닭 Coccidia의 純粹分離와 Eimeriatenella 鷄胎兒 培養에 관한 硏究 = Studies on Purification for Coccidia and Cultivation of Eimeria tenella in Chicken Embryo

국문 초록 (Abstract)

닭의 盲腸 部位에 寄生하는 Eimeria tenella 原蟲의 大量增殖 方法에 Oocys를 經口投與 하는 方法보다 脫襄시킨 純粹 Sporozoite를 닭의 總排泄腔을 經由하여 盲腸에 直接 接種시키는 方法이 純粹度와 Oocyst 生産에 有利하였는데 Sporozoite 10^(4)을 3週齡 SPF 닭에 接種할때 8일後 個體當 5×10^(5.8)의 oocyst를 盲腸에서 純粹分離하였다.
Sporozoite를 接種하기 위한 鷄胎兒의 알맞은 日齡은 10日齡으로 鷄胎兒 當 Oocyst 生産量은 10^(5.3 ± o.2) 이였으며 8日齡에서는 Oocyst의 生産量이 매우 적었다.
鷄胎兒의 接種部位에 따른 Oocyst의 생산은 尿膜腔內에 接種하는 것이 가장 優秀하였고 樣膜藝, 卵黃裏, 靜脈에서는 分化하지 못했으며 CAM 接種에서는 적은량의 Schizont를 발견할수 있으나 gamete 와 Oocyst로 分化하지는 못했다.
鷄胎兒의 尿膜腔에 Sporozoite를 接種하여 41℃ 에 培養하면 接種 後 144時間에 CAM의 沈澱尿酸墮에서 Oocyst를 발견할수 있으며, 鷄胎兒當 Oocyst生産量은 接種後 8일에 10^(5.3)收穫하였고 7일에는 10^(4.8)을 收穫하였다.
胞子形成率은 接種後 8일은 24.3%, 접종후 7일은 34.3%로 7일에 收穫한 Oocyst의 胞子 形成率이 높았는데 8일후 收穫한 Oocyst의 胞子形成率이 떨어지는 것은 受精 後 高溫培養으로 生存力이 低下하는 原因이며 Edgar의 報告와 一致하였다.
많은 Oocyst는 尿膜液과 CAM의 沈澱 尿酸□에 대부분 分布하고 있었으며 樣膜腔, 卵黃蘿, 靜脈 둥에서는 發見할 수 없었다.
LD_(50)은 鷄胎兒當 Sporozoite 5×10^(3)으로 Long과 유사하게 나타났으며 鷄胎兒의 斃死는 接種量의 增加에 따라 Coccidiosis로 斃死하였다.
Sporozoite의 알맞은 接種量은 10^(3±0.2)였으며 斃死率은 12.5%로 Sporozoite를 接種하지 않은 鷄胎兒의 斃死率과 큰 차이가 없었다.
本 試驗의 結果 Oocyst를 생산하기 위한 鷄胎兒에서 最適 條件은 9~12일령 鷄胎兒의 尿膜腔에 純粹分離된 Sporozoite 10^(3)을 接種하여 41℃로 培養하고 接種後 7~8일에는 38℃ 로 培養溫度를 낮춰 受精率을 높이며 接種 8일후 鷄胎兒의 尿膜液과 CAM의 沈澱 尿酸癩에서 收穫하는 것이 鷄胎兒에서 Eimeria tenella 의 Oocyst 生産 最適條件이었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Sporozoites inoculated into the cecal of 3 weeks SPF chicken through thecloaca for the propargation and furification of Eimeria tenella and ×10^(5.8) Oocyst was recovered.
The population of Oocyst and mortality rate of chicken embryo ating were affected by culture condition of Eimeria tenella.
Maximum Oocyst yield were obtained inoculated with 10^(3) sporozoite in 10 days chicken embryo on 8th day after inoculation and yield of oocysts eas 1×10^(5.3±0.2).
Nine to ten days chicken embryos suitable to culture host of E. tenella because vigorous cell differentiation of CAM observed at 9 days after incubation.
The allantoic cavity was proper route of inoculation for the Oocyst production and the numbers of Oocyst per chicken embryo were 1 × 10^(5.3). Cell division multiplication observed in inner-cell membrane of CAM after Sporozoite inoculation, and 1st, 2nd and 3rd generation Schizont produce a large quantity of merozoite at 48 hours, 72 hours and 144 hours after inoculation, respectively.
Macrogametocyte differentiation appeared by the 168 hours and sufficient Oocyst obtained after 7 to 10 days of inoculation.
Maximum yield of Oocyst recovered on the 8th day after inoculation that was 1 × 10^(5.3) and significantly higher than the 7th day.
Most of Oocysts observed in the orate deposits of CAM and very few Oocysts appeared in the allantoic fluid.
The sporulation rate of harvested Oocysts on 7th and 8th day after inoculation showed 50.1% and 31.6%, respectively.
It was conclude that the high temperature culture(41℃) decrease the fertilization rate as time goes by.
Inoculation of Sporozoite cause coccidiosis with haemorrhage and an inoculum of 10^(3), 10^(4) and 10^(5) sporozoites killed 12.5%, 79% and 100% of of eggs from coccidiosis on 7th days after inoculation.

목차 (Table of Contents)

• 목차
• ABSTRACT = 1
• Ⅰ. 緖論 = 3
• Ⅱ. 材料 및 方法 = 6
• Ⅲ. 結果 및 考察 = 9
• 1. Eimeria tenella의 增殖 및 純粹分離 = 9
• 2. Sporozoite 의 脫囊 = 9
• 3. 鷄胎兒에 Sporosoite의 接種 = 10
• 4. 鷄胎兒 接種 後 Oocyst의 分布部位 및 生産量 = 11
• 5. 鷄胎兒 接種 後 Oocyst의 生産量과 胞子形成率 = 12
• 6. 鷄胎兒에서 接種 일령별 Oocyst의 生産量 = 13
• 7. 콕시듐증에 의한 鷄胎兒의 斃死率 = 14
• 8. 鷄胎兒 接種量에 따른 Oocyst의 生産量 = 15
• 9. 鷄胎兒 斃死率과 接種量에 있어서 Oocyst의 最大 生産函數 = 17
• Ⅳ. 摘要 = 18
• 寫眞附圖 = 20
• 參考文獻 = 25