosphoketolase activity. Type cultures of Bifidobacterium did not grow in PYG medium containing more than 3% NaCl. From these results it is concluded that salted fermented food cannot support the growth of strictly anaerobes including Bifidobacterium.