초임계유체를 이용한 산겨릅나무의 독성 성분 제거 및 구조 확인 = Removal and identification of toxic compounds from Acer tegmentosum using supercritical fluid extraction

국문 초록 (Abstract)

산겨릅나무(Acer tegmentosm Maxim)는 높이 10～15 m의 단풍나무과 식물로 한국의 민간에서는 벌나무 또는 산청목이라 불린다. 산겨릅나무는 해발 500～1000 m의 성긴 숲에서 자란다. 이런 특징을 가지는 산겨릅나무는 지방간, 간염, 간경변증, 간암에 뚜렷한 치료 작용이 있으며, 특히 간에 쌓인 독을 풀고 간세포를 살리는 효능이 있어 약용으로 많이 사용된다. 그러나 산겨릅나무에는 독성물질이 있어 안전성, 오남용 등의 문제점을 가지고 있는 실정이다. 그래서 산겨릅나무의 독성물질을 제거하고 독성물질에 대한 연구를 활발히 하기 위해 먼저 초임계유체 추출기법(SFE, Supercritical Fluid Extraction)을 이용하였다. 이 초임계유체 추출 실험은 산겨릅나무의 줄기, 수피, 그리고 내피 부분으로 나누어 실험하였다.
초임계유체 추출에서의 최적의 실험 조건들은 압력 100 bar, 추출온도 40 ℃로 구성하고 초임계 CO2의 유속은 3 mL/min과 modifier인 에탄올 0.2 mL/min으로 흘려주어 실험 한 것이다.
또한 독성 연구를 위해 실리카 겔 컬럼을 이용하였는데 이때 사용한 최적의 이동상 조건은 [chloroform : hexane : methanol = 6 : 2 : 2] 이었다. 컬럼을 통해 분리 된 시료는 2개의 분획으로 분리되었다.
독성 연구를 위해 이 분리된 시료를 각각 HPLC와 LC/MS/MS를 통하여 그 구조를 확인하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The Acer tegmentosm Maxim is a 10～15 m tall tree belonging to the Acereaceae. It is known locally in Korea by its popular names "Beolnamu" and "Sancheongmok". It grows at 500～1,000 meters above sea level. It is efficient in liver disease treatment but it include toxic compounds.
In this study, toxic compounds from Acer tegmentosm was extracted using supercritical fluid extraction(SFE).
In the experiments, extracts were taken from stems, barks and endothelium.
The optimum condition of SFE was 100 bar of pressure, 40 ℃ of extraction temperature, 3 mL/min of CO2 fluid rate, 0.2 mL/min of modifier(ethanol) fluid rate and two times of extraction time.
The fractionated extracts was chromatographed over a silica gel column using a gradient solvent system of [chloroform : methanol : hexane = 6 : 2 : 2] to give two fractions.
The two fractions were analyzed by HPLC and LC/MS/MS.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 = 1
• Ⅱ. 실험 = 8
• 1. 실험 재료 = 8
• 2. 초임계유체 추출장치 = 8
• 3. 초임계유체 추출을 이용한 산겨릅나무의 독성성분 제거 = 10
• 4. 산겨릅나무의 세포독성 평가 = 11
• 5. 실리카 겔 크로마토그래피를 이용한 독성물질의 분리 = 13
• 6. HPLC를 이용한 독성물질의 확인 = 15
• 7. 독성물질을 포함한 분획의 LC/MS/MS = 16
• Ⅲ. 결과 및 고찰 = 17
• 1. 초임계유체를 이용한 산겨릅나무의 독성제거 실험 및 세포독성 평가 = 17
• (1) 산겨릅나무 줄기 = 17
• (2) 산겨릅나무 수피 = 21
• (3) 산겨릅나무 내피 = 27
• 2. 독성물질의 분획 확인을 위한 HPLC 조건의 최적화 = 30
• 3. 독성물질의 분리를 위한 이동상의 종류와 이동상 비율의 최적화 = 37
• 4. 독성물질을 포함한 분획의 LC/MS/MS = 48
• Ⅳ. 결론 = 53
• Ⅴ. 참고문헌 = 55
• 영문초록 = 57