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- 저자 : 차중익(Choong Ik Cha) (검색결과 32 건)
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시각신경 절단에 의한 조류망막내 미세아교세포의 변화에 대한 연구
전계선(Gye Sun Jeon),이 철(Cheol Lee),서제훈(Je Hoon Seo),강태천(Tae Cheon Kang),황덕호(Douk Ho Hwang),차중익(Choong Ik Cha),조사선(Sa Sun Cho) 대한해부학회 2000 Anatomy & Cell Biology Vol.33 No.3
신경조직이 손상을 받게되면 해당 신경세포의 퇴행성 변화와 함께 신경아교세포의 다양한 반응이 유발된다. 이중에서 도 astrocytic gliosis와 활동성미세아교세포 (activated microglia)의 출현이 잘 알려져 있으며 이와 같은 현상은 이들 세포와 체액성인자 (humoral factors) 등의 긴밀한 상호작용에 의하여 일어나는 것으로 알려져 있다. 망막은 중추신경계의 일부로서 세포학적 구성과 작용기전이 기본적으로 뇌와 동일하다. 특히 조류는 포유류와 달리 망 막내에 별아교세포 (astrocyte)가 존재하지 않으며 혈관이 분포하고 있지 않는 특이한 구조로 되어있으나 신경세포의 손상에 대한 미세아교세포의 반응양상이 아직 밝혀져 있지 않다. 따라서 이 연구에서는 성숙 메추리를 대상으로 안와 내로 접근하여 한쪽 시각신경을 절단한 후 시간의 경과에 따른 망막내 미세아교세포의 변화를 미세아교세포의 특이항체인 QH1 항체를 이용한 면역조직화학염색을 수행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 정상 망막에서는 미세아교세포가 긴돌기미세아교세포의 형태 (ramified form)로, 주로 속얼기층에 분포되어 있었고 일부 는 바깥얼기층에서도 관찰되었다. 또한 신경섬유층에서는 시신경유두 (optic head) 주변부에서만 관찰되었고 신경절세포층에서는 거의 관찰되지 않았다. 시각신경이 절단된 망막의 경우 미세아교세포의 형태가 점차 아메바형태 (amoeboid form)로 바뀌었고 세포의 분포는 주 로 신경섬유층 및 신경절세포층에 집중되었다. 이와같은 활성화된 미세아교세포는 시각신경절단 후 14일에 숫적 증가가 가장 뚜렷하였으나 수술 후 21일, 28일이 경과하면서 그 수는 점차 감소하기 시작하였다. 그러나 수술 후 2개월까지도 활성화된 미세아교세포가 남아 있었다. 이상의 연구결과는 신경세포 손상시에 일어나는 미세아교세포의 이주와 증식이 비혈관성 신경조직에서도 일어나는 것으로 보아 이 세포의 이주와 증식이 혈관분포와 무관함을 시사하는 것으로 사료된다. Retina, a part of CNS, has served valuable and accessible tissue for elucidating the cellular properties of neurons and glia due to its similarity to brain. Unlike mammalian counterpart, avian retina is devoid of vessels and astrocytes. However little is known about glial reaction to neuronal injuries in this species. Therefore, this study was performed to investigate the microglial responses in the quail retina following neuronal injuries. The retinae from normal and optic nerve transected adult quails were studied immunohistochemically with anti-QH1, a marker known to be specific for microglia. In the normal retina, QH1-labeled microglial cells displayed typical feature of ramified (resting) form and were localized mainly in the inner plexiform layer. After optic nerve transection (ONT) morphology of microglial cells changed from the ramified to the amoeboid form. This feature of microglial cells maintained throughout the post operational periods until 28 days after ONT. Particularly, at 14 and 21 days after ONT amoeboid microglia displayed cell bodies with stout and bushy processes, suggesting active phagocytosis. The distribution pattern of microglia also changed in accord to ganglion cell degeneration: they gradually moved to layers of ganglion cells and optic nerve fibers where ganglion cell bodies and axons were under degeneration. This change of microglial distribution was most prominent at 14 days of ONT. The result of this study is generally consistent with that reported in mammalian counterpart and this similarity between the avascular avian retina and the vascularized mammalian counterpart suggests that processes of microglial activation, such as migration and phagocytosis, can occur in the vessel-free CNS tissue.
