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Expression of Id-1 Gene in Mouse Uterus
나희영,홍석호,이지윤,채희동,강병문,김정훈,Nah, Hee-Young,Hong, Seok-Ho,Lee, Ji-Yoon,Chae, Hee-Dong,Kang, Byung-Moon,Kim, Chung-Hoon The Korean Society for Reproductive Medicine 2003 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.30 No.2
연구 목적: Microarray data에 의해 밝혀진 생쥐자궁에서의 Id 유전자의 hormonal effect와 implantation process 동안의 관계를 조사하고자 실험을 수행하였다. 연구재료 및 방법: 난소절제한 생쥐에 estrogen을 주사하고 6시간, 12시간이 지난 후 자궁을 적출하여 두 가지 방법으로 sample을 준비하였다. 먼저 자궁전체의 RNA를 추출하여 실험하거나 laser capture microdissection (LCM) 방법으로 자궁내막상피세포, 자궁기질세포, 자궁근육층으로 분리하여 RNA를 추출하고 semi-quantative RT-PCR을 수행하여 Id 유전자의 발현을 조사하였다. 임신 4.5일째 생쥐에 Chicago blue dye를 주사하여 착상부위와 비착상부위를 분리하고 RNA를 추출하여 Id 유전자의 발현을 semiquantitative RT-PCR 방법으로 실험하였다. 결 과: Estrogen을 처리한 난소절제된 생쥐 자궁에서의 cDNA microarray 자료에서 Id-1 mRNA는 점진적으로 두 배 이상 증가하였고 Id-2 mNRA는 반대로 시간이 지날수록 두 배 이상 감소하였다. Microarray 자료를 재확인하기 위해 semi-quantitative RT-PCR을 이용하여 실험하였고, 그 결과 Id-1 유전자는 estrogen 처리 6시간까지는 큰 변화가 없었으나 12시간에서는 4배 이상의 높은 발현을 보였으며, Id-2 mRNA의 발현은 estrogen 처리 6시간과 12시간 모두에서 대조군에 비해 4배 가량 감소하였다. 이 실험군을 LCM을 이용하여 자궁내막상피세포, 자궁기질세포, 자궁근육층을 각각 분리하여 실험한 결과 estrogen 처리군에서 Id-1의 발현은 자궁내막상피세포에서만 높은 발현을 보였으며, estrogen 처리 6시간과 12시간에는 큰 차이를 보이지 않았다. 그러나, Id-2 mRNA는 자궁내막상피세포에서 estrogen 처리 6, 12시간 모두에서 높은 발현을 보였고, 근육세포층에서는 estrogen 처리 6시간에서는 변화가 거의 없었으나 12시간에는 현저하게 증가하였다. 단, 자궁기질세포에서는 대조군에 비해 estrogen 6, 12시간에서 Id-2 mRNA의 발현이 감소하였다. 임신한 생쥐 자궁의 착상부위에서는 Id-1 mNRA의 발현은 비착상부 위보다 월등하게 높은 증가를 보였다. 결 론: 난소절제 생쥐를 이용한 실험에서 Id-1, -3는 estrogen에 의해 발현이 증가하고, Id-2는 발현이 감소하였다. LCM을 이용한 실험에서는 Id-2는 이와는 달리 부위별 발현양상은 다르게 나타났지만 이는 넓은 부위를 차지하는 자궁기질에서의 발현감소가 전체적인 Id-2의 발현양상으로 나타난 것으로 추측된다. 착상부위에서의 Id의 발현은 Id-1만이 유일하게 월등한 증가를 보였다. 위의 결과를 종합해 볼 때 생쥐 자궁에서 Id 유전자는 estrogen에 의해 조절되며 직, 간접적으로 착상시기에 다양한 작용을 할 것으로 사료된다.
