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- 저자 : 염광섭(Kwang-Sup Yum) (검색결과 4 건)
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Ehrlich 암세포를 이식한 흰생쥐의 가슴샘 겉질의조직상에 미치는 항암제의 영향
박경호(Kyung-Ho Park),염광섭(Kwang-Sup Yum),고정식(Jeong-Sik Ko),안의태(E-Tay Ahn),김진국(Jin-Gook Kim) 대한해부학회 2002 Anatomy & Cell Biology Vol.35 No.1
Acriflavine은 핵소체와 세포질에서의 단백질 합성을 저해하며, guanosine은 다른 항암제들과 함께 투여하면 항암 효과 가 증진된다고 한다. 특히 acriflavine과 guanosine을 함께 사용하면 acriflavine을 단독 사용했을 때에 비하여 일반세포에 대한 세포독성은 약화되고 항암효과는 높아진다고 한다. 본 실험에서는 Ehrlich 암세포를 이식한 후 실험적 종양을 치료할 때 사용하는 항암제 가운데 대표적으로 많이 사용되 고 있는 대사길항제인 5-fluorouracil과 새로이 개발되어 항암효과는 높으나 세포독성이 적다는 acriflavine-guanosine복합제(AG60)가 면역계통의 중심기관인 가슴샘에 미치는 영향을 형태학적으로 비교 연구하고자 했다. 실험동물은 ICR 흰생쥐로서 체중 20 g 내외의 동물을 사용하였다. 각 동물의 샅부위 피하에 Ehrlich 암세포 1×107개를 이식하고, 다음날부터 격일 간격으로 생리식염수 (10 ml/kg)를 투여한 대조군과 실험군별로 5-fluorouracil (30 mg/kg)과 AG60 (30 mg/kg)을 각각 피하 주사하되 약물을 7회 투여한 후 다음날 동물을 희생시켰다. 각 동물의 가슴샘은 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde액에 1차 고정하고, osmium tetroxide액으로 2차 고정하였다. 수세와 탈수과정을 거쳐 araldite혼합액에 포매하였고, 1 μm 절편을 만들어 toluidine blue로 염색하여 광학현미경으로 비교 관찰하였으며, 적정부위를 택하여 미세절편을 작성한 다음 uranyl acetate와 lead citrate액으로 염색한 후 전자현미경으로 관찰하였다.광학현미경적 관찰에서 AG60투여군의 경우는 가슴샘겉질의 구조가 암세포만 이식한 대조군의 것과 유사하였으나 5- fluorouracil 투여군의 경우는 가슴샘의 겉질부분에 분포하는 가슴샘세포의 수가 적었기 때문에 상피세망세포의 영역이 넓어져서 밝게 보였다. 전자현미경적 관찰에서 대조군과 AG60투여군의 경우에는 가슴샘세포가 상피세망세포의 세포질돌기에 싸여 있었으며 유사분열하는 모습을 보이는 등 별다른 차이가 없었다. 그러나 5-fluorouracil 투여군의 경우에는 가슴샘세포들이 상피세망세포로부터 분리되어 있는 것이 자주 관찰되었는데 상피세망세포로부터 분리된 가슴샘세포의 표면에는 미세융모들이 돋아있었다. 그러나 부위에 따라서는 가슴샘세포가 없이 상피세망세포로만 이루어진 부위도 있었다. 이상의 결과로 보아 Ehrlich암세포를 이식시킨 흰생쥐에 5-fluorouracil을 투여하면 가슴샘겉질의 가슴샘세포가 급격히 감소하고, 상피세망세포에 손상을 주는 등 가슴샘조직이 빨리 퇴화되어, T 림프구의 성숙과 분화에 지장을 초래하여 면역기능이 약화된다고 생각된다. 그러나 acriflavine-guanosine 복합제인 AG60을 투여하면 가슴샘조직에 손상을 입히지 않아서, AG60투여가 생체의 면역기능을 약화시키지는 않는 것으로 생각된다. In cancer therapy, immunological disorder is one of most severe problem. Since thymic cortex is the home of T-cell proliferation and “education”, thymic morphology following administration of certain drugs can be used as a parameter of immunological safety of the drug. In this study, morphology of thymic cortex, following administration of 5-fluorouracil or AG60, was studied. AG60 is a newly developed anti-cancer remedy, the compound of acriflavine and guanosine (1 : 1). ICR mice were subcutaneously inoculated with Ehrlich carcinoma cells (107 cells/mouse) in their inguinal areas. Each mouse in 5-fluorouracil group was injected subcutaneously with a single dose of 30 mg/kg of 5-fluorouracil every other day, and the mouse in AG60 group, with 30 mg/kg of AG60 (Taerim Pharm. Co., Seoul) every other day. The control mouse was injected with saline. The mice were sacrificed on the day after 7th injection. Tissues of thymic cortices were fixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solution (0.1 M Millonig’s phosphate buffer, pH 7.3), and refixed in 2% osmium tetroxide solution (0.1 M Millonig’s phosphate buffer, pH 7.3). Tissue blocks were dehydrated, and were embedded in araldite mixture. For the overview-comparison, semithin sections stained with toluidine blue solution were photographed. And the typical portions were cut with ultratome, stained and observed with electron microscope. In light microscopy, thymic cortical morphology of AG60-injected mouse was similar with that of control mouse. But the cortical morphology of 5-fluorouracil-injected mouse was impressively different from those of the control or AG60 group mice. Thymocytes in the thymic cortex of 5-fluorouracil-injected mice were severely depleted. In electron microscopy, thymocytes in the thymic cortices of the control or AG60 group mice were crowded, and small groups of thymocytes were surrounded by the cytoplasmic processes of epithelial reticular cells. Mitotic figures were randomly seen. Thymocytes of 5-fluorouracil-injected mouse were naked out from the epithelial reticular cells, and were completely depleted out from the cortex composed mainly of enlarged epithelial reticular cells. Numerousmicrovilli were protruded from the naked thymocytes. The results were interpreted as that 5-fluorouracil induce leukopenia, and homing of lymphocytes to thymic cortex is severely depressed. 5-fluorouracil also disturb the normal protective and supportive function of epithelial reticular cells for thymocytes. Whereas the complex of acriflavine-guanosine compound (AG60) is immunologically safe, as seen in thymic cortical morphology.
