흑두로 제조한 청국에서 분리된 Bacillus subtillus BB-1으로 부터 혈전용해효소 유전자 크로닝 및 특성규명

이영훈,이성호,전주미,김홍출,조용운,박기훈,최영주,갈상완,Lee Young-Hoon,Lee Sung-Ho,Jeon Ju-Mi,Kim Hong-Chul,Cho Yong-Un,Park Ki-Hoon,Choi Young-Ju,Gal Sang-Wan 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.4

흑두로 제조한 청국으로부터 혈전용해력이 우수한 균을 선발하여 동정하였으며, 그를 Bacillus subtilis BB-1로 명명하였다. 이 균은 혈전용해효소 isozyme을 적어도 5개이상 생성하는 균주로 확인되었다. 이 균으로부터 크로모좀을 분리하여 shot gun법으로 혈전용해효소 유전자를 크로닝하였으며, 이 유전자를 BSF-1이라 명명하였다. 이 유전자는 714개의 아미노산을 암호화하고 있으며 기존에 밝혀진 혈전용해효소 유전자와 상동성은 검출되지 않은 새로운 혈전용해효소 유전자였다. 혈전용해효소활성 최적 pH 및 온도는 5.0과 $35^{\circ}C$였다. 기질특이성은 적혈구 배지 또는 skim milk, gelatin등에 전혀 분해활성이 없었다. 이는 혈전만을 특이적으로 분해하는 기질특이성을 보였으며, 혈전분해효소로서의 이용가능성이 충분한 것으로 판단된다. A bacterium producing five fibrinolytic isozymes was isolated from black bean chung kuk. The bacterium was identified as Bacillus subtilis BB-1 by 16s rDNA sequence homology search. A gene out of five fibrinolytic genes in the Bacillus subtilis BB-1 was cloned by shot-gun method. A Cla I DNA fragment of B. subtilis BB-1 chromosome was cloned in to pBluescript II SK(-) and showed the fibrinolytic activity to bacterial cells. The Cla I DNA fragment was sequenced and the sequences did not show homology with gene for protease or fibrinolytic enzyme genes in other organisms. The Cla I DNA fragment was reduced to 2,142 bp by activity-guided PCR cloning method. The optimum pH and temperature of the enzyme were 5.0 and $35^{\circ}C$, respectively. Substrate specificity of the fibrinolytic enzyme was detected in skim milk, casein, gelatin and blood agar plates. The activity of the enzyme was not detected with these substrates. Taken together, this enzyme is a new fibrinolytic enzyme and may be used to prevent thrombosis and arteriosclerosis.

Bacillus subtilis BB-1으로부터 나토키나아제 유전자 크로닝 및 대량발현

이영훈,이성호,박기훈,최영주,정영기,갈상완,Lee Young-Hoon,Lee Sung-Ho,Park Ki-Hoon,Choi Young-Ju,Jeong Yong-Kee,Gal Sang-Wan 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.2