생쥐 배아에서 Heparin-Binding Epidermal Growth Factor가 MMP-9과 ATPase ${\gamma}$-subunit 유전자의 발현에 미치는 영향
홍석호,나희영,이지윤,김정희,김정훈,채희동,강병문,김문규,Hong, Seok-Ho,Nah, Hee-Young,Lee, Ji-Yun,Kim, Jung-Hee,Kim, Chung-Hoon,Chae, Hee-Dong,Kang, Byung-Moon,Kim, Moon-Kyoo 대한생식의학회 2001 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.28 No.2
Objectives: The purpose of this study was to evaluate effects of heparin-binding epidermal growth factor (HB-EGF) on the rate of blastocyst formation and hatching in the mouse embryos and the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and ATPase ${\gamma}$-subunit mRNA. Methods: Late 2-cell mouse embryos was cultured for 72 hours in RTF medium containing with 1, 10, and 100 ng/ml HB-EGF. The mRNA expression level of MMP-9 and ATPase ${\gamma}$-subunit was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: The rate of hatching was significantly higher (p<0.05) in group containing with 1 ng/ml HB-EGF than other groups. Also, the rate of hatched blastocyst was significantly higher (p<0.05) in 10 ng/ml. The mRNA expression level of MMP-9 mRNA was not shown any difference among groups, but ATPase ${\gamma}$-subunit was higher than other groups. Conclusions: Taken together these results suggest that HB-EGF has the positive effect to promote the blastocyst formation and hatching process and influences the blastocoel expansion by promoting the ATPase mRNA expression in the mouse embryos.
홍석호,나희영,이지윤,김정훈,김문규,Hong, Seok-Ho,Nah, Hee-Young,Lee, Ji-Yoon,Kim, Chung-Hoon,Kim, Moon-Kyoo The Korean Society for Reproductive Medicine 2003 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.30 No.2
연구목적: Estrogen은 포유류의 생리주기와 착상과정에서 중요한 조절인자로 작용한다. 본 연구에서는 난소 절제된 생쥐의 자궁에서 estrogen에 의해 직접 또는 간접적으로 조절되어 발현하는 유전자를 분석하고자 하였다. 연구재료 및 방법: 생후 8주된 생쥐의 양쪽 난소를 절제하고 14일 동안 회복기간이 지난 후, estrogen (300 ng/mouse)을 피하로 주사하였다. Estrogen 주사 후 6, 12시간째 자궁을 적출하여 cDNA microarray와 laser capture microdissection (LCM) 기술을 이용하여 estrogen에 의해 조절되는 유전자의 시공간적인 발현 양상을 조사하였다. 결 과: Estrogen 주사 후 6시간째에는 조사된 전체 유전자 가운데 0.9% (증가 22, 감소 49), 12시간째에는 8.4% (증가 351, 감소 287)에 해당되는 유전자가 두 배 이상 증가 혹은 감소하는 결과를 보였다. 또한 일부 증감된 유전자를 선택한 후 LCM 기술을 이용하여 시공간적인 발현양상을 확인한 결과 자궁내막상피세포에서만 estrogen에 의해 유전자의 발현이 증가되는 일부 유전자를 선별하였다. 결 론: 이상의 결과들을 종합해보면 1) estrogen에 의해 조절되는 유전자의 수나 증감의 정도는 12시간 이후에 더 많고, 크게 조절되며, 2) 유전자의 조절부위가 자궁의 특이적인 세포층에서 시공간적으로 조절됨을 의미한다. 이러한 유전자의 정보는 생리주기 또는 착상과정의 분자생물학적 기작을 이해하는 데 도움이 될 것이다.
홍석호,나희영,이영진,이지원,손영수,채희동,김성훈,강병문,김정훈,Hong, Seok-Ho,Nah, Hee-Young,Lee, Young-Jin,Lee, Ji-Won,Son, Young-Soo,Chae, Hee-Dong,Kim, Sung-Hoon,Kang, Byung-Moon,Kim, Chung-Hoon 대한생식의학회 2004 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.31 No.4
Objective: The Id family of helix-loop-helix proteins are thought to affect the balance between cell growth and differentiation by negatively regulating the function of basic-helix-loop-helix (bHLH) transcriptional factors. The aim of this study was to investigate the expression pattern of Ids (Id-1, -2, -3, and -4) in preimplantation mouse embryos at mRNA and protein levels. Methods: Oocytes and preimplantation embryos were collected from reproductive organs of female ICR mice following superovulation. RT-PCR was performed to investigate the mRNA expression patterns of Id genes and their protein were localized by immunofluorescence analysis. Results: Id-1 and Id-3 mRNAs were strongly expressed at the germinal vesicle (GV) oocyte and the blastocyst stages. Id-2 mRNA was expressed throughout preimplantation embryo development, but Id-4 was not expressed. Immunofluorescence showed that Id-1 and Id-2 were predominantly localized in cytoplasmic region, but the immunofluorescence signal of Id-3 was weak throughout preimplantation embryo development. Conclusion: These data show for the first time that Ids are expressed in preimplantation mouse embryos and suggest that Ids may play an important role in early preimplantation embryo development and uterine physiological changes.
