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      Effects of Sympathectomy on the apoptosis of rat retinal ganglion cells

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      국문 초록 (Abstract)

      교감신경계는 자율신경계의 한 부분으로 Norepinphrine이 주요한 신경전달물질로 알려져 있다. 눈에서는 망막 및 맥락막의 혈관이 위목교감신경절에서 뻗어나온 교감신경계의 신경지배를 받는 것으로 알려져 있다. 이는 교감신경계가 맥락막 및 망막의 혈관계의 조절에 중요한 역할을 할 것이라고 추측할 수 있으며, 연령관련황반변성이나 당뇨병성 망막증등의 질환에서 교감신경계의 자극이 장기간 사라지게 되면 비정상적인 혈관의 증식이 발생할 수 있다고 예상할 수 있다.
      또한, 이전 연구결과에 따르면 교감신경계의 단절이 말초조직에서 세포의 사멸을 유발하며, 교감신경계의 재형성이 세포 자멸사를 억제하는 효과가 있는 것으로 보고된 바 있다.
      이에 본 연구에서는 교감신경의 신경지배 단절시 쥐의 망막신경절세포의 자멸사가 유발되는 지 알아 보고자 하였다.
      쥐의 눈으로 연결되어 있는 교감신경 지배를 차단하기 위하여 오른쪽 위목교감신경절 절제술을 시행하여 오른쪽 눈으로 연결되어 있는 교감신경의 신경지배를 단절시켰다. 망막의 손상정도는 FluoroGold를 superior colliculus에 주입한 후 4-7일째 망막을 채취하여 채취된 망막전체를 슬라이드 위에 고정한 후 FluoroGold 신경표지자로 표시되는 살아있는 망막신경절세포의 개수를 측정하여 확인하였다. 세포사의 유발여부는 TUNEL 분석을 이용하였으며, BDNF (Brain-derived neurotrophic factor)와 아드레날린 수용체의 발현의 확인을 위하여 면역조직염색화학법과 Western blot 분석을 이용하였다.
      교감신경절 절제술을 시행한 후 2주와 4주째, 살아있는 망막신경절세포의 수는 대조군에 비해 교감신경절제술을 시행한 쪽에서 의미있게 감소하였으며, TUNEL 양성반응을 보이는 망막신경절세포 또한 교감신경을 절제한 쪽에서 발견됨을 확인하였다. 또한 교감신경이 절제된 쪽의 망막에서 BDNF 단백질의 발현이 증가되며 베타-1 아드레날린 수용체가 감소됨을 확인할 수 있었다.
      이러한 결과는 교감신경절제술이 망막에서 세포자멸사를 유발하여 망막신경절세포의 수를 감소시킬 것으로 생각된다.
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      교감신경계는 자율신경계의 한 부분으로 Norepinphrine이 주요한 신경전달물질로 알려져 있다. 눈에서는 망막 및 맥락막의 혈관이 위목교감신경절에서 뻗어나온 교감신경계의 신경지배를 받는...

      교감신경계는 자율신경계의 한 부분으로 Norepinphrine이 주요한 신경전달물질로 알려져 있다. 눈에서는 망막 및 맥락막의 혈관이 위목교감신경절에서 뻗어나온 교감신경계의 신경지배를 받는 것으로 알려져 있다. 이는 교감신경계가 맥락막 및 망막의 혈관계의 조절에 중요한 역할을 할 것이라고 추측할 수 있으며, 연령관련황반변성이나 당뇨병성 망막증등의 질환에서 교감신경계의 자극이 장기간 사라지게 되면 비정상적인 혈관의 증식이 발생할 수 있다고 예상할 수 있다.
      또한, 이전 연구결과에 따르면 교감신경계의 단절이 말초조직에서 세포의 사멸을 유발하며, 교감신경계의 재형성이 세포 자멸사를 억제하는 효과가 있는 것으로 보고된 바 있다.
      이에 본 연구에서는 교감신경의 신경지배 단절시 쥐의 망막신경절세포의 자멸사가 유발되는 지 알아 보고자 하였다.
      쥐의 눈으로 연결되어 있는 교감신경 지배를 차단하기 위하여 오른쪽 위목교감신경절 절제술을 시행하여 오른쪽 눈으로 연결되어 있는 교감신경의 신경지배를 단절시켰다. 망막의 손상정도는 FluoroGold를 superior colliculus에 주입한 후 4-7일째 망막을 채취하여 채취된 망막전체를 슬라이드 위에 고정한 후 FluoroGold 신경표지자로 표시되는 살아있는 망막신경절세포의 개수를 측정하여 확인하였다. 세포사의 유발여부는 TUNEL 분석을 이용하였으며, BDNF (Brain-derived neurotrophic factor)와 아드레날린 수용체의 발현의 확인을 위하여 면역조직염색화학법과 Western blot 분석을 이용하였다.
      교감신경절 절제술을 시행한 후 2주와 4주째, 살아있는 망막신경절세포의 수는 대조군에 비해 교감신경절제술을 시행한 쪽에서 의미있게 감소하였으며, TUNEL 양성반응을 보이는 망막신경절세포 또한 교감신경을 절제한 쪽에서 발견됨을 확인하였다. 또한 교감신경이 절제된 쪽의 망막에서 BDNF 단백질의 발현이 증가되며 베타-1 아드레날린 수용체가 감소됨을 확인할 수 있었다.
      이러한 결과는 교감신경절제술이 망막에서 세포자멸사를 유발하여 망막신경절세포의 수를 감소시킬 것으로 생각된다.

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      목차 (Table of Contents)

      • INTRODUCTION = 1
      • MATERIALS AND METHODS = 4
      • Materials = 5
      • Surgical sympathectomy = 5
      • Retrograde labeling of surviving RGCs = 6
      • INTRODUCTION = 1
      • MATERIALS AND METHODS = 4
      • Materials = 5
      • Surgical sympathectomy = 5
      • Retrograde labeling of surviving RGCs = 6
      • Assessment of RGC Survival = 6
      • TUNEL assay = 7
      • Western Blot Analysis = 8
      • Immunohistochemistry = 9
      • RESULTS = 10
      • DISCUSSION = 14
      • FIGURES = 18
      • REFERNCESES = 24
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