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        반합성 배지에서 Aspergillus parasiticus의 Aflatoxin생성에 미치는 인삼 Saponin과 그 관련물질의 영향

        전홍기,박건영,조영배 한국미생물학회 1986 미생물학회지 Vol.24 No.3

        반합성 배지인 yeast extract sucrose (YES) 배지에서 인삼 saponm 및 그 관련 물질이 Aspergillus parasilicus의 AF 생성에 미치는 영향에 대해 검토하였다. 배양 시간에 따른 AF생성에 대해 검토한 결과 AF생성은 배양 9일째에 최고치을 나타내였으며 전 배양 기간을 통해 AF B1이 AFG1보다 많이 생성되었다. 배지내에 여러 농도의 인상 saponm을 첨가했을 때 모든 농도의 첨가군은 대조군보다 AF생성이 감소하는 경향을 나타내었으며 saponin 0.05% 첨가시 균체량과 AF 생성량이 매우 감소하였고 saponin 5.0% 첨가시 균체량은 대조군에 비해 증가하였으나 AF은 전혀 생성되지 않았다. 배지내에 saponindiol 맺 triol을 놓도별로 첨가한 경우 diol 0.05, 1.0 및 triol 0.1, 0.5, 1.0 %첨가군에서 AF생성이 감소되었다. 배치내에 saponin fraction를 첨가한 경우 fraction 1, 2, 4. 5. 6은 AF 생성을 상당히 저해하였으나 fraction 3과 7은 AF 생성을 자극하였다 0.05%의 adenosine, guanosine, caffeine 및 xanthosine을 배지에 첨가한 경우 AF생성이 저해되었으나 0.05%의 adenosine 및 cv-tosine을 첨가한 갱우에는 AF생성을 증가시켰다. 5.0%의 saponine을 배지에 첨가한 경우 AF생성은 전혀 일어 나지 않은 반면 total lipid의 합성과 균쳐1량은 대조군에 비해 매우 증가하였다. The effects of ginseng saponin and its related materials on aflatoxin production by Aspergillus parasiticus NRRL2999 in yeast extract sucrose (YES) medium were studied. Maximal production of aflatoxins by the mold in the medium occurred after 9 days at $28^{\circ}C$. When various concentrations of ginseng saponin were added to the medium aflatoxin productions were significantly reduced (p<0.05) compared to the control after 9 days at $28^{\circ}C$. 0.05% of saponin in the medium greatly decreased aflatoxin synthesis, and no aflatoxins were synthesized by the mold in the medium contained 5.0% of saponin. When various concentrations of saponin diol and triol were added to the medium both ingibitory and sitimulatory effects on alfatoxin production were resulted. Saponin fraction numbers of 1, 2, 4, 5 and 6 decreased aflatoxin production, however the numbers of 3 and 7 stimulated the toxin production. 0.05% of adenosine, guanosine, caffeine and xanthosine in the media inhibited aflatoxin production (p<0.05), but adenine and cytosine increased the production. When 5.0% of saponin was added to the medium aflatoxins were not synthesized at all, but total lipid synthesis and mold growth were highly stimulated. Both the synthesis of total lipid and mold growth were reduced in case of aflatoxin synthesis stimulated.

      • SCOPUSKCI등재

        Nocardioides sp. J-275L이 생산하는 세포외 Adenine Deaminase의 정제 및 성질

        전홍기,박정혜,김태숙 한국미생물학회 1987 미생물학회지 Vol.25 No.3

        The extracellular adenine deaminase from Nocardioides sp. J-275L was purified by the following techniques: ammonium sulfate fractionation, DEAE-Cellulose, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography, and Sephacryl S-200 superfine gel filtration. The enzyme was partially purified about 3889.5-fold with about 5.2% yield by these procedures. The molecular weight of the enzyme was 39,000 by a calibrated Sephacryl S-200 superfine column chromatography. The enzyme was stable at pH 7.5 and up to $40^{\circ}C$. Glycerol was effective on the stabilization of the enzyme during storage. The optimum pH and temperature of the enzyme were around pH 7.5 and $40^{\circ}C$, respectively. The apparent Michaelis constant Km of the enzyme for adenine was $7.4\times 10^{-5}$M. The purine analogues, 6-chloropurine, 2,6-diaminopurine, 6-bromopurine, 4-aminopyrazolo [3.4-d]pyrimidine, and 8-azaadenine were substrates for the enzyme. 6-Dimethylaminopurine was a competitive inhibitor of the enzyme. The enzyme was inhibited by 1mM of $Cu^{2+}, Fe^{3+}, Pb^{2+}, Hg^{2+}$, and $Ag^{+}$, and 1mM of $\alpha$,$\alpha$'-dipyridyl, pentachlorophenol, and pCMB. Nocardioides sp. J-275L이 생산하는 세포의 adenine deaminase를 황산 암모늄 분획 , DEAE- Cellulose column c chromatography, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography 및 Sephacryl S-200 superfine gel filtration 등의 파 정에 의해 5.2%의 수율로서 3889.5배로 부분정제하였으며, 본 효소의 분자량은 Sephacry] S-200 superfine gel에 의해 39, O 000 부근으로 측정되었다. 본 효소의 안정 pH와 온도는 pH7.와 $40^{\circ}C$로 나타났으며, 15%의 glycerol이 효소를 안정화시키는데 효과적이었다. 효소의 활성 최적 pH와 온도는 pH 7. 5 $40^{\circ}C$였다. 효소의 ademne에 대한 Km 값은 $7.4\times 10^{-5}$M로 측정되었으며, 검토된 punne a analogue 중에서 6-chloropurine. 2,6-diaminopurine, 6-bromopurine, 4-aminopyrazolo[3,4-dJ pyridine, 8-azaadenine 이 기질로 이용되었다. 본 효소는 0.1mM의 $Cu^{2+}, Fe^{3+}, Pb^{2+}, Hg^{2+}, Ag^{+}$ 등에 의해 활성이 크게 저해되었으며, $Pb^{2+}, Hg^{2+}, Ag^{+}$에 의해 저해된 효소의 활성은 EDTA에 의해 회복되었다. 검토된 일반적인 효소 저해제 중에서 1mM의 $\alpha$,$\alpha$'-dipyridyl, pentachlorophenol, and pCMB 등에 의해 효소의 활성 이 크게 저해되는 것으로 나타났다.

