분열 효모 Spy1 유전자의 분리, 특성 및 발현

국문 초록 (Abstract)

  분열효모 Schizosaccharomyces pombe 내의 스트레스 반응 조절 유전자로 추정되어지는 Spy1이라는 새로운 유전자의 기능을 규명하고자 하였다. 분열 효모의 genomic DNA로부터 구조적 유전자를 증폭하였고, 이를 shuttle vector인 pRS316과 ligation을 통해 재조합된 플라스미드 pYFSpy1을 생성하였다. Cloned Rad9 gene을 1,437 bp의 nucleotid sequence를 포함한다, 이 중 295 아미노산 서열부분이 암호화되었으며, 이 분자의 분자량은 32,550 Da이다. 아미노산 서열은 phosphptransmitter protein인 YPD1으로 추정되어지는 Aspergillus clavat NRRL1과 Saccharomyces cerevisia YPD1과 높은 homology를 가진다. 또한, 이 DNA 서열은 1,233 bp의 upstream 부분을 가지고 있다. Schizosaccharomyces pombe 내에 재조합되어진 pYFSpy1을 도입한 후 Spy1의 mRNA 발현수준 정도를 조사 한 결과 pYFSpy1의 mRNA 발현이 증가하였다. 그러므로 cloned Spy1 gene이 기능 가진다는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 유전자의 특징, 조절 양상을 규명하고자 분열효모 유전자의 1,233 pb upstream region만을 증폭하여 YEp367R shuttle vector 와 ligation을 통해 재조합된 플라스미드 pYUSpy1을 생성하였다. β-galactosidase 구조 유전자와 fusion 시킨 재조합 plasmid pYUSpy1을 얻었다. Spy1-β-galactosidase 융합유전자가 함유된 pYUSpy1을 분열효모 S. pombe에 도입한 후 β-galactosidase 활성을 측정함으로서 Spy1 유전자의 발현 양상을 조사하였다.

목차 (Table of Contents)

• 요약
  1. 서론
  2. 재료 및 방법
  3. 결과 및 토의
  4. 참고문헌