Molecular Cloning and Expression of a cDNA Encoding the Aquaporin Homologue from the Firefly, Pyrocoelia rufa

국문 초록 (Abstract)

Aquaporin유전자 계열에 속하는 한 유전자를 결정하는 cDNA를 늦반딧불이 Pyrocoelia rufa의 cDNA library로부터 클로닝하였다. 늦반딧불이 aquaporin cDNA의 염기서열 분석 결과, 813bp의 길이로 271개의 아미노산으로 구성된다. 늦반딧불이 aquaporin의 단백질 서열은 이미 알려진 곤충 유래 aquaporin 및 일부 포유동물 유래 aquaporin들과 상동성을 나타내었다. 늦반딧불이 aquaporin의 단백질 서열 역시 aquaporin계열에서 특징적으로 보존된 NPA motifs가 두 영역에서 관찰되었다. 또한 늦반딧불이 aquaporin과 이미 알려진 aquaporin계열의 단백질 서열을 이용한 계통 분석 결과, 늦반딧불이 aquaporin은 이미 알려진 곤충 유래 aquaporin계열에 속하였다. 전사수준에서 늦반딧불이 aquaporin유전자의 발현을 알아보기 위하여, 세가지 특정적인 조직 (지방체, 중장 및 피부)으로부터의 mRNA를 이용하여 Northern blot분석을 수행하였다. 그 결과 늦반딧불이 aquaporin유전자는 대부분의 조직에서 발현되는 것으로 추정된다. 한편, 늦반딧불이의 aquaporin유전자를 곤충 베클로바이러스 발현 벡터계를 이용하여 곤충 세포주에서 발현한 결과 34kDa의 밴드로 관찰되었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

A cDNA encoding a putative member of the aquaporin gene family was cloned from a cDNA library of the firefly, pyrocoelia rufa. Sequence analysis of the cDNA encoding the aquaporin homologue of P. rufa revealed that the 813 bp cDNA has an open reading frame of 271 amino acid residues. The deduced protein sequence of the aquaporin homologue gene of P. rufa was aligned to the insect aquaporins and several mammalian aquaporins. The protein sequence of p. rufa aquaporin homologue reveals two regions of NPA motifs conserved in the aquaporin family. Phylogenetic analysis further confirmed the deduced protein sequence of the p. rufa aquaporin homologue gene to be belonged to the insect aquaporin family. Northern blot analysis suggested expression of the p. rufa aquaporin homologue gene in most, if not all, body tissues at the transcriptional level. The cDNA encoding the aquaporin homologue of P. rufa was expressed as a 34 kDa band in baculovirus-infected insect cells.