흑두청국으로부터 분리된 혈전용해력이 우수한 Bacillus subtilis BB-1(KFCC 11344P)으로부터 혈전용해효소 유전자를 PCR법에 의해 크로닝하였고 이를 BCF-1으로 명명하였다. BCF-1의 DNA 염기서열결정 결과 1,145 bp 크기의 혈전용해 효소로, 일본의 natto로부터 분리된 nattokinase 유전자와 99%의 상동성을 보임을 확인하였다. 혈전용해효소 유전자의 발현을 위하여 Bacillus 발현계인 Bacillus-E. coli의 shuttle vector인 pEB vector에 크로닝 하고 host로서 B. subtilis 168에 형질전환시켜 대량 발현시켰다. 생산된 혈전용해효소의 최 적활성 pH와 온도는 7.0과 $35^{\circ}C$로 확인되었다, 기질에 대한 분해양상을 조사한 결과 fibrin에서만 특이적으로 강한 분해가 일어났으며, skim milk에서 아주 약한 분해능을 보였으나 blood agar, gelatin, casein에서는 전혀 분해능을 보이지 않았다. 특히 blood agar plate에서 분해능이 없는 것으로 보아 혈액 내에서의 적혈구 파괴현상과 같은 부작용에 대한 위험을 배제할 수 있을 것으로 사료된다. BCF-1에 의해 생산된 혈전용해효소는 fibrin 특이적으로 활성을 나타냄을 확인할 수 있으며, 이는 임상적이나 산업적으로 적용하였을 때 부작용에 대한 위험적인 문제는 배제될 수 있으리라 생각된다. A fibrinolytic enzyme gene was isolated from Bacillus subtilis BB-1 by PCR method. Primers for PCR cloning were designed according to pre-identified gene for fibrinolytic enzymes from B. subtilis. The primer sequences were 5'-CGG ATC CGT GAG AGG CAA AAA GGT G-3' and 5'-TGA ATT CTT AAT GTG CTG CTG CTT GTC C-3' as concensus sequences of the fibrinolytic genes of Bacillus species. The PCR product was 1,145 bp and the sequence homology was 99% with nattokinase gene isolated from Japanese natto. The cloned fibrinolytic gene was reconstructed in Bacillus-E. coli shuttle vector, pEB for bulk-production. The fibrinolytic enzyme was purified by FPLC from the cloned B. subtilis 168. The optimum pH and temperature of the enzyme were 7.0 and $35^{\circ}C$, respectively. The fibrinolytic enzyme did not show any activity toward to skim milk, gelatin, casein and blood agar plate. The enzyme specific polyclonal antibody was prepared in rabbit for further assays such as detection of the gene expression in plant cells. This means that the enzyme may be used for health-care such as thrombosis without any hamful effects in the blood vessel.

Antitumor Sterol Isolated from the Fruiting Body of Pleurotus eryngii

이영훈,박기훈,이병원,조용운,최영주,갈상완,Lee Young-Hoon,Park Ki-Hun,Lee Byong-Won,Cho Yong-Un,Choi Young-Ju,Gal Sang-Wan Korean Society of Life Science 2006 생명과학회지 Vol.16 No.2

새송이버섯으로부터 활성추적법으로 항암활성이 있는 물질인 에르고스테롤 프록사이드를 분리하였다. 이 스테롤의 구조는 분광법과 NMR법으로 확인하였으며 분자식은 $C_{28}H_{44}O_3$이었다. 폐암과 난소암에 $IC_{50}$값은 각각 $7{\mu}M$과 $14{\mu}M$이었다. DNA단편화 실험에서 이 화합물은 암세포의 chromosimal DNA 를 사닥다리모양으로 분해하였고, 세포 분열주기의 억제실험에서 G1단계를 억제함을 관찰하였다. Activity-guided fractionations led to the isolation of antitumor compound, ergosterol peroxide ($5{\alpha},\;8{\alpha}-epideoxy-24(R)-methylcholesta-6,\;22-dien-3{\beta}-ol$) from the fruiting body of Pleuratus eryngii that was cultivated artificially. This sterol structure was established by using spectroscopic methods ($^1H\;and\;^{13}C$ nuclear magnetic resonance and high resolution mass spectra). The purified compound showed a molecular formular of $C_{28}H_{44}O_3$ displaying characteristic features of epidioxy sterols. The 50% inhibitory concentrations ($IC_{50}$) of ergosterol peroxide against human lung cancer cell line (A549) and human ovarian cell line (SK-OV3) were $7{\mu}M\;and\;14{\mu}M$, respectively. In the DNA fragmentation assay, the compound showed the programmed cell death causing the chromosomal DNA fragmentation. It reveals that ergosterol peroxide arrests G1 phase of the cell division cycle.

