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김수배 ( Su Bae Kim ),윤성욱 ( Sung Wook Yoon ) 한국병원경영학회 2007 병원경영학회지 Vol.12 No.2
This research has classified waiting times into the three different ones according to service offering process and investigated the antecedents and consequences of types of waiting times. A service provider`s concern and customer involvement were modeled as antecedent variables and negative emotion and service value as dependent variables. The empirical results of the study are as follows. A service provider`s concern had significant influences on all the three types of waiting times whereas customer involvement was found to affect preprocess-waiting and postprocess-waiting times. Preprocess-waiting time had a significant impact on both negative emotion and service value and inprocess-waiting time only affects negative emotion. However, postprocess-waiting time had influenced none of the variables. The findings illustrate an important role of concern and involvement regarding to a customer`s perceived waiting time and relative importance of waiting types on negative emotion and service value. A summary of the results are reported and managerial implications are discussed.
김수배,김춘득,Kim, Su-Bae,Kim, Chun-Deuk 대한병원협회 1993 대한병원협회지 Vol.22 No.4
이 글은 동아대병원 개원 3주년 기념 학술대회 수상작이다.
Cas9 단백질/ 가이드 RNA 복합체를 이용한 누에 BmBLOS 유전자 편집
김기영(Kee Young Kim),유정희(Jeong Hee Yu),김수배(Su-Bae Kim),김성완(Seong-Wan Kim),김성렬(Seong-Ryul Kim),최광호(Kwang-Ho Choi),김종길(Jong Gil Kim),박종우(Jong Woo Park) 한국생명과학회 2019 생명과학회지 Vol.29 No.5
유전자 가위를 이용한 게놈편집 기술의 등장은 다양한 분야에서 분자육종에 대한 관심을 유발하였으며, 3세대 유전자가위 CRISPR 기술의 개발은 게놈편집을 통한 분자육종 시대를 가속화하고 있다. 본 연구에서는 최근 개발된 3세대 유전자 가위 CRISPR/Cas9을 이용하여 국내 보급품종인 백옥잠의 BmBLOS 유전자를 편집하여 돌연변이를 유도하고 유전형 및 표현형 검사를 통하여 유전자가위를 이용한 누에 분자육종가능성을 분석하고 이용기술을 확보하고자 하였다. 유전자 편집을 위하여 백옥잠의 BmBLOS 유전자의 염기서열을 구명하고, 이를 바탕으로 3종의 가이드 RNA를 합성하였다. 합성된 gRNA는 Cas9 단백질과 복합체를 형성시킨 후 BM-N 누에 세포주에 도입 후 T7 endonuclease I 분석을 통하여 편집효율이 가장 높은 B4N gRNA를 선발하였다. 누에 유전자를 편집하기 위하여 Cas9/B4N gRNA를 누에 초가 배아에 미세주사하고 사육하였다. 미세주사 후 부화율은 18% 가량으로 낮게 나타났으나 생존한 개체 중 돌연변이 발생율은 40% 이상으로 비교적 높게 나타났다. 또한 유전자 편집 G0세대누에 중 70% 가량에서 표현형의 변화가 관찰되었고, 염기서열 분석결과 대부분의 개체에서 BmBLOS 유전자가 정상과 돌연변이가 같이 존재하는 이형접합자 형태로 나타났으며, 그 유전형 또한 모든 개체에서 다르게 나타났다. 이러한 결과에 비추어 볼 때 CRISPR/Cas9 시스템을 이용한 누에 분자육종의 가능성은 매우 높을 것으로 예상되나, 유전자 편집효율을 개선하고 동형접합자를 얻기 위한 교배 및 선발방법에 대한 지속적인 연구가 필요하다고 판단된다. Genome editing technology employing gene scissors has generated interest in molecular breeding in various fields, and the development of the third-generation gene scissors of the clustered, regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR) system has accelerated the field of molecular breeding through genome editing. In this study, we analyzed the possibility of silkworm molecular breeding using gene scissors by genomic and phenotypic analysis after editing