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金鏞揮,張在哲,류광석 전북대학교 농업과학기술연구소 1983 農大論文集 Vol.14 No.-
인삼의 갈변현상 중 효소적갈변에 관여하는 polyphenol oxidase의 조효소액을 수삼으로부터 추출하여 그 성질을 조사하였다. 최근 pH는 7.0 이었으며, 효소의 본질특이성을 강조한 바 o-diphenol류인 DL-DOPA에 대해 최고의 활성을 보였고, 같은 o-diphenol류인 chlorogenic acid, catechol, (+)-catechin, alc trihydroxyphenol류인 pyrogallol, gallic acid에 대해서도 DL-DOPA 보다는 낮은 활성을 보였으나, m-phenol류인 resorcinol과 monophenol류인 p-crenol 및 L-tyrosine에 대해서는 활성을 보이지 않았다. DL-DOPA 에 대한 인삼 PPO의 Km가는 4.2mM이었다. 열안정성은 45℃에서 18분 후 80%, 55℃에서는 18분후, 22%, 65℃에서는 12분 후 8%, 75℃에서는 6분 후 5%의 잔존율을 보였다. 저해제로 사용한 Na-DETC, thiourea, L-cysteine, L-cysteine, L-ascorbic acid 및 Na-bisulfate 등은 모두 저해현상을 보였으나 EDTA는 저해작용이 없었고, 그 저해정도는 L-ascorbic acid, L-cysteine, Na-DETC, thiourea, Na-bisulfate 순으로 강하였다. 한편 Cu^+^+은 저농도에서는 오히려 효소활성을 증가시켰으나 고농도에서는 저해작용을 나타냈다. 그리고 polyacrylamide disc-gel electrophoresis로 4개의 효소활성 band를 확인하였다.
Measurement of Total Plasma Homocysteine in Patients with chronic Renal Failure Using HPLC/FLD
Lee,Kyung-Ok,Yoo,Jeong-Yeon,Roh,Hyung-Jin,Paik,Man-Jeong,Lee,Kang-Hyeob,Kang,Bo-Kyung,Ryoo,Kwang-Suk THE KOREAN SOCIETY FOR BIOMEDICAL LABORATORY SCIEN 1997 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.3 No.1
본 연구에서는 한국인 만성신부전증 환자에서 심혈관계 질환의 조기진단을 위한 생화학적 표지자로서 homocysteine의 임상적 유용성을 검토하기 위하여, 만성신부전증 환자와 건강인에서 HPLC/FLD (high performance liquid chromatography/fluorescence detector)을 이용하여 혈장 homocysteine 농도를 측정하고 그 결과를 비교하였다. 본 실험방법의 회수율은 98.6±5.8%를 나타내었으며, 0.2 nmol/L보다 낮은 농도까지 측정이 가능하였고, 2∼50 nmol/ml까지 직선성이 성립하였다 (correlation coefficient=0.9997). 한국인 중 건강한 정상인 (20명)과 만성신부전증 환자 (90명)에서 혈장 homocysteine은 각각 6.81±1.54 nmol/ml과 27.28±14.94 nmol/ml이었으며, 환자군에서는 정상인군에 비하여 약 4배 정도 높은 수치를 나타내었다 (p<0.05). 본 실험의 결과로 볼 때 HPLC/FLD를 이용한 homocysteine 측정은 예민도와 재현성이 높아 routine 실험실 방법으로 유용성이 높을 것으로 생각되며, 또한 혈장 homocysteine의 측정은 만성신부전증 환자의 주요한 사망원인이 되는 폐쇄성 동맥질환을 조기에 진단하거나, 혹은 homocysteine농도를 저하시키는 치료를 실시한 후 치료효과를 판단하기 위한 생화학적 marker로 활용될 수 있을 것으로 기대된다. Cardiovascular disease has been the leading cause of death among patients with chronic renal failure. Many reports have been described that homocysteine is one of the independent risk factor to the occulsive vascular disease. In this study, HPLC/FLD (high performance liquid chromatography-fluorescence detector) technique was used to measure homocysteine level in patients with chronic renal failure and normal control group. The detection limit and recovery of total plasma homocysteine using HPLC/FLD were 98.6±5.8% and 0.2 nmol/ml, respectively. The linearity of this method was established in concentration range of 2∼50 nmol/ml, (correlation coefficient=0.9997). The concentrations of total plasma homocysteine were 6.81±1.54 nmol/ml and 27.28±14.94 nmol/ml in normal control (n=20) and patient group (n=90), respectively (p<0.05). In this study, the HPLC/FLD method showed high sensitivity and reproducibility for a routine clinical laboratory testing. Moreover determination of homocysteine level in plasma might be useful for a biochemical marker for predicting the cardiovascular diseases and for monitoring of therapeutic effect of lowering homocysteine in patients with chronic renal failure.
