고사리 열수 추출물로부터 보체계 활성화 산성 다당의 분리 및 특성 = Isolation and Characterization of Acidic Polysaccharides Activating Complement System from the Hot Water Extracts of Pteridium aquilinum var. latiusculum

국문 초록 (Abstract)

고사리 열수 추출물로부터 보체계 활성화 산성 다당을 분리하였다. 열수 추출물의 메탄올 환류, 에탄올 침전, 투석 및 동결건조를 통하여 조다당획분인 HPA-1을 분리하였다. HPA-1은 총당 81.80%, 산성당 30.40%, 단백질 15.60%를 함유하였으며, 주요 구성당으로서 rhamnose, galactose, galacturonic acid, glucuronic acid등이 포함되어 있었다. HPA-1을 cetavlon(cethyltrimethyl ammonium bromide)처리에 의해 HPA-2, 3, 4, 5의 획분들로 분리하였으며, 활성과 수율이 가장 높았던 HPA-2로부터 DEAE-Sepharose CL-6B 이온교환 및 Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B, Sepharose CL-4B 겔여과 크로마토그라피를 통하여 두 개의 주요 활성 다당체인 HPA-2-Ⅳa와 HPA-2-Ⅴa-2를 정제하였다. 이 다당들은 HPLC에서 단일 획분으로 확인되었으며 분자량은 각각 500,000과 560,000으로 측정되었다. HPA-2-Ⅳa는 총당 81.63%, 산성당 31.61%로 구성되었으며 fucose, galacturonic acid, glucuronic acid를 1.40:0.97:1.88의 몰비율로 함유하였다. HPA-2-Ⅴa-2는 주요 구성당으로서 rhamnose, galactose, galacturonic acid를 1.00: 1.38: 139의 몰비율로 함유하였다. 이 다당들의 Ca^2+존재 유무시의 황보체 활성 측정과 교차면역 전기영동 결과, 고전경로(classical pathway)와 부경로(alternative pathway)를 통한 보체계 활성화함에 관여함을 알 수 있었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

From the hot water extract of bracken (Pteridium aquilinum var. latiusculum), a Korean wild edible plant, anti-complementary acidic polysaccharldes were isolated. Crude polysaccharide fraction(HPA-1) was obtained by methanol reflux, ethanol precipitation, dialysis, and lyophilization. HPA-1 contained 81.80% of total sugar, 30.40% of uronic acid, and 15.60% of protein. HPA-1 was purified consecutively by cetavlon fractionation and chromatography including ion exchange with DEAE-Sepharose CL-6B and gel permeation with Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B. HPA-2-Ⅳa and HPA-2-Ⅴa-2 were nearly homogeneous on HPLC and had 500,000 and 560,000 daltons of molecular weights, respectively. HPA-2-Ⅳa consisted of fucose, galacturonic acid, and glucuronic acid at the molar ratio of 1.40:0.97:1.88. HPA-2-Ⅴa-2 was composed of rhamnose, galactose, and galacturonic acid at the molar ratio of 1.00 : 1.38 : 1.39. The polysaccharides were found to activate the C3 component both in the presence and in the absence of Ca^2+ through the crossed-immunoelectrophoresis suggesting that those involved in both classical and alternative complement pathway.