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인체 대장암 세포주 SW480에서 docosahexaenoic acid에 의한 침윤억제 기전
Soyeon Shin(신소연),Yong-Jo Kim(김용조),Kyoung-Sub Song(송경섭),Kaipeng Jing,Nayeong Kim(김나영),Soyeon Jeong(정소연),Ji-Hoon Park(박지훈),Kang-Sik Seo(서강식),Jun-Young Heo(허준영),Hyun-Joo Kwon(권현주),Jong-Il Park(박종일),Seung 한국생명과학회 2010 생명과학회지 Vol.20 No.4
대장암은 미국 등 서양 국가뿐만 아니라 국내에서도 2번째로 많이 발병이 되는 암으로 알려져 있다. 역학조사에 의하면 ω3-PUFAs를 많이 섭취한 인종에서 대장암 발생빈도가 감소하고 최근 ω3-PUFAs는 수종의 암에 대해 항암작용을 나타낸다고 한다. 이에 본 연구에서는 대장암에서 DHA 등 ω3-PUFA의 항침윤 기전을 규명하여 다음과 같은 결과를 얻었다. DHA 및 EPA는 대장암 세포주 SW480의 증식을 농도 의존적으로 억제하였으나 AA는 거의 영향이 없었으며 TUNEL assay로 apoptotic cell death가 확인 되었다. DHA는 β-catenin 단백 및 TCF/LEF luciferase 활성을 농도 의존적으로 억제 하였다. SW480 세포의 침윤능은 DHA의 농도에 의존적으로 억제되었다. DHA처리 후 MMP-9 및 MMP-2 mRNA양이 감소되었을 뿐만 아니라 그 promoter의 reporter 활성도 억제되었다. NF-kB 및 p-IkB 단백짙양도 DHA의 처리농도에 의존적으로 감소하였으며 NF-kB promoter의 활성도 억제되었다. 이상의 결과로 ω3-PUFA는 대장암에서 NF-kB 신호전달 차단에 의한 MMP-2 및 MMP-9 발현을 억제하여 침윤을 억제하여 항암작용을 나타낼 수 있음을 시사하며, 따라서 ω3-PUFA는 대장암의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있으리라 생각된다. Colon cancer is one of the most common malignancies in the western world and the second leading cause of cancer death in Korea. Epidemiology studies have shown a reduced incidence of colon cancer among populations consuming a large quantity of ω3-polyunsaturated fatty acids (ω3-PUFA) of marine origin. Recently, it has been found that ω3-PUFA has an antineoplastic effect in several cancers. This study was designed to investigate the mechanism of the anti-invasive effect of ω3-PUFA in colon cancer. ω3-PUFA, docosahexaenoic acids (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA) treatment resulted in a dose-dependent inhibition of cell growth in SW480 human colon cancer cells. In contrast, arachidonic acid (AA), a ω6-PUFA, exhibited no significant effect. This action likely involves apoptosis, given that DHA treatment increased apoptotic cells in TUNEL assay. Moreover, invasiveness of SW480 cells was inhibited following treatment of DHA in a dose-dependent manner; in contrast, AA had no effect. The levels of MMP-9 and MMP-2 mRNA decreased after DHA pretreatment. MMP-9 and MMP-2 promoter activities were also inhibited by DHA treatment. The levels of NF-kB and p-IkB protein were down-regulated by DHA pretreatment in a dose dependent manner. In addition, DHA inhibited NF-kB promoter reporter activities. These findings suggest that ω3-PUFA may inhibit cancer cell invasion by inhibition of MMPs via reduction of NF-kB in colon cancer. In conclusion, ω3-PUFA could be used for chemoprevention and treatment of human colon cancer.
HPLC-ELSD와 LC/MS를 활용한 건강기능식품 중 글루콘산철 최적 분석법 확립 및 검증
박영주(Yeongju Park),정소연(Soyeon Jeong),서현지(Hyunji Seo),이지현(Jihyun Lee),이찬(Chan Lee),서희재(Hee-Jae Suh) 한국식품영양과학회 2021 한국식품영양과학회지 Vol.50 No.8
본 연구는 국내에서 식품첨가물로 사용되는 산도조절제 글루콘산철(ferrous gluconate)의 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 이용한 분석법 개발 및 이에 대한 타당성을 검증하기 위해 진행되었다. 글루콘산철의 정량을 위해 증기화 광산란 검출기(Evaporative Light Scattering Detector, ELSD), 역상분배형 컬럼(HyperClone<SUP>TM</SUP> ODS column)을 사용하였으며, 이동상은 1.3% 트리플루오로아세트산과 아세토니트릴을 이용하였다. 개발된 분석법의 직선성은 결정계수(R²)가 0.999로 우수하였고, 검출한계는 12.8 μg/mL, 정량한계는 38.9 μg/mL로 나타났다. 정확도는 일내분석에서 95.6~101.5%와 일간분석에서 98.6~103.1%로 나타났으며, 정밀도는 일내분석과 일간분석에서 각각 1.5~2.6%와 0.7~2.9%로 나타났다. 또한, 건강기능식품을 시료로 분석한 측정불확도는 954.7 μg/mL 농도에 대해 확장불확도가 27.73μg/mL로 산출되어 약 3%의 측정불확도 값이 산출되었다. 이 분석법 검증 결과는 유럽연합 집행위원회(European Commission, EC) 및 국제표준화기구(International Organization for Standardization, ISO)의 기준을 모두 충족시키는 결과였다. Ferrous gluconate has been used in Korea, the United States, Japan, and the European Union to control the acidity in foods. We optimized an analytical method to determine the levels of ferrous gluconate in foods by a high-performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector (HPLC-ELSD) and an ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry (UPLC-MS). The linearity of the developed analysis method using HPLC was excellent with a coefficient of determination (R²) of 0.999 obtained from calibration curve, and limits of detection and quantitation were 12.8 μg/mL and 38.9 μg/mL, respectively. In intra-day and inter-day analysis, the accuracy was 95.6∼101.5% and 98.6∼103.1%, respectively, and the precision was 1.5∼2.6% and 0.7∼2.9%, respectively. The measurement uncertainty of analyzing the health functional food samples was within 3%, and the verification results of all analytical methods met the standards of the European Commission (EC). UPLC-MS was also used to confirm ferrous gluconate. As a result, the field applicability of the ferrous gluconate analytical method developed in this study was confirmed.