Inhibition of Initiation of Simian Virus 40 DNA Replication in Vitro by the Pentacyclic Triterpene Acide = Pentacyclic Triterpene acids에 의한 SV40 DNA 복제과정의 저해

국문 초록 (Abstract)

Pentacyclic triterpene acids계인 ursolic acid (UA)와 oleanolic acid (OA)는 화학적으로glucocorticoid 호르몬의 구조와 유사하다. 본 연구에서는 in vitro simian virus (SV40) DNA 복제시스템을 사용하여 UA와 OA가 DNA 복제에 미치는 영향에 대해 알아보았다. UA와 OA는 다른 항암제와 마찬가지로 SV40 DNA 복제과정을 저해하였고, 복제 시작단계를 우세하게 저해하였다. 또한, UA와 OA는 initiation reaction 동안에 복제포크에 필요한 단백질을 저해할 것으로 생각되었다. 이와 같은 가능성을 알아보기 위하여 topoisomerase I (topo I)의 촉매활성과 replication protein A (RPA)와 ssDNA 결합 활성에 미치는 UA와 OA의 영향을 알아보았다. UA는 20 μM 농도에서 topo I의 활성을 강하게 저해하였지만, OA는 같은 농도에서 약하게 저해하였다. 그리고, UA는 RPA의 결합 활성을 현저하게 감소시키는 반면, OA는 RPA의 결합 활성을 약간 감소시켰다. 따라서, UA나 OA는 하나의 특정 단백질을 저해하기보다는 복제포크에 필요한 몇 개의 단백질을 저해하였으며, 복제포크에 필요한 DNA-단백질 복합체를 저해할 것으로 생각된다. 또 다른 흥미로운 점은, UA가 OA보다 SV40 DNA복제 억제효과가 큰 점으로 미루어 보아 C19-C20위치의 configuration이 생물학적인 활성에 강하게 영향을 줄 수 있다는 사실이다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Ursolic acid (UA) and Oleanolic acid (OA), which are pentacyclic triterpene acids, are similar to glucocorticoid hormone in chemical structure. In this study, the effects of the UA and OA on DHA replication were examined using simian virus (SV40) DNA replication in vitro. We found that, like many antitumor agents, UA and OA inhibited SV40 DNA replication, and predominantly inhibited the initiation stage of DHA replication. We suggest that triterpene acids might inhibit some protein required to establish replication forks during the initiation reaction. To address this possibility, we examined whether UA and OA inhibit topoisomerase I (topo I) activity and replication protein A's (RPA) ssDNA binding activity. UA, at 20 μM, inhibited the DNA cleavage by topo I, but OA showed little inhibitory effect at same concentration tested. UA also significantly reduced RPA's activity, whereas OA showed little effect. It is therefore possible that UA and OA might interfere with some molecules that is required to establish replication forts. Based on their properties, we conclude that triterpene acids might inhibit DNA-protein complexes required to establish replication forks during the initiation reaction. Furthermore, in view of the fact that UA have more inhibitory effect on

목차 (Table of Contents)

• Abstract
• Ⅰ. Introduction
• Ⅱ. Materials and Methods
• Ⅲ. Results
• Ⅳ. References