연구목적: Human a-Synuclein과 phospholipid membrane과의 상호작용기전을 이해하고자, fluorescence-labelled phospholipld liposome을 이용하여 a-Synuclein 의 phospholipid membrane bmding을 정량분석하는 기술블 개발하고...
연구목적: Human a-Synuclein과 phospholipid membrane과의 상호작용기전을 이해하고자, fluorescence-labelled phospholipld liposome을 이용하여 a-Synuclein 의 phospholipid membrane bmding을 정량분석하는 기술블 개발하고, 이를 human a-Synuc1ein 의 mulant 에 적용 하고자 히였다.
대상 및 방법: Cholesterol. phosphatidylcholine, phosphatidyserine으로 구성된 phospholipid liposome을 만들어 GST-융합 재조합 단백질로서 발현된 human a-Synuclein의 wild type 및 pathogenic mutant (A30P, E46K, A53T)와의 binding을 측정하였다.
결과: 형광표지를 이용한 liposome binding assay를 개발하고, 단백질 및 phospholipid 농도, 반응시간 및 온도 등 여러 가지 조건을 최적화 하였다. 이 조건에서 human a-Synuclein의 phospholipid liposome에 대한 binding 강도는 A30P < A53T ~ wild tupe M < E46의 순서였다.
결론: 본 연구에서 개발한 liposome binding assay는 앞으로 a-Synuclein의 구조와 기능을 연구하는데 유용한 연구수단으로 이용될 수 있을 것으로 예상된다.