사람 역분화줄기세포를 이용한 분화특이 세포주 개발에 관한 연구

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

GATA6(GATA binding protein 6)는 18번 염색체(18q11.2)에 위치하며 Zinc finger transcription factors의 small family member에 속하며 척추동물의 발달과정에서 세포 분화 및 기관 형성을 조절하고 endo-mesoderm으로 분화되는 세포에 주로 발현된다. 본 연구에서는 clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR associated protein 9(이하 CRISPR/Cas9이라 함)을 이용해 GATA6-EGFP knock-in 세포주(이하 GATA6 리포터 세포주라 함)를 제작하였다. 제작된 GATA6 리포터 세포주는 definitive endoderm(이하 DE라 함)으로 분화시켜 GATA6의 내재적 프로모터에 의한 형광단백질의 발현을 확인하였다. CRISPR/Cas9으로 균질한 단일 세포로 제작된 GATA6 리포터 세포주는 분화 모니터링을 이용한 분화조건 최적화, 줄기세포의 발생 및 분화기전 연구, 분화된 세포의 분리와 같은 다양한 줄기세포 연구에 활용될 수 있다

목차 (Table of Contents)

• 초록
• 표목차
• 그림목차
• 사용된 약어
• Ⅰ. 서론
• 1. 연구 배경
• 2. 연구 목적
• Ⅱ. 재료 및 방법
• 1. Guide RNA 디자인 및 합성
• 2. SpCas9 합성 및 정제
• 3. GATA6 knock-in 리포터 세포주 제작
• 4. GATA6 knock-in 리포터 세포주 검증
• Ⅲ. 결과
• 1. GATA6-knock-in 리포터 세포주 제작
• 2. GATA6-knock-in 리포터 세포주 검증
• Ⅳ. 고찰
• Ⅴ. 결론
• Ⅵ. 참고문헌