인체의 난관수종액이 생쥐의 배아발달에 미치는 영향: II. 포배기내의 세포 수에 미치는 영향

궁미경,전진현,송상진,송지홍,홍수정,유근재,손일표,김정욱,강인수,Koong, Mi-Kyoung,Jun, Jin-Hyun,Song, Sang-Jin,Song, Ji-Hong,Hong, Soo-Jeong,Yoon, Keun-Jae,Song, Il-Pyo,Kim, Jeong-Wook,Kang, Inn-Soo 대한생식의학회 1999 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.26 No.2

In our previous study, we observed that hydrosalpingeal fluid (HSF) adversely effect mouswe embryo development and hatching. The aim of this study was to evaluate the effect of HSF as assessed by the blastocyst development rate (BDR) and by cell counting in vitro. HSF was collected from ninie patients undergoing salpingoneostomy to correct hydrosalpinx. Two-cell embryos were obtained from superovulated ICR mice. T6 medium and $T6{\pm}0.4%$ bovine serum albumin were used as control media. T6 medium containing 10% or 50% HSF and 100% HSF from each patient were used as test media. Nine to 15 embryos were cultured in micro drops prepared from each of these media. To assess the total cell number within each blastocyst, the blastocysts were fixed and stained with Hoechst 33342 to facilitate cell counting. The mean BDR in two control media were 88.89% and 85.40%. The mean BDR in media containing 10%, 50%, 100% HSF were 85.87%, 89.58% and $75.57%^*$, respectively ($^*$: p<0.05). The overall mean cell count $({\pm}SEM)$ in control media were $87.6{\pm}9.65\;and\;90.12{\pm}11.38$. The BDR was affected adversely only by 100% HSF and not in media containing 10% or 50% HSF. Mean cell counts were decreased significantly only in blastocysts cultured 100% HSF ($63.8{\pm}13.66$; p<0.01) but not in blastocysts cultured in 10% or 50% HSF ($91.3{\pm}12.44\;and\;82.9{\pm}18.27$, respectively). Thus, it is concluded that HSF has no embyotoxic effect but has a mildly negatively effect on embryonic growth and development.

특별강연 및 일반연제 발표 : 실험적 IgA신병중에서 케토티펜의 예방효과

남궁미경 ( Nam Gung Mi Gyeong ),홍순원 ( Hong Sun Won ) 대한신장학회 1999 춘계학술대회 초록집 Vol.18 No.2

생리혈내 탈락된 자궁내막세포의 유착력에 관한 연구: 자궁내막증의 병인 연구를 위한 실험 모델

궁미경(Mi Kyoung Koong),전진현(Jin Hyun Jun),김은수(Eun Soo Kim),고경남(Kyoung Nam Ko),홍수정(Soo Jeong Hong),송지홍(Ji Hong Song),유근재(Keun Jai Yoo),강인수(Inn Soo Kang) 대한산부인과학회 1999 Obstetrics & Gynecology Science Vol.42 No.12