Measurement of Total Plasma Homocysteine in Patients with Chronic Renal Failure Using HPLC/FLD
Kyung-Ok Lee(이경옥),Bo-Kyung Kang(강보경),Hyung-Jin Roh(노형진),Kwang-Suk Ryoo(류광석),Jeong-Yeon Yoo(유정연),Man-Jeong Paik(백만정),Kang-Hyeob Lee(이강협) 대한의생명과학회 1997 Biomedical Science Letters Vol.3 No.1
본 연구에서는 한국인 만성신부전증 환자에서 심혈관계 질환의 조기진단을 위한 생화학적 표지자로서 homocysteine의 임상적 유용성을 검토하기 위하여, 만성신부전증 환자와 건강인에서 HPLC/FLD (high performance liquid chromatography/fluorescence detector)를 이용하여 혈장 homocysteine 농도를 측정하고 그 결과를 비교하였다. 본 실험방법의 회수율은 98.6±5.8%를 나타내었으며, 0.2 n㏖/L보다 낮은 농도까지 측정이 가능하였고, 2~50 n㏖/㎖까지 직선성이 성립하였다 (correlation coefficient =0.9997). 한국인 중 건강한 정상인 (20명)과 만성신부전증 환자 (90명)에서 혈장 homocysteine은 각각 6.81±1.54 n㏖/㎖과 27.28±14.94n ㏖/㎖이었으며, 환자군에서는 정상인군에 비하여 약 4 배 정도 높은 수치를 나타내었다 (p<0.05). 본 실험의 결과로 볼 때 HPLC/FLD를 이용한 homocysteine 측정은 예민도와 재현성이 높아 routine 실험실 방법으로 유용성이 높을 것으로 생각되며, 또한 혈장 homocysteine의 측정은 만성신부전증 환자의 주요한 사망원인이 되는 폐쇄성 동맥질환을 조기에 진단하거나, 혹은 homocysteine 농도를 저하시키는 치료를 실시한 후 치료효과를 판단하기 위한 생화학적 marker로 활용될 수 있을 것으로 기대된다. Cardiovascular disease has been the leading cause of death among patients with chronic renal failure. Many reports have been described that homocysteine is one of the independent risk factor to the occulsive vascular disease. In this study, HPLC/FLD (high performance liquid chromatography-fluorescence detector) technique was used to measure homocysteine level in patients with chronic renal failure and normal control group. The detection limit and recovery of total plasma homocysteine using HPLC/FLD were 98.6±5.8% and 0.2 n㏖/㎖, respectively. The linearity of this method was established in concentration range of 2~50 n㏖/㎖ (correlation coefficient=0.9997). The concentrations of total plasma homocysteine were 6.81 ± 1.54 n㏖/㎖ and 27.28 ± 14.94 n㏖/㎖ in normal control (n=20) and patient group (n=90), respectively (p<0.05). In this study, the HPLC/FLD method showed high sensitivity and reproducibility for a routine clinical laboratory testing. Moreover determination of homocysteine level in plasma might be useful for a biochemical marker for predicting the cardiovascular diseases and for monitoring of therapeutic effect of lowering homocysteine in patients with chronic renal failure.