효모에서 Kluyveromyce marxianus와 Aspergillus niger exoinulinase 유전자의 발현 = Expression of Kluyveromyce marxianus and Aspergillus niger exoinulinase gene in Saccharomyces cerevisiae

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

To use inulin, a vector was constructed expression the INU1 gene of Kluyeromyces marxinus and inuF gene of Aspergillus niger for exoinulinase, and introduced into several Saccarmyces cerevisiae stains. S. cerevisiae YSH 2.64-2C produced the highest activity among five strains used as a host, when fructose was supplemented as a sole carbon source.
The gemomic DNA encoding exoinulinase A. niger ATCC 6275 was cloned and sequenced. Open reading framse (ORFs) of the exoinulinase gene, inuF, consisted of 1,671 nucleotides encoding 537 amino acids and intron consisted of 60 nucleotides. A. niger enzymes showed 48% identity with that of the Penicillium purpurogenum exoinulinase, but 90% identity with that of the Aspergillus awamori exoinulianse.

목차 (Table of Contents)

• 목차 = ⅰ
• List of table = ⅲ
• List of Figures = ⅳ
• ABSTRACT = ⅴ
• 서론 = 1
• 재료 및 방법 = 5
• 균주 및 배양조건 = 5
• 제한효소 및 시약 = 7
• DNA 분리 = 8
• Southern, Northern, & colony hybridization = 10
• 외래 형질을 도입할 수 있는 Vector plasmid 제조(INU1) = 13
• pRCYIN1에 의한 yeast의 형질전환 및 활성측정 = 14
• A. awamori로부터 exoinulinase의 probe 제작 = 15
• A. niger로부터 RNA 분리 및 mRNA 분리 = 16
• Full length cDNA clone 확보 = 17
• 외래 형질을 도입할 수 있는 vector plasmid 제조(inuF) = 17
• 결과 = 23
• S. cerevisiae에 exoinulinase overexpression vector(pRCYIN1) 삽입 = 23
• 탄소원에 따른 활성도 측정 = 23
• 유전자 재조합 효모의 알코올 생성능 측정 = 24
• Aspergillus sp.에서 exoinulinase gene 탐색 = 24
• inuF full gene 분리와 염기서열 결정 = 25
• inuF의 cDNA clone 분리 = 25
• S. cerevisiae에 overexpression vector(pYECIF2)) 삽입 = 26
• 고찰 = 37
• S. cerevisiae에서 exoinulinase(K. marxianus의 INU1) 활성과 알코올 생성능 비교 = 37
• A. niger에서 inuF의 분리 및 염기서열 분석 = 37
• 참고문헌 = 39