신종코로나바이러스의 뉴클레오캡시드에 대한 단일클론항체 개발 및 이의 응용 가능성 평가 = Development of Monoclonal Antibodies against Nucleocapsid of a Novel Coronavirus and Evaluation of Their Potential Applications

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 1
• 1. 코로나바이러스의 특징 1
• 2. 신종코로나바이러스의 특징 및 현황 5
• 3. 신종코로나바이러스의 감염경로 및 돌연변이 7
• 4. 신종코로나바이러스 진단법의 종류와 장단점 10
• 5. 본 연구의 목적 15
• Ⅱ. 재료 및 방법 16
• 1. 하이브리도마 세포주 제작 및 선별 16
• 1.1. 하이브리도마 제작 16
• 1.1.1. 면역플레이트 제작 16
• 1.1.2. 마우스 면역화 및 항체 역가분석 16
• 1.1.3. 세포 융합을 통한 하이브리도마 제작 17
• 1.2. 하이브리도마 선별 18
• 2. 하이브리도마 세포주의 부유배양을 통한 대량 생산 조건 탐색 19
• 2.1. 하이브리도마 세포주의 부유배양 조건 확립 19
• 2.2. 부유배양을 통한 단일클론항체의 대량 생산 19
• 3. 단일클론항체의 정제 및 특성 분석 20
• 3.1. 친화성 크로마토그래피 기법을 이용한 단일클론항체의 정제 20
• 3.2. 단일클론항체의 생화학적 특성 분석 21
• 3.2.1. 단일클론항체의 전기영동 21
• 3.2.2. 단일클론항체의 이소타입 분석 21
• 3.2.3. 단일클론항체의 결합 친화도 분석 22
• 3.2.4. 단일클론항체의 교차 반응성 확인 22
• 3.2.5. 웨스턴 블롯을 통한 반응성 확인 23
• Ⅲ. 결과 및 고찰 25
• 1. 하이브리도마 세포주 제작 및 선별 25
• 1.1. 면역화가 진행된 마우스의 항체 역가 확인 25
• 1.2. 하이브리도마 선별 25
• 2. 하이브리도마 세포주의 부유배양을 통한 대량 생산 조건 탐색 27
• 2.1. 하이브리도마 세포주의 부유배양 조건 확립 27
• 2.2. 부유배양을 통한 단일클론항체 대량 생산 30
• 3. 단일클론항체의 정제 및 특성 분석 33
• 3.1. 친화성 크로마토그래피 기법을 이용한 단일클론항체의 정제 33
• 3.2. 단일클론항체의 생화학적 특성 분석 33
• 3.2.1. 단일클론항체의 전기영동 결과 33
• 3.2.2. 단일클론항체의 이소타입 분석 33
• 3.2.3. 단일클론항체의 결합 친화도 분석 37
• 3.2.4. 단일클론항체의 교차 반응성 확인 37
• 3.2.5. 웨스턴 블롯을 통한 반응성 확인 37
• Ⅳ. 결론 45
• 참고문헌 47
• ABSTRACT 54