목적: 자궁내막증의 원인은 아직도 잘 밝혀지지 않았으나, 역류된 자궁내막세포 및 조직이 복강 내로 전이, 착상되어 형성된다는 가설이 지배적이다. 그러나, 실제적으로 복강 내에서 어떤 과정에 의해 자궁내막세포 및 조직이 복막에 유착되고 침윤되어 병변이 발생되는 가에 관하여서는 알려지지 않았다. 따라서 본 연구에서는 양막을 이용하여 생리혈에 존재하는 탈락된 자궁내막조직이 상피층에 유착될 수 있는 가를 알아보고자 하였다. 연구방법: 정상적인 생리주기를 갖는 20명의 여성으로부터 생리주기 제2일이나 제3일에 자궁으로부터 Wallace catheter를 통해 흘러나오는 생리혈을 채취하였다. 양막은 합병증이 없는 만삭분만시의 태반으로부터 채취, 분리하여 사용하였다. 채취된 생리혈은 Ham's F-10 배양액으로 2회 세척한 후 준비된 양막조각 위에서 배양액과 함께 5일간 배양하였다. 그 후 양막에 자궁내막조직이 유착된 부위를 해부현미경 하에서 관찰하였고, 유착부위가 관찰되면 이를 고정하여 조직절편으로 만들어 염색, 관찰하였다. 결과: 생리혈에 존재하는 자궁내막조직의 유착부위는 양막의 세포외 기질층 뿐 아니라 상피층 모두에서 관찰되었다. 유착부위의 크기는 매우 다양하여 현미경적 크기부터 육안 확인 가능한 크기까지 관찰되었다. 결론: 생리혈에 존재하는 자궁내막조직은 이미 탈락되었음에도 불구하고 유착력을 가지고 있으며, 이러한 유착력은 자궁내막증을 일으키는 데 관여할 것으로 사료된다. Objectives: The purpose of this study was to determine whether or not the shed endometrial tissues in menstrual fluid (MF) have adhesive potentials, using human amniotic membrane (AM). Methods: The MF from 20 patients with regular menstruation was collected with Wallace catheter by aspiration from the uterine cavity on the second or third day of the menstrual period. The AM was obtained from the placenta of term delivery without any complication. The MF was washed and diluted fivefold with Hams F-10 medium supplemented with 10% fetal bovine serum. The cell suspension was placed on either epithelial layer (EP) or extracellular matrix layer (ECM) of the AM. After 5 days of culture, the adhesion sites were observed under a stereomicroscope. For histological observation, each cultured AM was prepared for the serial paraffin section. Results: The adhesion sites of endometrial tissues in MF were found both ECM (20/20) and EP (11/20) of the AM. The size of adhesion sites in each AM were highly variable from microscopic to macroscopic size. Conclusion: We found that the shed endometrial tissues in MF have adhesive potential to epithelial layer in addition to extracellular matrix layer of amniotic membrane. This adhesive potential may be related to pathogenesis of endometriosis. We suggest that this culture system can be useful as an in-vitro model for endometriosis.

Effect of Hydrosalpingeal Fluid on the Implantation in-vitro in a Murine Model

전진현,궁미경,임천규,김수경,강인수,Jun, Jin-Hyun,Koong, Mi-Kyoung,Lim, Chun-Kyu,Kim, Soo-Kyung,Kang, Inn-Soo The Korean Society for Reproductive Medicine 2000 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.27 No.2

연구목적:인간의 체외수정 및 배아이식술에서 난관수종을 갖는 환자에서 임신율과 착상률이 감소된다는 보고들이 있지만 이에 대한 명확한 기작은 밝혀지지 않았다. 본 연구에서는 생쥐 배아를 이용한 체외 착상모델에서 인간의 난관수종액(HSF)이 착상과정에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 연구재료 및 방법 난관수종액은 난관수종으로 수술을 받은 8명의 환자로부터 채취하였으며, 실험에 사용하기 전까지 냉동고에 보관하였다. 생쥐의 포배기 배아는 2-세포기배아를 3일 동안 배양하여 그 중 상태가 양호한 포배기 배아만을 선별하여 투명대를 제거한 후 사용하였다. 기본 배양액으로는 Ham's F-10을 사용하였으며, 배양 시 기본 배양액만을 사용한 경우를 group Ⅰ으로 하였고, 기본 배양액에 0.5% FBS를 첨가한 경우를 group Ⅱ, 0.5% FBS와 50% HSF를 첨가한 경우를 group Ⅲ , 100% HSF에 0.5% FBS를 첨가한 경우를 group Ⅳ,100% HSF만을 사용한 경우를 group Ⅴ로 하였다. 투명대를 제거한 포배기 배아를 각각의 HSF에 대한 5종류의 배양액에서 48시간 동안 배양하였다. 체외 착상 유무는 부착 부위에서 크기가 커진 영양세포들을 관찰하여 판정하였으며, 착상 부위의 표면적은 화상분석기를 이용하여 산출하였다. 결 과: 생쥐 배아의 체외 착상률은 group Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ에서 각각 0%, 98.9%, 77.5%, 40.4%, 10.0%로 나타났으며, 착상 부위의 평균 표면적은 group Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ에서 각각 $74,675{\pm}25,201{\mu}m^2$, $59,024{\pm}25,877{\mu}m^2$, $45,156{\pm}22,654{\mu}m^2$, $38,254{\pm}17,115{\mu}m^2$이었다. 체외 착상률과 부위의 표면적은 HSF의 농도가 증가함에 따라 통계적으로 유의하게 감소하였다(p<0.001). 결론:인간의 난관수종액(HSF)은 생쥐 배아의 체외 착상과 영양배엽세포의 증식을 억제하는 것으로 확인되었으며, 이러한 원인이 난관수종을 갖는 환자에서 임신율이 낮은 것과 밀접한 관련이 있을 것으로 생각된다.

