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고사리 열수 추출물로부터 보체계 활성화 산성 다당의 분리 및 특성
오병미,권미향,나경수 한국식품영양학회 1994 韓國食品營養學會誌 Vol.7 No.3
고사리 열수 추출물로부터 보체계 활성화 산성 다당을 분리하였다. 열수 추출물의 메탄올 환류, 에탄올 침전, 투석 및 동결건조를 통하여 조다당획분인 HPA-1을 분리하였다. HPA-1은 총당 81.80%, 산성당 30.40%, 단백질 15.60%를 함유하였으며, 주요 구성당으로서 rhamnose, galactose, galacturonic acid, glucuronic acid등이 포함되어 있었다. HPA-1을 cetavlon(cethyltrimethyl ammonium bromide)처리에 의해 HPA-2, 3, 4, 5의 획분들로 분리하였으며, 활성과 수율이 가장 높았던 HPA-2로부터 DEAE-Sepharose CL-6B 이온교환 및 Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B, Sepharose CL-4B 겔여과 크로마토그라피를 통하여 두 개의 주요 활성 다당체인 HPA-2-Ⅳa와 HPA-2-Ⅴa-2를 정제하였다. 이 다당들은 HPLC에서 단일 획분으로 확인되었으며 분자량은 각각 500,000과 560,000으로 측정되었다. HPA-2-Ⅳa는 총당 81.63%, 산성당 31.61%로 구성되었으며 fucose, galacturonic acid, glucuronic acid를 1.40:0.97:1.88의 몰비율로 함유하였다. HPA-2-Ⅴa-2는 주요 구성당으로서 rhamnose, galactose, galacturonic acid를 1.00: 1.38: 139의 몰비율로 함유하였다. 이 다당들의 Ca^2+존재 유무시의 황보체 활성 측정과 교차면역 전기영동 결과, 고전경로(classical pathway)와 부경로(alternative pathway)를 통한 보체계 활성화함에 관여함을 알 수 있었다. From the hot water extract of bracken (Pteridium aquilinum var. latiusculum), a Korean wild edible plant, anti-complementary acidic polysaccharldes were isolated. Crude polysaccharide fraction(HPA-1) was obtained by methanol reflux, ethanol precipitation, dialysis, and lyophilization. HPA-1 contained 81.80% of total sugar, 30.40% of uronic acid, and 15.60% of protein. HPA-1 was purified consecutively by cetavlon fractionation and chromatography including ion exchange with DEAE-Sepharose CL-6B and gel permeation with Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B. HPA-2-Ⅳa and HPA-2-Ⅴa-2 were nearly homogeneous on HPLC and had 500,000 and 560,000 daltons of molecular weights, respectively. HPA-2-Ⅳa consisted of fucose, galacturonic acid, and glucuronic acid at the molar ratio of 1.40:0.97:1.88. HPA-2-Ⅴa-2 was composed of rhamnose, galactose, and galacturonic acid at the molar ratio of 1.00 : 1.38 : 1.39. The polysaccharides were found to activate the C3 component both in the presence and in the absence of Ca^2+ through the crossed-immunoelectrophoresis suggesting that those involved in both classical and alternative complement pathway.
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