자궁경부종양 (Cervical Neoplasia) 의 Scrape 표본에서 중합효소연쇄반응을 이용한 Human Papillomavirus의 검출 = Detection of HPV in Cevical Scrape Specimens of Cervical Neoplasia using the Polymerase Chain Reaction

국문 초록 (Abstract)

본 연구에서 저자들은 정상 control 25예, 자궁경부상피내종양(CIN) 22예, 침윤성 자궁경부 편평상피세포암(invasive squamous cell ca) 32예를 대상으로 하여 이들로부터 Pap smear시 동시에 얻은 자궁경부 scrape 표본을 가지고 PCR을 시행하여 HPV type-16, -18의 검출을 시행한 결과는 다음과 같았다.
1. 정상 control group에서 HPV type-16의 감염율은 44.0%였으며 자궁경부 이형상피증(dysplasia), 상피내암(CIS), 자궁경부 편평상피세포암(squamous cell ca) 각각에서는 62.5%, 83.3%, 96.9%의 감염율을 보였다(Table 3).
2. 정상 control group에서 HPV type-16의 감염율은 4.0%였으며 자궁경부 이형상피증(dysplasia), 상피내암(CIS), 자궁경부 편평상피세포암(sqamous cell ca) 각각에서는 18.8%, 0.0%, 15.6%의 감염율을 보였다(Table 3).
3.HPV type-16 과 type-18의 동시감염(coinfection)율을 보면 정상control group에서 4.0%였으며 자궁경부 이형상피증(dysplasia), 상피내암(CIS), 자궁경부 편평상피세포암(squamous cell ca) 각각에서는 12.5%, 0.0%, 15.6%의 동시 감염율을 보였다(Table 3). 4. Pap smear의 결과와 HPV type-16,-18의 감염율을 비교한 결과는 table 4와 같아 Pap smear의 class가 높을수록 HPV DNA의 positivity는 점차 높아지는 양상을 보였으며 정상의 Pap smear(class I,II) 결과를 보인 경우에도 상당수의 환자(class I : 42.9%, classII : 66.7%) 에서 HPV DNA는 양성을 보였다.
이상의 예비적 실험결과, PAP smear를 시행시 자궁경부종양(cervical neoplasia)의 scrape 표본을 동시에 얻어, 종합효소연쇄반응을 이용한 HPV DNA를 검출하는 방법은 자궁경부암의 고위험군 환자를 검색하는데 큰 도움이 될 뿐 아니라, 앞으로 용이하게 널리 사용될 수 있으며, 아주 민감하고, 신속한 검색방법이라 사료된다. 한편 HPV type-16은 자궁경부 편평상피세포암의 발생에 있어서 중요한 역할을 할 것으로 사료되며, 본 연구에서와 같이 HPV type-18은 type-16과 달리 자궁경부 편평상피세포암에서는 검출율이 아주 낮은 것으로 보아, 아마도 자궁경부암 발생에 있어서 HPV type-16과 -18의 역할이 서로 상이할 것으로 추측할 수 있겠다. 한편 정상 세포진검사(Pap smear)결과를 보인 환자 상당수에서 HPV DNA가 검출됨에 관하여서는 예의 주목하여야 할 것이며, 이 환자들의 장기간 추적검진을 통하여, 이 환자들이 과연 자궁경부암으로 향후 진행할 것인지에 관한 연구는 HPV가 자궁경부암의 발생원인이라는 현재의 가설을 밝히는데 매우 중요한 자료가 될것으로 사료된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Epidemiological studies suggest that a venereally transmitted infectious agent such as HPV`s could play a important role in the etiology of human cervical carcinoma.
Over 60 different types of HPV have been identified. However, only certain types are commonly found in female genital genital lesions, including HPV-6 and HPV-11, associated with condylomata accuminata, and HPV-16 and HPV-18, associated with cervicaldysplasia and carcinoma.
Various methods have been successfully used for the detection of HPV in genital lesions, including antigenic analysis, Southern blot hybridzation, dot blot hybridization and in situ hybridization. HOwever these methods are cumbersome and often lack sensitivity.
A very sensitive polymerase chain reaction procedures capable of amplifying specific DNA sequeces by up to millionfold was recently developed for detection of HPV DNA.
In this study, we performed the PCR procedures to detect HPV-16,-18 in cervical scrape speciments obtained from cervical intraepithelial neoplasia (CIN; 22 cases) and invasive squamous cell carcinoma (32 cases) and normal cervix (25 cases). And we compared the prevalence of HPV`s with the histologic diagnosis and findings of Pap smears.
The results were as follow;
1. The detection rate of HPV-16 DNA in normal cervix, dysplasia, CIS and invasive squamous cell carcinoma were 44.0%(11/25), 62.5%(10/16), 83.3%(5/6), 96.9%(31/32), respectively.
2. The detection rate of HPV-18 DNA in normal cervix, dysplasia, CIS and invasive squamous cell carcinoma were 4.0%(1/25), 18.8%(3/16),0%(0/6), 15.6%(5/32) respectively.
3. The co-infection rate of HPV-16 and -18 in normal cervix, kysplasia, CIS and invasive squamous cell carcinoma were 4.0%(1/25), 12.5%(2/16), 0%(0/6), 15.6%(5/32) respectively.
4. The results of comparison of comparison between the prevalence of HPV`s and the findings of Pap smears were as follows;
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Pap smears
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HPV DNA Class I Class II Class III ClassⅣ ClassⅤ
No.(%) No.(%) No.(%) No.(%) No.(%)
------------------------------------------------------------------------------ Type 16 9/21(42.9) 4/6(66.7) 8/14(57.1) 8/9(88.9) 28/29(96.5)
Type 18 1/21(4.8) 0/6(0.0) 3/14(21.4) 0/9(0.0) 5/29(17.3)
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In cervical scrape specimens, detection of HPV DNA using the PCR is considered to be very rapid, easy and sensitive method for detection of HPV DNA and also helpful to screen the women with a high risk of cervical cancer. And HPV maybe a important factor in the development of cervical cancer, but the roles of HPV-16 and HPV-18 in the development of cervical cancer maybe different each other.