치쿤구니야열의 진단을 위한 신속 항원 검사 기반의 면역분석법 개발 = Development of Rapid Antigen Test-Based Immunoassay for Diagnosis of Chikungunya Fever

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 1
• 1. 치쿤구니야 바이러스의 특징 1
• 1.1. 치쿤구니야 바이러스의 구조 1
• 1.2. 치쿤구니야 바이러스의 감염 현황 및 증상 3
• 1.3. 치쿤구니야 바이러스의 감염 기작 5
• 2. 치쿤구니야열의 진단 6
• 2.1. 치쿤구니야열 진단법의 종류 6
• 2.2. 치쿤구니야열의 체외 진단용 바이오마커 13
• 3. 본 연구의 목적 16
• Ⅱ. 재료 및 방법 18
• 1. 치쿤구니야 바이러스 외피 단백질 도메인 II에 대한 하이브리도마 세포주 개발 18
• 1.1. 재조합 단백질의 전기영동 18
• 1.2. 바이러스 용해물의 전기영동 18
• 1.3. 하이브리도마 제작 19
• 1.3.1. 마우스 면역화 19
• 1.3.2. 면역플레이트의 제작 19
• 1.3.3. 항체 역가 분석 20
• 1.3.4. 세포 융합 및 하이브리도마 선별 20
• 2. 단일클론항체 정제 및 특성 분석 21
• 2.1. 단일클론항체의 정제 21
• 2.2. 단일클론항체의 물리·생화학적 특성 분석 22
• 2.2.1. 단일클론항체의 전기영동 22
• 2.2.2. 단일클론항체의 이소타입 분석 23
• 2.2.3. 단일클론항체의 결합 친화도 분석 24
• 2.2.4. Indirect ELISA를 통한 단일클론항체의 교차 반응성 분석 24
• 2.2.5. Western blot을 통한 단일클론항체의 교차 반응성 분석 25
• 2.2.6. Immunodot blot을 통한 단일클론항체의 교차 반응성 분석 26
• 3. 신속 항원 검사 키트 제작 및 성능 평가 27
• 3.1. 단일클론항체와 다당류 나노입자의 컨쥬게이션 27
• 3.2. 신속 항원 검사 키트 제작을 위한 최적의 항체 쌍 선별 27
• 3.3. 신속 항원 검사 키트 제작 및 성능 평가 28
• 3.3.1. 신속 항원 검사 키트의 제작 28
• 3.3.2. 버퍼를 이용한 민감도 분석 및 교차 반응성 확인 29
• 3.3.3. 혈청을 이용한 검출한계 분석 29
• Ⅲ. 결과 및 고찰 30
• 1. 치쿤구니야 바이러스 외피 단백질 도메인 II에 대한 하이브리도마 세포주 개발 30
• 1.1. 재조합 단백질의 전기영동 결과 30
• 1.2. 바이러스 용해물의 전기영동 결과 30
• 1.3. 하이브리도마 선별 결과 30
• 2. 단일클론항체 정제 및 특성 분석 33
• 2.1. 단일클론항체의 정제 결과 33
• 2.2. 단일클론항체의 물리·생화학적 특성 분석 결과 33
• 2.2.1. 단일클론항체의 전기영동 결과 33
• 2.2.2. 단일클론항체의 이소타입 분석 결과 33
• 2.2.3. 단일클론항체의 결합 친화도 분석 결과 36
• 2.2.4. Indirect ELISA를 통한 단일클론항체의 교차 반응성 분석 결과 36
• 2.2.5. Western blot을 통한 단일클론항체의 교차 반응성 분석 결과 39
• 2.2.6. Immunodot blot을 통한 단일클론항체의 교차 반응성 분석 결과 39
• 3. 신속 항원 검사 키트 제작 및 성능 평가 43
• 3.1. 신속 항원 검사 키트 제작을 위한 최적의 항체 쌍 선별 결과 43
• 3.2. 신속 항원 검사 키트 제작 및 성능 평가 결과 47
• 3.2.1. 버퍼를 이용한 민감도 분석 및 교차 반응성 확인 결과 47
• 3.2.2. 혈청을 이용한 검출한계 분석 결과 51
• Ⅳ. 결론 53
• 참고문헌 54
• ABSTRACT 61