폐쇄성 무정자증과 비폐쇄성 무정자증에서 체외수정시술 후의 임신 결과 비교

박찬우,궁미경,양광문,김진영,유근재,서주태,송상진,박용석,강인수,전진현,Park, Chan-Woo,Koong, Mi-Kyoung,Yang, Kwang-Moon,Kim, Jin-Young,Yoo, Keun-Jai,Seo, Ju-Tae,Song, Sang-Jin,Park, Yong-Seog,Kang, Inn-Soo,Jun, Jin-Hyun 대한생식의학회 2003 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.30 No.3

Objective: To compare the pregnancy outcomes after in vitro fertilization with intracytoplasmic sperm injection (IVF-ICSI) between obstrucvtive and non-obstrucvtive azoospermia. Methods: From January 1994 to December 2002, 524 patients with obstructive azoospermia (886 cycles) and 163 patients with non-obstructive azoospermia (277 cycles) were included in this study. Microsurgical epididymal sperm aspiration (MESA) or testicular sperm extraction (TESE) in obstructive azoospermia and TESE in non-obstructive azoospermia were perfomed to retrieve sperm, which was used for ICSI and then fertilized embryos were transferred. The results of ICSI - fertlization rate (FR), clinical pregnancy rate (CPR), clinical abortion rate (CAR) and delivery rate (DR) - were statistically analysed in obstructive versus non-obstructive azoospermia. Results: There were no differences in the number of retrieved oocytes, injected oocytes for ICSI and oocyte maturation rate. FR was significantly higher in obstructive than non-obstructive azoospermia (71.7% vs. 61.1%, p<0.001). There was no difference in CPR per embryo transfer cycle. After pregnancy was established, however, CAR was significantly higher in non-obstructive than obstructive azoospermia (25.6% vs. 12.5%, p=0.004). DR per clinical pregnancy cycle was significantly higher in obstructive than non-obstructive azoospermia (78.0% vs. 64.4%, p=0.012). In the karyotype ananlysis of abortus, abnormal karyotypes were found in 75.0% (6/8) of obstructive and 55.6% (5/9) of non-obstructive azoospermia. Conclusion: Our data show significantly higher FR in obstructive than non-obstructive azoospermia. Though there was no differrence in CPR, CAR was significantly higher in non-obstructive than obstructive azoospermia. The abortion may be related to the abnormal karyotype of embryo, but further investigations are necessary to elucidate the cause of clinical abortion in azoospermia.

폐 동정맥 기형과 비장 동정맥 기형을 동반한 유전 출혈 모세혈관 확장증 1례

김미현 ( Mi Hyun Kim ),남궁미경 ( Mee Kyung Namgoong ),김영주 ( Young Ju Kim ),정순희 ( Soon Hee Jung ),어영 ( Young Uh ),이해용 ( Hae Yong Lee ) 대한소아알레르기호흡기학회(구 대한소아알레르기 및 호흡기학회) 2012 소아알레르기 및 호흡기학회지 Vol.22 No.4

유전 출혈 모세혈관 확장증은 혈관 생성 유전자의 이상에 의해 나타나는 상염색체 우성 질환으로, 국내에서는 산발적으로 보고되고 있다. 저자들은 평소 비출혈이 있으며 우연히 발견된 폐 결절이 있는 환아에서 영상 소견과 유전자 검사로 폐 및 비장 동정맥 기형을 동반한 유전 출혈 모세혈관 확장증을 진단하고 치료하였기에 보고하는 바이다. Hereditary hemorrhagic telangiectasia (HHT), also known as Rendu-Osler-Weber disease, is a rare autosomal dominant vascular disorder involving arteriovenous malformation (AVM) due to angiodysplasia. HHT is characterized by mucocutaneous hemorrhagic telangiectasia and AVM of various different organs. The mutated genes in HHT encode proteins that mediate signaling by the transforming growth factor-β superfamily, leading to migration and proliferation of endothelial cells to finally result in AVMs of various organs. Amongst various affected organs, pulmonary AVM is the most common. This 11-year-old female patient with a past and familial history of frequent epistaxis visited the hospital for abdominal pain and vomiting which developed on the same day. Nodular opacity was found in chest X-ray. Subsequently, AVMs in the lungs and the spleen were recognized in chest computed tomography along with detection of ENG gene mutation. Here we report a case of hereditary hemorrhagic telangiectasia diagnosed by incidental chest X-ray findings followed by genetic and radiologic studies. [Pediatr Allergy Respir Dis(Korea) 2012;22:438-443 ]

