꿀벌부채명나방 종령 유충 지방체에 의한 아포리포포린-III의 흡수

윤화경(Yun, Hwa-Kyung) 한국산학기술학회 2013 한국산학기술학회논문지 Vol.14 No.8

아포리포포린-III (apoLp-III)를 꿀벌부채명나방 종령 유충 혈림프에서 KBr 농도구배 초원심분리와 겔크로마 토그래피 (Sephadex G-100)를 이용하여 분리, 정제하였다. 본 연구에서는 아포리포포린-III가 꿀벌부채명나방의 종령 유충 지방체에 의해 흡수되는 지를 조사하였다. 종령 유충 지방체 조직을 FITC로 표지한 아포리포포린-III (FITC-apoLp-III)와 상온에서 30분간 배양하였다. 배양 후 형광현미경과 전기영동을 이용하여 FITC-apoLp-III가 지방체 조직으로 들어가는 지의 여부를 확인하였다. 그 결과 FITC-apoLp-III가 유충 지방체로 흡수된다는 사실을 알 수 있었다. Apolipophorin-III (apoLp-III) was isolated and purified from the last larval hemolymph of Galleria mellonella by the KBr gradient ultracentrifugation and gel chromatography (Sephadex G-100). In this paper, we examined that apoLp-III is taken up into the last larval fat bodies in Galleria mellonella. The last larval fat body tissues were incubated at room temperature for 30 min with fluorescein isothiocyanate (FITC)-labeled apoLp-III (FITC-apoLp-III). Fluorescein microscopy and sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) revealed that the last larval fat body tissues internalize FITC-apoLp-III. The results show that the apoLp-III is taken up by the last larval fat body.

Apolipophorin-Ⅲ uptake by the adult ovary in the wax moth Galleria mellonella

윤화경(Yun, Hwa-Kyung) 한국산학기술학회 2009 한국산학기술학회논문지 Vol.10 No.3

아포리포포린-Ⅲ를 꿀벌부채명나방 종령유충 혈림프에서 젤크로마토그래피 (Sephadex G-100)와 이온교환크로마토그래피 (CM-52)방법을 이용하여 분리, 정제하였다. 본 연구에서는 아포리포포린-Ⅲ가 꿀벌부채명나방의 성충 난소에 의해 흡수되는 지를 조사하였다. 성충난소조직을 형광물질로 표지한 아포리포포린-Ⅲ와 상온에서 30분간 배양하였다. 배양결과를 형광현미경과 전기영동을 이용하여 확인한 결과 형광물질로 표지된 아포리포포린-Ⅲ가 성충난소로 흡수된다는 사실을 알았다. Apolipophorin-Ⅲ (apoLp-Ⅲ) was isolated and purified from the last instar larval hemolymph of Galleria mellonella by gel chromatography (Sephadex G-100) and ion exchange chromatography (CM-52). In the present study, I wanted to show that apoLp-Ⅲ is taken up into the adult ovary in Galleria mellonella. Adult ovary tissues were incubated at room temperature for 30 min with fluorescein isothiocyanate (FITC)-labeled apoLp-Ⅲ. Fluorescence microscopy and sodium dodecylsulfate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) revealed that adult ovary tissues internalize fluorescence-labeled apoLp-Ⅲ. The results suggest that apoLp-Ⅲ is taken up by the adult ovary.

