얕은아래쪽배벽동맥피판의 생존 향상을 위한 VEGF와 COMP-Ang1 유전자 치료

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

(Abstract)
Partial necrosis of pedicle skin flaps remains a substantial problem in plastic and reconstructive surgery. Ischemia may jeopardize skin flap survival and result in flap necrosis. The primary causes of necrosis are inadequate arterial inflow, insufficient venous outflow, or both. Therefore, we investigated the potential of suing adenovirus vector encoding for adenovirus VEGF (AdVEGF), adenovirus COMP-Ang1 (AdCOMP-Ang1) gene in an attempt to promote the viability of the superficial inferior epigastric artery flap model in a rat model. The flap was pedicled solely on the right inferior epigastric vessels. The flap was designed so that only the medial branch of the epigastric artery supplied blood to the flap. In result, there was a significant increase in mean percentage of survival flap area by 62.7%, 79.1%, 69.7% in flaps transfected with adenovirus VEGF, COMP-Ang1, coadministraion of VEGF and COMP-Ang1 at 3 days. There was a significant increase in mean percentage of survival flap area by 89.8%, 91.1%, 94.8% at 7 days, 95.6%, 94.8%, 96.3% at 14 days. H&E staining analyses revealed that blood vessels were formed after AdVEGF, AdCOMP-Ang1 or AdVEGF plus AdCOMP-Ang1 than AdLac Z. The results of this study suggest the possibility of using adenovirus-mediated VEGF, COMP-Ang1 gene therapy to promote therapeutic angiogenesis in patients who undergo reconstructive procedures.

국문 초록 (Abstract)

(초 록)
피부피판의 생존을 높이기 위한 연구는 조직의 허혈을 개선하는데 역점을 두고 있다. 조직이 정상적인 기능을 하기 위해서는 혈관을 통한 산소와 영양분의 적당한 공급이 절대적으로 필요하기 때문이다. 조직이 저산소증에 처하였을 때 혈관신생을 촉진하는 내재적인 인자로 작용하는 것으로 vascular endothelial growth factor (VEGF), angiopoietin, transforming growth factor-beta 1 (TGF-β1), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1)등이 알려져 있다. 이들 중 VEGF와 angiopoietin이 결합하여 작용을 나타내는 수용체가 혈관내피세포에만 선택적으로 존재하기 때문에 다른 촉진인자들에 비해 연구의 관심도가 크다. 본 연구의 목적은 adenovirus VEGF (AdVEGF)와 adenovirus COMP-angiopoietin1 (AdCOMP-Ang1)을 이용한 유전자치료가 얕은아래쪽배벽동맥피판의 생존을 향상시키는지를 알아보는 것이다.
백서의 하복부에서 일측의 SIEA에 의해서만 혈액을 공급 받는 피부피판을 3 × 6 cm 크기로 일으켜 혈액을 공급받지 못하는 쪽에 피판의 괴사를 유도하고, 괴사가 시작되는 부위의 피부피판에 AdVEGF와 AdCOMP-Ang1을 주사하여 이 유전자 치료가 피부피판의 생존율을 향상시키는지를 연구하였다. 대조군은 생리식염수를 같은 양으로 주사하였다. 피판의 생존을 3, 7, 14일에 육안적으로 관찰하고 Vistrak digitalⓇ을 이용하여 생존한 부위의 크기를 측정하였다. 조직을 생검하여 H&E로 염색하고 endothelial cell marker인 CD31 antibody를 이용한 면역조직화학염색법(immunohistochemistry; IHC)으로 혈관신생의 정도를 정량화하여 비교 분석하였다.
실험 결과 생존면적이 3일 째에 대조군에 비해 AdVEGF, AdCOMP-Ang1, AdVEGF와 AdCOMP-Ang1을 함께 투여한 그룹에서 각각 89.8%, 91.1%, 94.8%로 의미 있게 증가하였다. 7일 째는 각각 89.8%, 91.1%, 94.8%, 14일 째는 각각 95.6%, 94.8%, 96.3%로 생존면적이 증가한 것을 알 수 있었다. CD31을 이용한 IH에서 대조군에 비해 AdVEGF, AdCOMP-Ang1을 각각 투여한 그룹과 함께 투여한 그룹에서 CD31이 더 많이 발현하였다. 혈관의 수를 관찰한 결과 투여 후 3일에는 유의성이 없으나 7일과 14일에 있어서는 대조군에 비해 실험군에서 혈관의 수가 더 증가한 것을 알 수 있었다. 결론적으로 AdCOMP-Ang1과 AdVEGF가 혈관신생을 유도하여 피부피판 작성 초기인 7일째까지 피판의 생존율을 향상시키는 효과가 있었다.

목차 (Table of Contents)

• 1. 서 론 1
• 2. 재료 및 방법 3
• 3. 성 적 8
• 4. 고 찰 19
• 5. 요 약 22
• 참고문헌 23
• Abstract 27
• 국문초록 29