Poor Responder 환자에서 Clomiphene Citrate 주기와 Controlled Ovarian Hyperstimulation 주기의 체외수정 결과 비교

송지홍,궁미경,Song, Ji-Hong,Koong, Mi-Kyoung 대한생식의학회 1998 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.25 No.3

The purpose of this study is compare IVF cycle outcome in poor responders between clomiphene citrate (CC) stimulated and controlled ovarian hyperstimulation (COH) protocol. A total of 94 patients responding poorly in previous IVF cycles (estradiol<600 pg/ml or less than 3 oocytes retrieved) subsequently underwent either COH (COH group: 122 cycles, 68 patients) or CC-stimulated cycles (CC group: 43 cycles, 26 patients). CC was administered for five consecutive days starting on cycle day 3 at a dose of 100 mg daily. Serial transvaginal ultrasound examination was done from cycle day 8. Urine was collected $3\sim4$ times before hCG injection for the detection of LH surge. The hCG was administered when serum estradiol reached greater than 150 pg/ml and mean follicle diameter>16 mm. In COH group, ovarian stimulation was done using short protocol (GnRH-a/FSH/HMG/hCG). No difference in age or number of transferred embryos was found between CC group and COH group. COH group had significantly (p<0.05) higher mean peak level of $E_2$ ($810{\pm}112$ vs $412{\pm}55$ pg/ml) and greater number of retrieved oocytes ($3.0{\pm}0.2$ vs $2.0{\pm}0.2$) than CC group. CC group had transferred embryos $(1.8{\pm}0.2)$ compared with $(2.1{\pm}0.2)$ in COH group. However, CC group had higher pregnancy rate than COH group per retrieval [26.9% (7/26) vs 6.2% (6/97)], or per transfer [31.8% (7/22) vs 7% (6/86)]. Although cycle cancellation rate in CC group (48.8%) was higher than that of COH group (21.3%), the pregnancy rate per cycle in CC group was still higher (16.3%) than COH group (4.9%). In addition, implantation rate in CC group was 17.5% (7/40), which was significantly (p<0.01) higher than 3.9% (7/180) in COH group. These data suggest that oocyte and embryo quality are lower in COH cycles of poor responders than CC cycles. We suggest that clomiphene citrate stimulated IVF cycle may be more efficient than COH IVF cycle in poor responders in terms of lower costs and higher pregnancy performance.

생리혈에 존재하는 자궁내막조직에서 자궁내막증 관련 유전자의 발현 양상

박찬우,전진현,궁미경,송인옥,Park, Chan-Woo,Jun, Jin-Hyun,Koong, Mi-Kyoung,Song, In-Ok 대한생식의학회 2007 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.34 No.4

