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조홍범 ( Hong Bum Cho ),정순오 ( Soon Oh Jeung ),최용근 ( Yong Gun Choi ) 한국환경생물학회 2004 환경생물 : 환경생물학회지 Vol.22 No.1
동굴 내 정점별 세균 군집 구조를 분석하기 위하여 PCR amplified 16S rDNA denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)를 적용하였다. DGGE는 동일한 분자량을 갖는 dsDNA band라고 할지라도, 각각의 염기서열 차이에 따라 전기영동 상에서 고유한 band 양상을 나타낼 수 있다. eubacteria의 16S rDNA V3 region을 증폭하기 위해 GC341F와 PRUN518r을 primer로 사용하여 지하수내에 미생물 군집의 다양성과 유사성을 분석하였다. DGGE band양상을 통해 동굴내의 세균 군집 구조는 외부 환경에 비해 상대적으로 종다양성이 낮으며 동굴내에서 특이적으로 서식하는 종이 있음을 확인하였다. 또한 유기 영양물질의 공급이 제한되어 있는 동굴에서 구아노가 주요 유기 영양물질의 공급원으로서 큰 영향을 미치고 있는 것으로 파악되었다. DGGE상의 일부 band의 염기서열분석 결과 Pseudomonas sp. NZ060과 Pseudomonas pseudoalcaligenes, uncultured Variouorax sp,. soil bacterium NS7로 동정되었다. The bacterial community of water stream, soil and guano in Gossi cave was examined by using PCR amplified the 16S rDNA-denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE). In this study, the genetic diversity and the similarity of bacterial community between open area and non-open area for cave tour were investigated, and the seasonable variation pattern was compared each other. DGGE is attractive technique, as it separate same length dsDNA according to sequence variation typical 16S rDNA genes. The diversity and similarity of bacterial community in cave was analyzed by GC341f and PRUN518r primer sets for amplification of V3 region of eubacteria 16S rDNA. The specific DGGE band profile of the cave water gives the possibility that the specific bacterial cell can be adapting to the specific cave environment and living in the cave. The DGGE band profiles of all samples with guano were compared and analyzed by image analyzer, in which mutual band profile was compared to be and the band intensity of guano was the highest. From these result, it is thought that the guano was main nutrient source and influenced on the community structure of the cave environment where is nutritionally limited. Pseudomonas sp. NZ060, Pseudomonas pseudoalcaligenes, uncultured Variovorax sp. and soli bacterium NS7 were identified to be on some sample from analysing DNA sequence of some DGGE band.
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