EPON에서 우선순위 트래픽 클래스 서비스를 위한 Scheduling 알고리즘

이영훈(Young Hoon Lee),이재용(Jae Yong Lee),김병철(Byung Chul Kim),강대경(Dae Kyung Kang),김종안(Jong Ahn Kim),김운하(Woon Ha Kim) 한국통신학회 2003 한국통신학회 학술대회논문집 Vol.2003 No.11

센서 네트워크에서 Maximum Remaining Energy Constrained Minimum Power Routing 알고리즘의 설계 및 성능평가

이영훈(Young Hoon Lee),황안규(An Kyu Hwang),이재용(Jae Yong Lee),김병철(Byung Chul Kim),공정욱(Jong Uk Kong),이길재(Gil Jae Lee),변옥환(Ok Hwan Byeon) 한국통신학회 2004 한국통신학회 학술대회논문집 Vol.2004 No.11

첨단공조방식을 적용한 오피스 설계사례

이영훈(Young Hoon Lee),문성민(Seong Min Moon),길용덕(Yong Duck Kil),김동철(Dong Cheolk Kim) 대한설비공학회 2020 대한설비공학회 학술발표대회논문집 Vol.2020 No.6

Recently, Company building and their energy consumption are rapidly increasing, the energy saving of such building is becoming a very important issue. A heat source of cooling and heating in this building was applied the ice thermal storage system and Steam boiler system And high-efficiency equipment. Air Conditioning system in this building was applied Under floor air conditioning system in interior zone and Fan Coil Unit in Perimeter Zone. In this study, To introduce is the various air conditioning system in Company building of Hyundai-Department store.

노량진 수산물 도매시장 신축공사 설비 설계사례

이영훈(Young Hoon Lee),길용덕(Yong Duck Kil),김동철(Dong Cheol Kim) 대한설비공학회 2019 대한설비공학회 학술발표대회논문집 Vol.2019 No.-

노량진 수산시장은 많은 사람이 찾고 많은 양의 수산물이 유통되며 중공된지 40년이 흘러 낡고 열약한 시설로 수도권 최고의 수산시장이지만 노후화되고 열약한 시설 때문에 시장의 성장이 저하되고 시장 기능이 위축돼 있었는데 이에 현대화사업이 시작되어 수산시장의 경쟁력 강화되고 거래물량이 증가할 것으로 예상되며 가격형성과 수급의 조절기능 역시 강화돼 어업인의 소득증가와 소비자 물가안정 등의 효과에 이바지할 것으로 보이며 요소중점관리기준(HACCP)시설, 저온경매, 콜드 체인 스스템 유통망 등의 시설이 새롭게 갖추어 정보통신기술이 접목되 최신의 물류시스템을 도입해 이전에는 할 수 없었던 신속한 거래와 처리를 할 수 있다고 판단되며 도심 속 바다 풍경을 테마로 한 건축과 쾌적하고 개방된 친환경 휴게공간을 제공해 도시민에게 여유로운 삶의 공간으로 자리매김하고 국내외 관공면소로 발전 되어 저탄소 녹색성장시대를 선도할 수 있는 국내 최고의 에너지절약형 수산물 센터로써 도시의 랜드마크가 될 수 있도록 계획, 자연친화적 수산물 센터가 되도록 계획하였다.

해양관광레저도시 실현을 위한 로컬거버넌스 구축 방안

이영훈(Lee, Young-Hoon),최종인(Choi, Jong-In),한태용(Han, Tae-Yong),최성범(Choi, Seong-Beom) 한국체육과학회 2016 한국체육과학회지 Vol.25 No.6

The purpose of study was to suggest a strategy local governance for vitalizing marine tourism leisure sports focusing on the Sea East of Gangwon Province. This study try to review the way how to build a new paradigm model of the local governance as a driving force for sustainable marine tourism leisure sports development which is main goal and local governance approach which is a political procedure. It has some practical significance mean as a starting point to find alternative development for the future marine industry to consider based on a framework of marine tourism leisure sports focusing on the Sea East of Gangwon Province. To achieve the objective of the research, the backgrounds and the needs of efficient marine tourism leisure sports for local governance active by reviewing the literature. The strategies for vitalizing marine tourism leisure sports were suggested as follows. This study means to the local governance impotance of an organizations partnership in leading marine tourism leisure sports development as communication, information sharing through combination of agencies, responsibility, democracy processes, network system, and participation of capable board. to suggest marine tourism policy for more competitiveness and theoretical and practical implications were discussed.

