Affinity Chromatographic and Immunochemical Analysis of the Single Zone Lactate Dehydrogenases = 단일대 젖산수소이탈효소의 affinity chromatography 및 면역화학적 분석

국문 초록 (Abstract)

초산 셀룰로우즈 전기동영상에서 단일대를 나타내는 Gallus 및 Parasilurus asotus의 젖산수소이탈효소(LDH)에 대하여 affinity chromatography 및 면역확산 실험을 실시하였다.
CNBr에 의해 활성화된 Sepharose-4 B에 이 단일대 LDH를 크로마트그라피한 결과 5가지 대를 갖는 LDH들에서와 마찬가지로 NAD분획과 NADH분획으로 분리되었다. 순수정제한 3가지 동위효소에 대한 항혈청과 몇가지 효소 추출액사이의 항원-항체 반응에 참여하지 못한 LDH를 전기영동한 결과 단일대 LDH의 형성에 두 가지 동위효소가 모두 관여하고 있음이 확인되었다. 이러한 결과들로부터 단일대의 LDH들은 상이한 동위효소들의 혼합체라고 사료된다.
본 affinity chromatography에서도 NAD가 이질사량체의 H 하부단위체에 결합할 경우 사량체의 conformation이 변화됨이 재확인되었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Lactate dehydrogenase (LDH) isozymes of Gallus gallus and Parasilurus asotus, which demonstrate single zone in cellulose acetate electrophoresis, were subjected to affinity chromatography and immunodiffusion tests.
Affinity chromatography of the single zone LDHs on Sepharose-4B activated by CNBr resulted in the separation of the enzymes into the NAD and NADH fractions just as that of the five zone LDHs. The electrophoresis of LDH isozymes not participated in the antigen-antibody complex formation between several enzyme preparations and the antisera against three purified proteins revealed that both subunits take part in the formation of LDH which shows one zone in the electrophoresis. These results fit with the suggestion that the single zone LDH might be a mixture of different isozymes.
It was reaffirmed in this affinity chromatography that the binding of NAD to the H subunits in a heteropolymer alters the conformation of the tetramers.