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Giang Huong Thi Luong,Byoungsu Yoon 한국응용곤충학회 2013 한국응용곤충학회 학술대회논문집 Vol.2013 No.10
Black queen cell virus (BQCV), one of the most prevalent viruse, causes the death of queen larvae and pupae. The RNA-dependent RNA polymerases (RdRPs) are central components in the life cycle of RNA viruses that catalyzes the replication of RNA from an RNA template without DNA stage. Inhibition of RdRP gene is importantly significant for application of monoclonal antibody generation as a diagnosis tool for identifying BQCV infection in honey bee..In this study, the presence of BQCV in honey bee samples was confirmed by PCR using BQCV F/R primer set to multiply of 700 bp DNA fragment. For ampification of BQCV Rdrp gene, a primer set attached BamHI/SalI restriction site was designed based on the best homogenization between BQCV RdRP sequences in NCBI, a PCR product containing BQCV RdRP gene with 1576 bp in length was amplified. Furthermore, BQCV RdRP gene will be cloned into pBlueXcm vector for future researches.
Loop-mediated Isothermal Amplification(LAMP) 법을 이용한 Kakugo Virus의 검출법 개발
이중구,윤병수 경기대학교 사회과학연구소 2012 경기대학교 기초과학논문집 Vol.25 No.1
Kakugo Virus(KV) is a picorna-like virus that was originally identified in the brains of aggressive but apparently healthy worker honeybees(Apis mellifera L.). A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay allows one-step detection of gene amplification without expensive equipment such as thermocycler. In this study, new LAMP method for the specific detection of KV in honeybee was developed (KV-LAMP). A set of four designed primers named KV-F3 / B3 / FIP / BIP that recognize KV sepcific sequence(GenBank, 250362.1). After optimization of conditions, KV-LAMP specific amplification was successfully performed using KV-LAMP from standard DNA sequence. KV-specific template was amplified under isothermal conditions at 59℃ within 60 minutes by KV-LAMP. The method could be detected KV from DNA clone at 1×102copies/㎕, also could be applied not only cDNA but also field samples. Especially, this method was developed direct detection by the naked eye using SYBR Green Ⅰ and Gene-Finder™ Nucleic acid fluorescent dye. In conclusion, KV-LAMP may be a useful method for the detection Kakugo Virus from the field. Kakugo Virus(KV)는 외관상으로는 건강하지만 공격적인 성향을 나타내는 일벌의 뇌에서 분리된 picorna virus 계열의 것이다. LAMP는 thermocycler 같은 고가의 장비없이도 유전 자를 증폭할 수 있는 등온증폭방법으로, 본 연구에서는 쉽고 빠르게 KV를 진단할 수 있는 KV-LAMP법을 개발하였다. KV의 특이적인 염기서열(GenBank, AB250362.1)에 근거한 KV-F3 / B3 / FIP / BIP, 4개의 primer를 사용하여 59℃의 등온조건하에서 60분간 정치하여 DNA가 성공적으로 증폭됨을 확인하였다. 1×102copies/㎕까지 증폭이 가능하며 실제 꿀벌에서도 검출가능함이 확인되었고, SYBR GreenⅠ과 Gene-Finder™ Nucleic acid fluorescent dye를 사용하여 전기영동 없이 육안으로 관찰할 수 있었다. 따라서 KV-LAMP 법을 통하여 KV를 신속하고 정확하게 검출함으로써 현장에서 유용하게 적용될 수 있을 것 으로 사료된다.
동일 상황의 검도경기에서 31인의 심판들 간 판정견해의 차이
박학진(Hak-Jin Park),윤병수(ByoungSu Yoon) 대한검도학회 2005 대한검도학회지 Vol.21 No.1
검도경기 중 여러 개별적 상황에 대하여 31명의 국내 최고 수준의 심판들의 판정 간 차이점과 다양성을 조사하였다. 이 분석을 위하여 추가적으로 31명의 심판들은 각 상황에 대하여 자신이 판정에 이르기까지의 과정을 정확하게 설명하였다. 결과로써, 검도경기 중 여러 선별된 상황들에 대하여, 같은 상황임에도 유의하게 다른 판정의견들이 있음이 발견되었다. 특히, 정면머리의 유효격자에 대하여 크게 다른 물리적 척도가 심판 간에 있음을 나타나게 되었고, 동일한 금지행위 및 벌칙 조항에 근거한 용인될 수 없는 상이한 판정이 있음이 발견되었다. 각기 다른 판정의 합리적 합의를 위하여 반대의견을 가진 각 심판진의 의견들이 논의되었다. On the same situations in Kumdo match, the variations of judgements among the 31 korean referees were investigated, who are all belong to one of best selection of korean referees. For this analysis referees exactly explained additionally a process of making his judgement on 19 individual situations in Kumdo match. As the results. on some selected situations in Kumdo match, significantly different opinions of judgements in same situation were found. Especially, it was revealed that there are much different physical measures on the valid strike (Yukv-datotsu) of the forehead (Men-bu) among the individual judgement. It was also found that there were unacceptably different judgements based on identical acts of prohibition and penalties. On each variation of judgement, both opinions of referee s group were discussed for the rational agreement.
검도경기 중 같은 상황에 대한 심판 간 판정의 차이에 관한 연구
박학진(Hak-Jin Park),윤병수(ByoungSu Yoon) 대한검도학회 2004 대한검도학회지 Vol.20 No.1
국문요약 검도경기 중 여러 개별적 상황에 대하여 10명 국내 심판들의 판정 간 차이점과 다양성을 조사하였다. 이 분석을 위하여 국내 최고 수준의 심판들이 선별되었으며, 10명의 심판들은 각 상황에 대하여 자신이 판정에 이르기까지의 과정을 정확하게 설명하였다. 결과로써, 검도경기 중 여러 선별된 상황들에 대하여, 같은 상황임에도 유의하게 다른 판정의견들이 있음이 발견되었다. 특히, 정면머리의 유효격자에 대하여 크게 다른 물리적 척도가 심판 간에 있음을 알게 되었고, 동일한 금지행위 및 벌칙 조항에 근거한 용인될 수 없는 상이한 판정이 있음을 발견하였다. 각기 다른 판정에 대하여 합리적 합의를 위하여 심판진의 양쪽 의견이 논의되었다. The differences and variations of judgements by the 10 korean referees on the some individual situations in Kumdo match were investigated. For this analysis ten referees exactly explained a process of making his judgement on each situation in Kumdo match, who are all belong to one of best group of korean referees. As the results, on some selected situations in Kumdo match, significantly different opinions of judgements in same situation were found. Especially, it was known that there are much different physical measures on the valid strikes(Yuko-datotsu) of the forehead(Men-bu) among referees. It was also found that there were unacceptably different judgements based on identical acts of prohibition and penalties. On each different judgement, both opinions of referee's group were discussed for the rational agreement.