목 적: 본 연구에서는 생리혈에 존재하는 탈락된 자궁내막조직에서의 자궁내막증 관련 유전자들의 발현 양상과 자궁내막증 병태생리와의 관련성을 살펴보고자 하였다. 연구방법: 자궁내막증으로 확진된 환자 (n=16)와 정상 대조군 (n=26)에서 생리주기 2$\sim$3일째 Wallace catheter로 채취한 생리혈로부터 탈락된 자궁내막조직을 분리하였다. 기존의 연구들에서 보고된 12종류의 자궁내막증 관련 유전자들의 mRNA 발현 양상을 semi-quantitative RT-PCR 방법으로 비교, 분석하였다. 결 과: 생리혈에서 분리한 탈락된 자궁내막조직은 조직학적 관찰을 통해 자궁내막조직임을 확인하였다. 총 12가지 종류의 자궁내막증 관련 유전자에 대한 RT-PCR 분석에서 telomerase, c-kit, aromatase등의 mRNA 발현이 관찰되지 않았다. 세포사멸 (apoptosis)과 관련성이 있는 fas, fas ligand, bcl-2, bax 유전자와 stem cell factor, ER-$\alpha$/$\beta$, endometriosis protein-I, secretory leukocyte protease inhibitor 등의 mRNA 발현 양상은 자궁내막증으로 확진된 환자군과 대조군에서 통계적으로 유의한 차이를 나타내지 않았다. 결 론: 결론적으로 자궁내막증과 관련된 다양한 유전자들의 발현 양상을 생리혈에 존재하는 탈락된 자궁내막조직에서 분석하였지만 의미성이 있는 유전자를 동정하지는 못하였다. 이는 자궁내막조직의 생리학적 특징인 생리주기에 따른 유전자 발현의 역동적인 변화와 관련이 있을 것으로 생각된다. Objective: This study was performed to investigate the expressions of endometriosis related genes in shed endometrial tissues from menstrual blood of patients with or without endometriosis. Methods: The shed endometrial tissues were collected on 2$^{nd}$ or 3$^{rd}$ day of menstrual cycle with Wallace catheter in patients with endometriosis (n=16) and without endometriosis (n=26). The mRNA expressions of twelve kinds of endometriosis related genes were compared between two groups using semi-quantitative RT-PCR. Results: The collected shed endometrium was confirmed by histological observation. Expressions of telomerase, c-kit and aromatase mRNA were not detected by RT-PCR in shed endometrial tissues. The mRNA expressions of apoptosis related genes (fas, fas ligand, bcl-2, bax), stem cell factor, estrogen receptor-$\alpha$/$\alpha$, endometriosis protein-I and secretory leukocyte protease inhibitor gene were similar between shed endometrial tissues with endometriosis and without endometriosis. Conclusion: We could not find the difference of mRNA expressions of tested endometriosis related genes between shed endometrial tissues with or without endometriosis by semi-quantitative RT-PCR analysis. It may be related to the dynamical changes of gene expressions in the endometrium with menstrual cycle.

Efficacy of Coculture System in the Patients with Poor Prognoses on Human IVF-ET Program

변혜경,염혜원,궁미경,손일표,강인수,이호준,Byun, Hye-Kyung,Youm, Hye-Won,Koong, Mi-Kyung,Son, Il-Pyo,Kang, Inn-Soo,Lee, Ho-Joon The Korean Society for Reproductive Medicine 1997 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.24 No.2

본 연구는 Vero cell을 이용한 사람 배아의 공동배양술이 배아의 질을 향상시킬 수 있거나 또는 반복적 착상 실패를 극복하여 임신을 가능케 할 수 있는지 알아 보고자 시행되었다. 1996년 일년 동안, 반복적 착상 실패를 경험한 환자 (group I)와 이전 주기에서 배아의 질이 나빴던 환자 (group II)를 포함한 총 202례를 분석하여 대조군과 공동배양군 간의 배아의 질, 임신률, 임신유지율 및 착상률을 비교하였다. Group I 93례 가운데 34례는 공동배양을, 나머지 59례는 기존의 체외수정을 시행하였다. Group II 109례에서는 공동배양 36례, 기존의 체외수정 73례를 시행하였다. Group I에서 공동배양군의 임신률, 임신유지율 및 착상률은 각각 14/34 (41.2%), 9/34 (26.5%), 16/81 (19.8%)로 대조군 (11/59 (18.6%), 8/59 (13.6%), 12/152 (7.9%))에 비하여 높았으며, 특히 임신률과 착상률은 유의한 차이를 나타내었다(p=0.028, p=0.015). Group II에서는 공동배양군의 임신률과 임신유지율 및 착상률이 각각 8/36 (22.2%), 5/36 (13.9%), 8/87 (9.2%)로 대조군 (5/73 (6.8%), 3/73 (4.1%), 3/158 (1.9%))에 비하여 높았고, group I의 결과에서와 마찬가지로 임신률과 착상률의 유의한 차이를 나타내었다(p=0.028, p=0.022). 이상에서 Vero cell을 이용한 공동배양술은 위의 두가지 주소를 가진 환자군에서 좋은 결과를 나타내었다. 또한 group II에서 3일-공동배양군의 임신률 역시 향상되어 (4/15 (26.7%)), 보조부화술을 겸비한 3일-공동배양이 이전 주기에서 배아의 질이 나빴던 환자군에 적용될 수 있음을 알 수 있었다. 결론적으로 Vero cell을 이용한 공동배양술은 반복적 착상 실패를 경험한 환자나 또는 이전 주기에서 배아의 질이 나빴던 환자에게 적용하여 임신률을 향상시킬 수 있을 것으로 사료된다. The present study was carried out to evaluate whether the coculture system of human embryos with Vero cells can improve the quality of embryo or overcome the repetitive implantation failures in order to obtain pregnancy. From January to December 1996, a total 202 cases which patients with the problems of repetitive implantation failures (group I) or those with the poor embryonic quality in their previous cycles (group II) was analysed. The quality of cocultured embryo, pregnancy, on-going and implantation rates between coculture and control groups were compared. Of 93 cases in group I, coculture was performed in 34 cases and conventional IVF for the rest. Of 109 cases in group II, 36 for coculture and 73 for conventional IVF. In group I, pregnancy, on-going and implantation rates in coculture group (14/34 (41.2%), 9/34 (26.5%), 16/81 (19.8%), respectively) were higher than those of control (11/59 (18.6%), 8/59 (13.6%), 12/152 (7.9%), respectively). There is significance in the pregnancy and implantation rates (p=0.028 and p=0.015). In group II, pregnancy, on-going and implantation rates in coculture group (8/36 (22.2%), 5/36 (13.9%), 8/87 (9.2%), respectively) were higher than those of control (5/73 (6.8%), 3/73 (4.1%), 3/158 (1.9%), respectively). Like the result of group I, there is significance in the pregnancy and implantation rates (p=0.028 and p=0.022). Coculture system with Vero cells works well in the groups of the two indications. Although the case of 3 day-coculture was small as 15 cases in group II, 3 day-coculture improved pregnancy rate (4/15 (26.7%)). Therefore, 3 day-coculture with assisted hatching is recommended to the patients with poor embryonic quality. In conclusion, coculture system with Vero cells can be suggested as an effective method which improves pregnancy rate in those who have repetitive implantation failures or whose embryonic quality was poor in their previous cycles.

