육종 (育種) · 조직배양분야 : SEV system 을 이용한 양버들 화경조직의 형질전환 및 재분화 유도

국문 초록 (Abstract)

본 연구는 기존의 non-disarmed vector system을 개선한 SEV system을 이용하여 양버들 환경조직을 형질전환시키고 이로부터 callus 단계를 거치지 않고 shoot를 재분화시키는 방법으로 개발하여 추후 활엽임목 전반에 걸쳐서 적용가능한 genetic transformation 방법을 개발하는데 그 목적을 두었다 주요 실험결과는 다음과 같다. 1. mRNA splicing inhibitor 처리에 의한 환경조직의 재분화 (shoot 및 callus)억제효과는 75mg/l의 Kanamycin 농도에서 치상후 60일까지 지속되었다. 2. 화경조직을 Agrobacterium suspension 660nm에서 흡광도 1.0에 1시간 동안 cocultuvation한후 suspension mediun에 설치된 filtter paper bridge상에서 36시간 동안 preconditioning 시킨 후 MS + IAA0.2mg/l + BA0.5mg/l + Kanamycin 75mg/l에 치상하였을 때 95% 이상의 shoot형성을 보였다. 3. 2에서 생산된 shoot는 동일한 배지에서 기내배양 shoot와는 상이한 phenotype을 보였으며 75mg/l의 Kanamycin이 첨가된 배지에서도 지속적으로 분화되었다. 4. wild type의 pTiC58 및 pTiBo542 strain과 cocultivation 시킨 화경조직은 MS basal medium Cefotaxime 500mg/l에서 tumor 뿐만 아니라 shoot 또는 root teratoma가 형성되었다. 이는 양바들 화경조직의 endogenous phytohormone level과 integration된 Ti-plasmid 상의 T_R 또는 T_K region의 상호작용에 기인하는 것으로 보인다.