the biogenesis of lysosome-related organelles (BmBLOS) gene of Bakokjam using the CRISPR/Cas9 system. Three types of guide RNAs (gRNA) were synthesized based on the BmBLOS gene sequence of Bakokjam. Complexes of the prepared gRNA and Cas9 protein were formed and introduced into Bombyx mori BM-N cells by electroporation. Analysis of the gene editing efficiency by T7 endonuclease I analysis revealed that the B4N gRNA showed the best efficiency. The silkworm genome was edited by microinjecting the Cas9/B4N gRNA complex into silkworm early embryos and raising the silkworms after hatching. The hatching rate was as low as 18%, but the incidence of mutation was over 40%. In addition, phenotypic changes were observed in about 70% of the G0 generation silkworms. Sequence analysis showed that the BmBLOS gene appeared to be a heterozygote carrying the wild-type and mutation in most individuals, and the genotype of the BmBLOS gene was also different in all individuals. These results suggest that although the possibility of silkworm molecular breeding using the CRISPR/Cas9 system would be very high, continued research on breeding and screening methods will be necessary to improve gene editing efficiency and to obtain homozygotes.
김현주 ( Hyun Joo Kim ),조은진 ( Eun Jun Cho ),이광호 ( Kwang Ho Lee ),김수배 ( Su Bae Kim ),배현종 ( Hyeun Jong Bae ) 한국목재공학회 2011 목재공학 Vol.39 No.1
본 연구는 새로운 전처리 방법인 팝핑법을 이용하여 폐목재에 처리하였고, 전처리 된 시료에 효소를 처리하여 당화 수율을 비교 분석하였다. 폐목재의 팝핑 전처리 전후의 화학적 조성 분석 결과 홀로셀룰로오스의 경우 각각 65.9%, 58.8%였으며, 리그닌과 알코올-벤젠을 이용한 유기용매 추출물, 회분의 함량은 전처리 전보다 각각 3.1%, 3.9%, 0.7% 정도 증가하였다. 그리고 폐목재의 팝핑 전처리 전과 후의 시료에 각각 효소 처리 후 환원당을 측정한 결과 팝핑 전처리를 한 경우 전처리 전보다 1.0~1.5mg/㎖ 증가하였다. 시료 50mg (1%, w/v)에 대한 효소 가수분해율은 셀룰레이즈와 자일란네이즈를 50U씩 l:l로 섞어 처리하였을 때 가장 효과적이었다. 또한 팝핑 된 시료에 효소를 처리하여 가수분해되어 나온 상등액을 HPLC 분석법을 이용하여 분석한 결과 팝핑 전처리 후 셀룰레이즈와 자일란네이즈를 처리하였을 때 피크가 증가하였으며, 주된 피크는 글루코스와 자일로스였다. 또한 GC 분석법을 이용하여 팝핑 후 효소가수분해 한 잔여물의 중성당 분석 결과 잔류 글루코스와 자일로스가 각각 팝핑 전보다 57.5%, 64.2% 감소하였다. 글루코스와 자일로스 당전환율은 각각 약 45.9%, 38.7% 였다. We have investigated pretreatment of waste wood using milling refinery combined with poping method, which can save energy for pretreatment and enzyme loading for enzymatic hydrolysis. The chemical analysis of holocellulose of non and popping treated waste wood showed 65.9% and 58.8%, and the lignin, organic extracts and ash were increased by 3%, 4% and 0.7% after pretreatment, respectively. The reducing sugar yields of pretreated waste wood were increased four times more than non-pretreated one and the synergistic effect of cellulase and xylanase were evaluated compare with individual enzyme treatment. Especially, enzyme cocktail (cellulase 50U and xylanase 50U) treatment was very efficient in 1% substrate (50mg). Also, glucose and xylose conversion rate of pretreated waste wood by GC analysis were 45.9% and 38.7%, respectively.