Expression of Fra1 and Fra2 Genes are regulated by Estrogen in the Mouse Uterus
이지윤,홍석호,나희영,김성훈,채희동,김정훈,강병문,김문규,Lee, Ji-Yoon,Hong, Seok-Ho,Nah, Hee-Young,Kim, Sung-Hoon,Chae, Hee-Dong,Kim, Chung-Hoon,Kang, Byung-Moon,Kim, Moon-Kyoo The Korean Society for Reproductive Medicine 2003 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.30 No.4
연구목적: 스테로이드 계통의 에스트로겐 호르몬은 막 수용체와 결합하고 DNA에 부착되어, 자궁조직에서 발현되는 많은 유전자들의 발현 양상을 조절하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 난소를 제거한 생쥐 모델을 이용하여 에스트로겐에 의해 조절되는 전사 관련 유전자(transcription factor)들을 동정하고, early up-regulation gene으로 확인된 Fos related antigen (Fra1과 Fra2) 유전자의 발현 양상을 RT-PCR과 면역염색방법으로 살펴보았다. 연구재료 및 방법: 난소 절제술을 시행한 생쥐에 에스트로겐을 피하주사하고 2, 4, 6, 12시간 간격으로 자궁조직을 적출하였다. 대조군으로는 sesame oil만을 주사한 후 2시간째에 수획한 자궁조직을 사용하였으며, 시간대별로 채취한 자궁조직(n=4)에서 RT-PCR을 수행하였다. RT-PCR을 통해 early response gene으로 확인된 Fra1과 Fra2에 대한 에스트로겐의 영향을 살펴보기 위해 estrogen receptor antagonist인 ICI 182, 780을 주사하여 유전자 발현 양상의 변화를 살펴보았다. 또한, 자궁조직내에서의 단백질 발현 부위를 관찰하기 위해 면역조직화학염색을 실시하였다. 결 과: 생쥐 자궁조직에서 에스트로겐에 의해 발현 양상의 변화가 확인된 유전자는 early up-regulation genes (CREB2, Fra-1, 2, GATA5), late up-regulation gene (E2F1), no response genes (CREB1, ATF1, GLI3, E2F3), down-regulation genes (GLI2, E2F5, GATA-2, 3, 6) 등으로 구분할 수 있었다. 그 중 early up-regulation genes에 해당하는 Fra1과 Fra2 유전자는 ICI 182, 780에 의해 그 발현이 유의하게 감소되는 것을 확인하였다(p < 0.01). 이들 단백질은 생쥐 자궁조직의 상피세포층, 기질층, 근육층에서 고루 발현되었으며, 특히 근육층에서 강한 염색정도를 관찰할 수 있었다. 결 론: 이상의 결과를 통해 Fra1과 Fra2 유전자의 발현은 에스트로겐에 의해 조절됨을 알 수 있었으며, 이들의 강한 발현이 자궁조직의 근육층에서 관찰되어 이들의 기능에 대한 연구가 필요할 것으로 생각된다.