무기-표적 할당 문제에 대한 메타휴리스틱의 성능 비교

최용호,이영훈,김지은,Choi, Yong Ho,Lee, Young Hoon,Kim, Ji Eun 한국군사과학기술학회 2017 한국군사과학기술학회지 Vol.20 No.3

In this paper, a new type of weapon-target assignment(WTA) problem has been suggested that reflects realistic constraints for sharing target with other weapons and shooting double rapid fire. To utilize in rapidly changing actual battle field, the computation time is of great importance. Several metaheuristic methods such as Simulated Annealing, Tabu Search, Genetic Algorithm, Ant Colony Optimization, and Particle Swarm Optimization have been applied to the real-time WTA in order to find a near optimal solution. A case study with a large number of targets in consideration of the practical cases has been analyzed by the objective value of each algorithm.

가법형 통합지수 산정모형을 이용한 농촌지역의 객관적 경관 평가 - 전북 고창선동권역을 대상으로 -

반영운,이영훈,나상일,윤중석,백종인,Ban, Yong-Un,Lee, Yong-Hoon,Na, Sang-Il,Youn, Joong-Shuk,Baek, Jong-In 한국조경학회 2009 韓國造景學會誌 Vol.37 No.3

This study was intended to evaluate the objective landscape of rural region using an additive integration index method in the Seondong region of Gochang-gun, Jeollabuk-do, Korea. This study consisted of the following three steps. First, this study developed an additive integration index calculation model for landscape assessment based on indicators and weight to each space type in accordance with three landscape fields which were developed by the expert Delphi method. Second, this study used NDVI (Normalized Difference Vegetation Index) and permeable area rate, which were available from high resolution satellite image, to calculate the green naturality degree, area rate, and building coverage respectively. Third, this study has calculated the landscape assessment index of rural regions using an additive integration index method made of assessment data and weight for each indicator. This study has found the following results: 1) landscape level was very poor in all 6 types of space, marking grade five; 2) while the highest level of natural landscape and mixed landscape was grade two, that of artificial landscape was grade five; 3) based on objective landscape, grade five showed the highest frequency, and grade one, two, three, and four followed in that order. 본 연구의 목적은 전라북도 고창군의 선동권역을 대상으로 가법형 통합 지수를 사용하여 농촌지역의 객관적 경관을 평가하는 것이다. 연구는 다음의 세 단계로 구성된다. 1) 농촌경관의 개념 및 평가방법을 살펴보고, 경관 평가지표와 가중치를 바탕으로 객관적 경관 평가를 위한 가법형 통합지수 산정모형을 개발하였다. 2) 경관 평가지표 즉, 녹지자연도, 면적률, 건폐율에 대한 주제도 구축을 위해 고해상도 인공위성 영상을 이용한 식생지수 및 투수면적률을 산정하여 GIS DB를 구축하였다. 3) 평가데이터 및 각 지표에 의한 가중치를 통해 작성된 가법형 통합지수 산정모형을 사용하여 공간유형별, 경관영역별, 객관적 경관 평가를 실시하였다. 연구의 결과는 다음과 같다. 1) 공간유형별 양호한 경관으로 판단되는 2등급 이상의 비율은 경작지, 수공간, 산림, 시가화 지역, 주거지, 건물 순으로 나타났으며, 개발지가 포함된 시가화 지역, 주거지, 건물 등에서 객관적 경관은 열악하게 평가되었다. 2) 경관영역별 2등급 이상의 비율은 혼합경관, 자연경관, 인공경관 순으로 나타났으며, 개발지로 이루어진 인공경관의 객관적 경관은 열악한 상태를 보였다. 3) 객관적 통합 농촌 경관 지수의 범위는 4등급이 가장 높게 나타났고, 1등급, 2등급, 3등급, 5등급 순으로 나타났으며, 객관적 경관이 보통 이하인 3등급 이하가 약 56.5%로 통합 농촌경관은 열악하게 평가되었다.