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노화된 흰쥐 대뇌겉질에서 NOS 신경세포의 분포에 관한 면역세포화학적 연구
정윤희(Yoon Hee Chung),신정민(Chung Min Shin),이왕재(Wang Jae Lee),황덕호(Douk Ho Hwang),이병란(Byung Lan Lee),조사선(Sa Sun Cho),백상호(Sang Ho Baik),차중익(Choong Ik Cha) 대한해부학회 1999 Anatomy & Cell Biology Vol.32 No.4
Nitric oxide (NO)는 생체 내에서 수많은 생리과정에 관여하며 특히 중추신경계통에서는 신경전달물질로서 synaptic plasticity와 밀접한 관련이 있다고 알려졌다. 노화 흰쥐에서는 NO의 생성이 감소했음을 시사하는 연구들이 있지만 NO를 생성하는 세포의 노화에 따르는 형태학적 연구는 미흡한 상태이다. 본 연구에서는 노화군 흰쥐와 대조군 흰쥐의 대뇌겉질 및 해마의 각 영역에서 nitric oxide synthase (NOS) 신경세포의 분포와 형태 양상을 면역세포화학 방법과 in situ hybridization 방법을 이용하여 조사하였는데 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 대조군 흰쥐와 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포들은 대뇌겉질 및 해마의 전 영역에 고르게 분포되어 있었다. 2. 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포의 가지돌기는 가지치기 양상이 많이 감소했으며 길이도 짧아졌다. 3. 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포의 수가 유의하게 감소되어 있었는데 부위별로 달랐다. 그 중 50% 이상 감소된 부위는 띠겉질 (cingulate cortex), 마루엽겉질 1영역 (parietal cortex area 1), 관자엽겉질 2, 3영역 (temporal cortex area 2, 3), 뒤통수엽겉질 2영역의 내측 부분 (medial part of occipital cortex area 2), 뒤통수엽겉질 1영역의 monocular와 binocular 부분 (monocular and binocular of occipital cortex area 1), 속후각겉질 (entorhinal cortex), 해마 (hippocampus proper), 치아이랑 (dentate gyrus), subiculum 등이다. 4. 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포는 대조군보다 염색성이 감소되었다. 5. In situ hybridization 방법에 의하면 노화군 흰쥐에서 NOS mRNA 양성세포의 수가 대조군 흰쥐보다 감소하였다. 이상의 소견으로 미루어 볼 때 노화에 따라 NOS 신경세포 수는 감소한다는 형태학적 증거를 파악하였고 이에 따라 NO 의 생성도 감소함으로써 학습과 기억 능력의 감퇴가 수반되는 노화의 한 현상을 설명할 수 있는 일부 원인이 될 수 있으리라고 추정된다. Nitric oxide (NO) involvement has been demonstrated in mechanisms of synaptic plasticity, particularly in hippocampal long-term potentiation, a mechanism that underlies certain forms of learning and memory. Further, NO has been shown to regulate various neurotransmitters which play an important role in learning and memory. Several findings suggest that NO production may be decreased in the aged rat. Changes in the nNOS-containing neurons with aging were demonstrated by immunocytochemistry and in situ hybridization. NOS-immunoreactive cells in aged rats were present in all cortical areas and the hippocampus, and the pattern of distribution was similar to that of the control group. The number of NOS-immunoreactive cells in the cerebral cortex was significantly decreased in the aged rats, but the extent of changes was variable in each area, and ranged from mild decrease (<30%) to severe decrease (>50%). Severely decreased areas were the cingulate cortex, parietal cortex area 1, temporal cortex area 1, 2, 3, medial part of occipital cortex area 2, monocular and binocular part of occipital cortex area 1, entorhinal cortex, hippocampus proper, dentate gyrus and subiculum. Moderately decreased areas (30~50%) were frontal cortex area 1, 2, 3, parietal cortex area 2, forelimb, hindlimb, lateral part of occipital cortex area 2. Slightly decreased area was insular cortex. Morphologically, the number of dendritic branches seemed to be decreased in aged group and the length of dendrites of NOS-IR neurons showed a tendency to shorten. These results indicate the involvement of neuronal system containing NOS in the aging brain, and provide the first morphological evidence for the loss of NOS neurons in the cerebral cortex of the aged rats by immunocytochemistry. Further multidisciplinary investigations involving normal aging and neurodegenerative disease such as Alzheimer’s disease are needed to clarify the importance of nitric oxide changes in the cerebral cortex with aging.