Sil-Select와 Percoll이 정충의 미세구조에 미치는 영향
김성훈(Sung Hoon Kim),김정훈(Chung Hoon Kim),박은주(Eun Ju Park),홍석호(Seok Ho Hong),나희영(Hee Young Nah),김정희(Jung Hee Kim),음현진(Hyun Jin Em),김숙희(Sook Hee Kim),채희동(Hee Dong Chae),강병문(Byung Moon Kang),허주령(Joo Ryung 대한산부인과학회 2000 Obstetrics & Gynecology Science Vol.43 No.7
Objective : We performed this study to evaluate the effects of Sil-Select and Percoll in sperm preparation. Methods : Semen samples of 22 patients with normal sperm parameters by WHO criteria were divided into two equal parts and prepared with Percoll and Sil-Select. After completion of semen preparation procedures with Percoll and Sil-Select, sperm concentration, motility and morphology using strict criteria were evaluated in each group and all semen samples were fixed and stained for transmission electron microscopy(TEM). Results : There were no significant diffrences in sperm concentration, percentage of motile spermatozoa and percentage of normal spermatozoa in morphology evaluation using strict criteria under light microscopy between Percoll and Sil-Select-treated groups. However, the percentage of normal shape and position of acrosome, and normal helix assembly of mitochondria under TEM were significantly higher in the Sil-Select-treated group compared to Percoll-treated group (p < 0.001, p < 0.001, p < 0.001). Conclusion : These data demonstrate that Sil-Select is less detrimental to the acrosome and mitochondria of spermatozoa in sperm preparation compared to Percoll.
자궁내막증 환자에서 자궁내막의 표피성장인자 및 섬유아세포성장인자-2 mRNA의 발현 양상
최정원 ( Jeong Won Choi ),이향아 ( Hyang Ah Lee ),이사라 ( Sa Ra Lee ),홍석호 ( Seok Ho Hong ),나희영 ( Hee Young Nah ),이영진 ( Young Jin Lee ),김성훈 ( Sung Hoon Kim ),채희동 ( Hee Dong Chae ),김정훈 ( Chung Hoon Kim ),강병문 ( 대한산부인과학회 2005 Obstetrics & Gynecology Science Vol.48 No.3
Objective: To compare the expression of epidermal growth factor (EGF) and fibroblast growth factor-2 (FGF-2) in the eutopic endometrium of women with and without endometriosis. Methods: Thirty-two women with histologically confirmed endometriosis after la
체외수정시술을 받는 다낭성난소증후군 환자들에서 GnRH Antagonist를 이용한 과배란유도의 효용성
최정원 ( Jeong Won Choi ),김정훈 ( Chung Hoon Kim ),이향아 ( Hyang Ah Lee ),홍석호 ( Seok Ho Hong ),나희영 ( Hee Young Nah ),이영진 ( Young Jin Lee ),김성훈 ( Sung Hoon Kim ),채희동 ( Hee Dong Chae ),손영수 ( Young Soo Son ),강병 대한산부인과학회 2005 Obstetrics & Gynecology Science Vol.48 No.3
Objective: GnRH antagonist has been recently developed and has provided a new treatment option for controlled ovarian hyperstimulation (COH). However, the use of GnRH antagonist (GnRH-ant) has been hesitated in women with polycystic ovary syndrome (PCOS)
성선자극호르몬 길항제를 이용한 과배란유도에 있어 경구 피임제를 이용한 전처치가 체외수정시술의 결과에 미치는 영향
최정원 ( Jeong Won Choi ),김정훈 ( Chung Hoon Kim ),이향아 ( Hyang Ah Lee ),홍석호 ( Seok Ho Hong ),나희영 ( Hee Young Nah ),이영진 ( Young Jin Lee ),김성훈 ( Sung Hoon Kim ),채희동 ( Hee Dong Chae ),손영수 ( Young Soo Son ),강병 대한산부인과학회 2005 Obstetrics & Gynecology Science Vol.48 No.4
저반응군 환자들에서 GnRH Antagonist를 이용한 과배란유도시 경구피임제 전처치의 효용성
최정원 ( Jeong Won Choi ),김정훈 ( Chung Hoon Kim ),이향아 ( Hyang Ah Lee ),홍석호 ( Seok Ho Hong ),나희영 ( Hee Young Nah ),이영진 ( Young Jin Lee ),김성훈 ( Sung Hoon Kim ),채희동 ( Hee Dong Chae ),손영수 ( Young Soo Son ),강병 대한산부인과학회 2005 Obstetrics & Gynecology Science Vol.48 No.4