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중금속물질이 마우스 신장 근위곱슬세관의 미세구조에 미치는 영향
염광섭,박경호,양남길,안의태,고정식 순천향의학연구소 1995 Journal of Soonchunhyang Medical Science Vol.1 No.2
본 실험은 중금속 물질이 마우스 신장 근위요세관의 미세구조에 미치는 영향을 알아보기 시행하였다. 체중 20-25 g의 숫생쥐를 실험동물로 사용하였으며, 대조군과 중금속 투여군으로 나누었다. 중금속 투여군은 투여 량과 종류에 따라 염화제이수은(HgCl₂)투여군 (2mg, 5mg, 10mg/kg/BW)과 중크롬산칼륨(K₂Cr₂O7)투여군 (5mg, 10mg, 20mg/kg/BW)으로 나누어, 중금속 투여 후 6시간, 3일 및 2주 후에 도살하여 조직을 절취하였다. 중금속투여는 마우스의 등 쪽에 피하주사 하였다. 절취한 신장은 2.5% glutaraldehyde- 1.5% paraformaldehyde액으로 일차고정한 후, 1% osmium tetroxide액에 이차고정하였으며, 고정이 끝난 조직은 acohol과 acetone으로 탈수한 후 araldite 혼합액에 포매하였다. 포매된 조직은 LKB-V ultratome으로 60-70 nm 두께의 얇은 절편을 작성하여 uranyl acetate와 lead citrate액으로 염색한 후 JEM 100CX-Ⅱ전자 현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 염화제이수은은 근위곧은세관에 먼저 영향을 주며, 중크롬산칼륨은 근위곱슬세관에 영향을 준다 2. 중금속이 신장의 근위요세관에 미치는 영향은 중금속의 투여량과 시간에 비례하는 변화를 보였다 3. 중금속은 세포의 막성구조들에 영향을 주어 기능을 저하시켜, 상피의 탈락을 일으켰으나, 시일이 경과하면 정상 상태로 복귀한다. 4. 근위요세관의 변화는 1) 미세융모는 수적 감소, 2) 다양한 크기의 세포질 내 액포형성, 3) 사립체의 변화 , 4) 무과립형질내세망의 증가, 5) 세포기저부와 옆면 세포사이간극의 확장 및 상피의 탈락, 6) 근위요세관의 상피재생의 순서로 일어난다. This experiment was performed to study the morphological changes of the proximal convoluted tubule of mice following subcutaneous injection of heavy metallic agents. Male mice were divided into normal and experimental groups. The mice were subcutaneous injected with HgCl₂(2mg, 5mg and 10mg/Kg/BW) and K₂Cr₂O7(5mg, 10mg and 20mg/kg/BW). Animals were sacrificed on 6 hours, 3 days and 14 days after the injections. Kidney were fixed in the 2.5% glutaraldehyde - 1.5% paraformaldehyde solution, followed by refixation in the 1% osmium tetroxide solution. Dehydrated blocks were embedded in araldite mixture. The sections were cut on a LKB V ultratome, and ultrathin sections stained with uranyl acetate and lead citrate were observed with JEM 100CX Ii electron microscope. The results were as follow: 1. Mercury chloride causes selective damage of straight portion of proximal tubule in the mouse kidney. 2. Potassium dichromate selectively affects the cells of the convoluted portion of the proximal tubule. 3. Tubular damage is greater at higher dose levels and at longer time intervals. 4. The sequence of progressive changes leading to nephron damage are : 1) swelling and loss of microvilli; 2) formation of vacuoles of varied sizes; 3) mitochondrial changes and accumulation of rough endoplsmic reticulum; 4) dilation of basolateral intercellular space followed by desquamation; and 5) regeneration of proximal tubular cell.
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