꿀벌부채명나방 성충 정소에 의한 아포리포포린-III의 흡수

윤화경(Hwa-Kyung Yun) 한국산학기술학회 2016 한국산학기술학회논문지 Vol.17 No.10

아포리포포린-III (apoLp-III)를 꿀벌부채명나방 종령 유충 혈림프로부터 KBr 농도구배 초원심분리와 겔크로마토그래피(Sephadex G-100)를 이용하여 분리, 정제하였다. KBr 농도구배 초원심분리가 끝난 후, 리포포린을 제외한 분획(lipophorin-free fractions)을 겔크로마토그래피 시료로 사용하였으며, 겔크로마토그래피를 행한후 sodium dodecyl sulfate(SDS)-전기영동으로 apoLp-III의 정제를 확인하였다. 또한, 본 연구에서는 유충 혈림프로부터 정제된 apoLp-III가 꿀벌부채명나방의 성충 정소에 의해 흡수되는 지를 조사하였다. 우화한 지 1일 또는 2일된 성충으로부터 성충 정소를 차가운 링거액에서 분리한 후 조직 배양의 시료로 사용하였다. 순수 정제한 apoLp-III를 dimethyl sulfoxide (DMSO)에 녹인 형광물질 fluorescein isothiocyanate (FITC)와 상온에서 계속 저어가면서 1시간 동안 배양하였다. FITC로 표지된 apoLp-III(FITC-labeled apoLp-III)를 Sephadex G-25 PD-10 column을 이용하여 정제하고 확인하였다. 정제된 FITC-labeled apoLp-III와 성충 정소 조직을 상온에서 30분간 배양하였다. 배양 후 형광현미경 (fluorescence Axioskop microscope)과 SDS-전기영동을 이용하여 FITC-labeled apoLp-III가 정소 조직으로 들어가는 지의 여부를 확인하였다. 그 결과 FITC-labeled apoLp-III가 성충정소로 흡수된다는 사실을 알 수 있었다. Apolipophorin-III (apoLp-III) was isolated and purified from the last larval hemolymph of Galleria mellonella by KBr gradient ultracentrifugation and gel chromatography (Sephadex G-100). After KBr gradient ultracentrifugation, the lipophorin-free fractions were used as the samples for gel chromatography. The purity of the finally purified apoLp-III was confirmed by SDS-PAGE after gel chromatography. In this study, we found that apoLp-III is taken up into the adult testes in Galleria mellonella. The testes were dissected from day-1 or -2 adults in cold Ringer"s solution and used for tissue culture. The protein moiety of apoLp-III was labeled with FITC dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) at room temperature under conditions of continuous stirring for 1 h. The FITC-labeled apoLp-III was purified with a Sephadex G-25 PD-10 column. The tissues of the adult testes were incubated at room temperature for 30 min with fluorescein isothiocyanate (FITC)-labeled apoLp-III. Fluorescein microscopy and sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) revealed that the adult testis tissues internalize the FITC-labeled apoLp-III. The results showed that apoLp-III is taken up by the adult testes.

유충 Manduca sexta 리포포린에 의한 지방체로의 디아실글리세리드 운반

윤화경(Yun, Hwa-Kyung) 한국산학기술학회 2011 한국산학기술학회논문지 Vol.12 No.4

본 논문은 리포포린에 의해 디아실글리세리드(DAG)가 Manduca sexta 유충 지방체로 운반되는 과정을 조사하였. [3H]-DAG 표지 리포포린([3H]-DAG-Lp)을 시간별로 유충 지방체와 배양하여 지방체로 운반되는 DAG의 방사능을 결정하 였다. [3H]-DAG-Lp와 지방체를 배양하면 지방체에 DAG가 축적되며 이의 일부는 지방체에서 트리아실글리세리드(TAG) 로 전환되는 것을 알 수 있었다. Suramin과 표지되지 않은 리포포린(unlabeled Lp)의 존재 하에서는 지방체로 운반되는 DAG가 억제되는 데, 이는 DAG를 운반하는 데 리포포린 수용체가 관여한다는 사실을 알 수 있었다. Suramin의 효과는 다소 복잡하지만 리포포린 수용체에 결합하여 막의 특성을 변화시켜 DAG 운반속도에 영향을 주는 것 같다. 지질 운반과 정이 수용체-매개 내포작용이라는 사실을 조사하기 위하여 내포작용 억제자인 ammonium chloride와 chloroquine을 처리하 였다. 그 결과 리포포린과 지방체사이에서의 지질 운반 기작이 수용체-매개 과정이라는 사실을 보여준다. This paper was to characterize the transfer of diacylglycerol(DAG) from lipophorin to Manduca sexta larval fat bodies. [3H]-DAG-labeled Lp([3H]-DAG-Lp) was incubated with the larval fat bodies under different times and the time of DAG transfer was determined. Incubation of fat bodies with [3H]-DAG-Lp resulted in accumulation of DAG and TAG in the tissue. The transfer of [3H]-DAG was inhibited in the presence of suramin and unlabeled lipophorin, which would be consistent with a lipophorin receptor. The effects of suramin may be complex because it can change membrane properties when bound to the lipophorin receptor and affect the rate of DAG transfer. To investigate the lipid uptake via receptor-mediated endocytosis, we treated with endocytosis inhibitors, ammonium chloride and chloroquine. The results show that the transfer process of lipid by lipophorin and fat bodies is receptor-mediated endocytosis.