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생쥐 소뇌의 생후 발육에 따른 carbonic anhydrase II 출현에 대한 면역조직화학적 연구
윤창호(Chang Ho Yoon),전계선(Gye Sun Jeon),이 철(Cheol Lee),서제훈(Je Hoon Seo),강태천(Tae Cheon Kang),박경한(Kyeong Han Park),차중익(Choong Ik Cha),백상호(Sang Ho Baik),조사선(Sa Sun Cho) 대한해부학회 1999 Anatomy & Cell Biology Vol.32 No.4
생쥐 소뇌의 생후발육과정 중에 희소돌기아교세포에 나타나는 carbonic anhydrase II (CA-II)의 출현정도와 말이집형성을 서로 비교관찰함으로써 희소돌기아교세포에서 CA-II의 기능을 규명하고자 신생, 1주령, 2주령, 3주령, 4주령 및 5주령 생쥐를 대상으로 하여 희소돌기아교세포의 표지물질인 CA-II를 이용하여 면역조직화학염색과 말이집염색을 수행한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. CA-II에 대한 면역염색결과 CA-II에 양성반응을 보인 희소돌기아교세포는 2주령의 소뇌에서 처음 관찰되었으며 그 반응성은 점차 증가되어 3주령과 5주령에서 보다 강한 반응이 관찰되었다. 희소돌기아교세포의 분포는 백색질 부위에서 점차과립세포층 및 조롱박세포층으로 이주해 가는 양상으로 관찰되었다. Mordant-dye를 이용하여 말이집염색을 수행한 결과 2주령부터 약한 염색성을 관찰할 수 있었으며 연령이 증가할수록 점 차 염색성이 증가되었다. 말이집염색은 주로 소뇌 백색질의 전반에 걸쳐 관찰되었으며, 연령에 따른 염색부위의 차이는 관찰되지 않았다. 이와 같은 결과는 생쥐 희소돌기아교세포에서의 CA-II의 기능이 말이집형성과 매우 밀접한 연관성이 있음을 시사하는 것으로 사료된다. The carbonic anhydrase II (CA-II) is specifically expressed in oligodendrocytes, the cells responsible for myelination in the central nervous system. However no direct evidence on relationship between myelin formation and CA-II immunoreactivity has been described. The aims of these studies are to investigate the relationship between CA-II and myelination during cerebellar development of mouse. Myelin staining was found on postnatal (P) 14, and its intensity increased in proportion to developmental age. CA-II positive oligodendrocytes were observed in the white matter of cerebellum on P 14 day. CA-II positive oligodendrocytes also occured in the granular layer and Purkinje cell layers in the later stage of dvelopment. The parallel development in the CA-II expression and myelination during development suggests that CA-II in oligoendrocyte play a role to myelination.