Endometrial Cell Culture: Isolation, Characterization, and Immortalization

홍인선,김석현,궁미경,전진현,이영순,강경선,Hong, In-Sun,Kim, Seok-Hyun,Koong, Mi-Kyoung,Jun, Jin-Hyun,Lee, Yong-Soon,Kang, Kyung-Sun The Korean Society for Reproductive Medicine 2003 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.30 No.4

목 적: 본 실험의 목적은 자궁내막세포를 분리 및 배양법 확립과 함께 불멸화 시키는 것이다. 방 법: 자궁내막에서 상피세포(epithelial cells)와 기질세포(stromal cells)의 분리는 Satyawaroop 등(1979)의 방법에 기초를 두었다. 자궁내막에서 상피세포와 기질세포의 순수 분리도를 확인하고, 불멸화된 기질세포에서 SV40 large T antigen을 확인하기 위하여 면역형광 염색(immunocytochemistry)과 Western blot 기법을 이용하였다. 정상 기질세포의 경우 subconfluence (60%) 상태에서 transfection을 진행하였다. 순수 분리된 plasmid DNA와 Qiagen 사의 superfect를 이용하여 transfection을 실시하였다. 결 과: 본 연구에서 우리는 두 가지 형태의 자궁내막 세포의 분리 및 배양에 성공하였다. 상피세포는 다면체의 형태를 띠며, 선(grandular)조직의 조각으로부터 나선형으로 자란다.기질 세포는 길쭉한 형태를 띠며, 상피세포에 비해 오래 살고, 빠르게 증식하여 나란한 형태로 배열된 세포 다발(cell bundle)을 형성한다. 이렇게 분리된 세포들은 95%의 균질성을 보였으며, 면역형광염색과 western blot을 통해 확인 하였다. 한편 SV40(Simian Virus 40) large T 항원을 암호화 하고 있는 염기 서열을 포함한 플라스미드 벡터로 안정적인 트랜스펙션을 시킴으로써 불멸화 된 자궁내막의 기질 세포주를 확립하였다. 불멸화 된 세포는 그 세포가 유래한 정상의 세포와 동일한 표현형을 가지고 있었다. 결 론: 본 연구에서, 우리는 자궁내막에서 상피세포(epithelial cells)과 기질세포(stromal cells)를 분리하여 배양법을 확립하였다. 동시에 SV40 large T antigen을 이용하여 불멸화된 세포주를 확립하였다. 이렇게 확립된 세포주는 자궁의 생리작용 연구 및 자궁내막증(Endometriosis)과 자궁암(Endometrial cancer) 등과 같은 여러 자궁관련 질병 연구에 많은 도움이 될 것으로 사료된다.