      • SCOPUSKCI등재

        세포의 Adenine Deaminase를 생산하는 방선균의 분리 및 Adenine Deaminase의 생산조건

        전홍기,이상옥,박정혜 한국미생물학회 1987 미생물학회지 Vol.25 No.3

        토양으로 부터 분리된 세포의 adenine deaminase를 생산하는 방선균인 J-275L 균주의 분류학적 특성 및 효소생산 조건이 검토도었다. J-275L 균주는 균사가 간상 또는 구상의 절편으로 단절되며, 세포벽의 아미노산 성부능로서 LL-diaminopimelic acid를 함유하고 mycolic acid를 함유하지 않아TEk. 분류학적 검색 결과 분리균 J-275L을 Nocardiovides sp. J-275L로 명명하였다. Nocardioides sp. J-275에 의한 세포외 adenine deaminasem이 생산조건을 검토한 결과, 효소생산을 위한 최적배지는 0.5% dextrin, 0.5% peptone, 1% yeast extract 및 0.2% $K_{2}HPO_{4}$로 설정되었으며, 배지의 최적 pH는 7.5이었다. The taxonomical properties of strain J-275L isolated from soil as a microorganism which produces extracellular adenine deaminase and cultural conditions for the enxyme production were studied. The hyphae of strain J-275L is fragmented into rod-or coccus-like elements. The elements of fragmented aerkal hyphae has smooth surfaces. The cell wall of the organism contains LL-diaminopimelic acid. Mycolic acid are not produced. As a result of taxonomical studies, strain J-275L is designated as Nocardioides sp. J-275L. The optimum medium for the enzyme production from Nocardioides sp.J-275L wascomposed of 0.5% peptone, 0.5% dextrin, 1% yeast extract, and 0.2% $K_{2}HPO_{4}$. The optimum initial pH of the medium was pH 7.5.

      • SCOPUSKCI등재

        합성 배지에서 Aspergillus parasiticus의 Aflatoxin 생성에 미치는 인삼 saponin과 그 관련물질의 영향

        전홍기,조영배,박건영 한국미생물학회 1986 미생물학회지 Vol.24 No.4

        합성배치인 Glucose-Salts 배지에서 인삼 saponin과 그 관련 물질이 A~$\psi$ergillusρarasiticus의 Aflatoxin 생성에 미치 는 영힘뼈 대해 검토하였다. 배양시간에 따른 균체 증식은 배양 5 일째 이후가 최대였고 Aflatoxin 생성은 배영 9 일째가 최대였다. 인상 saponin O. 05% 첨가시 율처l 증식과 Aflatoxin 생성이 대조군보다 상당량 감소되었고, 5.0% 첨가시 균체 증식은 대 조눈보다 증가하였으나 Aflatoxin 생성은 매우 감소되었다. S Saponin diol 및 triol의 농도별 첨가시 diol 0.01, 1. 0%와 triol O. 5, 1. 0%가 Aflatoxin 생성 저해에 효과적이였다. S Saponin fraction 첨 가시 fraction 1이 Aflatoxin 생성 저해에 가장 효과적 이 었고 fraction 2, 4, 6도 상당한 효과가 있었다. 핵산 관련 물질 첨 가시 Adenine, denosine, Guanosine, Caffeine, Cytosine 및 Xanthosine 첨 가꾼 오우 대조군에 비 해 Aflatoxin 생성 저해에 효과적이었으며, affeine의 경우 균체내에서만 Aflatoxin을 검출할 수 있었다. Saponin 5. 0% 챙까시 Aflatoxin 생성이 매우 저해된 반면 total lipid의 %뇨은 대조군의 10애, 균체 증식은 약 2 배 이상 증가되였다. A study was carried out to determine the effect of ginseng saponin an its related materials on aflatoxin production by Aspergillus parasiticus NRRL2999 in glucose-salts(GS) medium. Maximal growth of the mold and AF froduction in the medium occurred after 5 and 9 days at $28^{\circ}C$, respectively. When various concentrations of saponin added to the medium aflatoxin synthesis were significantly reduced (p<0.05) compared to the control after 9 days at $28^{\circ}C$. 0.05% of saponin inhibited aflatoxin production most effectively in the low concerntrations of saponin (0.01-0.2%) and the toxin synthesis reduced with an increasing concentrations of saponin in the high concentrations (0.03-5.0%). Various concentrations (0.01-1.0%) of saponin diol and triol in the media also caused to reduce aflatoxin synthesis by the mold (p<0.05). All saponin fractions were found to decrease aflatoxin production significantly. Saponin fraction numbers of 1,2,4 and 6 were shown to reduce aflatoxin production effectively, and the number 1 was the most effective. Addition of 0.05% of nucleic acid related materials to the medium reduced aflatoxin production (p<0.05). Aflatoxins could not be found in broth at all, but in mycelia when 0.05% of caffeine was added to the medium. Aflatoxin synthesis was well correlated with total lipid synthesis, growth and glucose uptake. When aflatoxin synthesis inhibited (5.0% of saponin) both total lipid synthesis and growth were stimulated and the efficiency of glucose utilization was reduced.

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