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김종민(Jong-Min Kim),정윤희(Yoon Hee Chung),신정민(Chung Min Shin),박경한(Kyeong Han Park),조사선(Sa Sun Cho),백상호(Sang Ho Baik),차중익(Choong Ik Cha) 대한해부학회 1999 Anatomy & Cell Biology Vol.32 No.4
The pattern of distribution in rat spinal cord and changing pattern during normal aging of c-Fos, Bcl-2, Bax, and p53 expression were investigated by immunohistochemical staining. Male Sprague-Dawley rats at the age of one week, five months, and two years were studied. C-Fos immunoreactivity was observed diffusely in gray matters in neonatal rats, preferentially located in deep dorsal horn and around central canal. Compared with those of neonatal rats, immunoreactive cells decreased prominently in adult rats. In aged rats, these cells were not seen in any segments. In a transverse section, spatial expression of Bcl-2 and Bax proteins showed a diffuse distribution pattern with immunoreactivity more prominent in the anterior horn. Continuing expression of these proteins was shown in each age group. In adult rats, Bcl-2 immunoreactivity was decreased drastically compared to that of neonatal rats. The immunoreactivity was higher in aged than in adult rats, but the number of immunoreactive cells was not different between aged and neonatal rats. The number of Bax-immunoreactive cells was greater in adult than in neonatal rats; in aged rats, it was similar with that of adult rats. The spinal cords of neonatal rats were not p53-immunoreactive, though p53-positive cells were detected in all segments of adult spinal cord. P53-positive cells were stained along the cellular margin, with a pale central portion. The pattern of p53 immunoreactivity in adult and aged rats was similar; the number of p53- positive cells, however, was higher in aged rats than in adult. In conclusion, we demonstrated that the expression patterns of c-Fos, Bcl-2, Bax, and p53 proteins in rat spinal cord change during normal aging for the first time. 세포사의 한 형태로서 다양한 생리적 혹은 병적 상황에서 일어나는 아포프토시스의 기전을 이해하기 위해 최근 많은 연 구가 이루어져 왔다. 최근에는 신경계통에서 손상에 대해 보이는 반응과 그리고 다양한 퇴행성 질환 (예: 근위축성 측삭 경화증)에서 주된 세포사의 경로로서 생각되고 있다. 이러한 과정에서 중요한 역할을 할 것으로 생각되는 c-fos, Bcl-2, Bax, p53 유전자가 척수에서 단백질로 발현되는 양상과 노화에 따르는 그 변화 양상을 규명하기 위해 본 연구를 수행하였다. c-Fos 면역염색성 세포는 생후 1주된 쥐에서는 척수의 회색질에 미만성의 분포 양상을 보였다. 이 세포들은 핵에 국한되 어 둥글게 염색되었다. 5개월된 쥐에서는 c-Fos 면역염색성 세포가 많이 감소하였으며 24개월된 쥐에서는 발견되지 않았다. Bcl-2 면역염색성 세포는 척수 회색질에서 미만성의 분포를 보였으나 라미나 VIII과 IX에서 더 뚜렷한 양상이었다. 세포 는 중앙 부위는 염색이 되지 않고 변연부를 따라서 염색되는 특징이 있었다. 5개월된 쥐에서는 Bcl-2 면역염색성 세포가 감소하였으며 24개월된 쥐에서는 Bcl-2 면역염색성 세포는 다시 증가하는 양상을 보였다. Bax 면역염색성 세포의 분포 양상은 Bcl-2 면역염색성 세포와 유사하였다. 그러나 Bax 면역염색성 세포의 수가 훨씬 많았다. 세포질이 풍부하고 큰 다각형의 세포 혹은 크기는 더 작고 별모양인 세포들이 1주된 쥐의 횡단 조직에서 미만성의 분포를 보였다. 5개월된 쥐에서는 Bax 면역염색성 세포의 수가 더 증가하였고 24개월된 쥐에서는 5개월과 유사하였다. p53 면역염색성 세포는 1주된 쥐에서는 발견되지 않았고 5개월된 쥐와 24개월된 쥐에서 노화에 따라 증가하는 양상을 보 였다. Bcl-2 면역염색성 세포와 유사하게 중앙 부위는 염색이 되지않고 변연부를 따라서 염색되는 특징이 있었다. 이 결과로 흰쥐 척수에서 c-fos, Bcl-2, Bax, p53 유전자의 발현이 연령 증가에 따른 일정 형태를 보인다는 것을 알 수 있다. 이 유전자의 산물들이 노화에 따라 변화하는 양상을 보인다는 사실은 아포프토시스가 신경계통의 발생과 노화 과정에서 작용하고 있다는 한 증거가 된다. 이러한 형태학적 자료는 세포사 기전에서 노화와 연관된 변화를 연구하거나, 혹은 근위축성 측삭 경화증과 같은 신경퇴행성질환의 연구에서 기초 지식으로서 활용될 수 있을 것이다.
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