Analysis of Reliabilities in Nuclear QA criterias for Efficient Nuclear Quality Assurance System

Kwan-Hyun Kim(김관현),Hwa-Kyung Yun(윤화경) 대한기계학회 2022 대한기계학회 춘추학술대회 Vol.2022 No.3

천연향을 내는 해충기피제의 기피력 테스트

이종권(Lee Jong-Kwon),윤화경(Yun Hwa-Kyung) 한국산학기술학회 2004 한국산학기술학회 학술대회 Vol.- No.-

100%천연향을 이용하여 제작, 개발된 해충기피제의 기피력을 테스트하였다. 해충기피제를 착용한 그룹과 착용하지 않은 그룹으로 구분하여 실험실에서 사육한 모기와 서해안에 위치한 몽산포 해수욕장, 동해안에 위치한 낙산 및 설악 해수욕장과 천안에 있는 태조산에서 해충에 대한 기피력을 측정하였으며, 각 그룹별로 5명씩 5회에 걸쳐 각 회당 1시간동안에 흡혈개체로부터 물린 갯수를 확인하여 이들의 평균값을 계산하였다. 그 결과, 실험실에서는 91%, 몽산포 해수욕장에서는 78%, 낙산 및 설악 해수욕장에서는 93%, 태조산에서는 90%의 기피력을 보여주었으며, 이는 상당히 탁월한 기피효과를 나타내었다.

천연 아로마 모기 기피제 (시트로넬라와 시트로넬롤)의 기피력 효과 측정

정은숙(Jung Eun-Suk),윤화경(Yun Hwa-Kyung) 한국산학기술학회 2005 한국산학기술학회 학술대회 Vol.- No.-

Repellent efficacies of two natural aroma compounds, citronella and citronellal, against mosquitoes were evaluated both in field and in vitro. In vitro, the experiment was conducted with three controlled bands impregnated with 30% citronella extract, 15% citronella extract and 30% citronellal extract, and with band impregnated 30% citronella in field. Raw data was obtained by the means of counting numbers bitten by mosquitoes per unit time, namely human bait method. Comparative repellent efficacies of above three controlled bands were calculated at 86%, 73%, and 78%, respectively in vitro, and 80% in field, showing high repellent effectiveness against mosquitoes. This estimation was also confirmed by t-test compared between control group and each experimental group.

Partial Purification of apolipophorin-III in Galleria mellonella

윤화경 한서대학교 산학협력연구원 부설 환경연구소 1988 환경연구소 논문집 Vol.1 No.-

꿀벌부채명나방(Galleria mellonella L.)의 종령유충혈림프에서 아포리포포린-Ⅲ를 부분정제하여 이들의 분자량을 조사하였다. 아포리포포린-Ⅲ의 정제는 gel filtration (Sephadex G-100, G-50)과 ion exchange chromatography(CM-52)로 분리한 후, 이들의 순수도를 12% SDS-PAGE로 확인하였다. 정제된 아포리포포린-Ⅲ의 분자량은 약 18kDa로 측정되었다. Apolipophorin-Ⅲ(ApoLp-Ⅲ) was partially purified from last instar larval hemolymph of Galleria mellonella and their molecular weight was investigated. ApoLp-Ⅲ purification was performed by gel permeation chromatography(Sephadex G-100, G-50) followed by ion exchange chromatography(CM-52) and their purity was confirmed on 12% SDS-PAGE. ApoLp-Ⅲ has the molecular weight of 18kDa.

Biosynthesis of apolipophorin-Ⅲ in Galleria mellonella L

윤화경 한서대학교 산학협력연구원 부설 환경연구소 1999 환경연구소 논문집 Vol.2 No.-

꿀벌부채명나방(Galleria mellonella L.)의 종령유충혈림프에서 아포리포포린-Ⅲ를 정제하여 이외 분자량 및 생합성 장소를 조사하였다. 아포리포포린-Ⅲ의 정제는 gel filtration (Sephadex G-100), ion exchange chromatography(DE-52)한 후, 아포리포포린-Ⅲ가 존재하는 부분율 90℃에서 30분간 열처리하여, Mono S FPLC로 분리한 후, 이들의 순수도를 SDS-PAGE로 확인하였다. 정제된 아포리포포린-Ⅲ의 분자량은 약 18kDa로 측정되었다. 또한 아포리포포린-Ⅲ는 유충 지방체에서 뿐만 아니라 용 시기의 난소에서도 합성이 되었다. Apoplipophorin-Ⅲ(ApoLp-Ⅲ) was purified from last instar larval hemolymph of Galleria mellonella and its molecular weight and biosynthetic place were investigated. The purification of the apoLp-Ⅲ was performed by gel permeation chromatography(Sephadex G-100), ion exchange chromatography(DE-52), heat-treatment(90℃ for 30min) and Mono S FPLC and their purity was confirmed on SDS-PAGE. ApoLp-Ⅲ has the molecular weight of 18kDa. Also, apoLp-Ⅲ is synthesized in larval fat body as well as pupal ovaries.