Epigallocathechin gallate가 인체 유방암세포인 MDA-MB-231의 세포 증식과 사멸에 미치는 영향

국문 초록 (Abstract)

본 연구는 녹차의 성분인 epigallocatechin gallate (EGCG)가 인체 유방암 세포인 MDA-MB-231의 증식과 사멸에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. EGCG가 MDA-MB-231의 세포 증식에 미치는 영향을 알아보기 위해 MTT assay를 실시하였으며 세포증식 관련인자인 ErbB2, ErbB3 와 증식 신호 전달 단백질 Akt, 사멸억제 단백질 bcl-2, 사멸유도 단백질 bax 등을 western blot analysis를 통해 단백질 발현을 관찰하였다. RT-PCR을 이용하여 위 단백질의 mRNA 발현을 관찰하였다. 실험 결과 EGCG를 처리한 24시간 후에는, 세포증식 억제에 영향을 미치지 않았으나 48시간, 72시간 후에는 유의적으로 EGCG처리 농도가 증가할수록 세포증식이 억제 되었다. 세포 성장 신호를 전달하는 수용체인 ErbB2와 ErbB3 단백질의 발현은 10 ㎛ 이상일 때 유의적으로 감소하였으며 mRNA 발현은 5 ㎛이상일 때 유의적으로 감소하였고 세포 증식 신호 전달 단백질인 Akt 발현은 EGCG의 처리 농도가 10 ㎛ 이상일 때 단백질과 mRNA 발현이 유의적으로 감소하였다. 세포 사멸을 억제하는 단백질인 bcl-2의 단백질과 mRNA 발현은 EGCG 처리 농도 5 ㎛ 이상일 때부터 유의적으로 감소하였으며, 세포 사멸을 유도하는 단백질인 bax의 발현은 5 ㎛ 이상부터 유의적으로 증가하였다. 두 단백질의 비율인 bcl-2/bax는 10 ㎛이상의 농도에서 유의적으로 감소하였다. Caspase-3의 활성은 5 ㎛ 이상부터 유의적으로 증가 하였다. 그러므로 EGCG가 인체 유방암 세포인 MDA-MB-231에서 세포증식을 억제하고, 사멸을 유도하는 것을 확인하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

EGCG, a principal antioxidant derived from green tea, is one of the most extensively investigated chemopreventive phytochemicals. However, the effect of EGCG on proliferation and apoptosis in MDA-MB-231 breast cancer cell are not currently well known.
In this study, we examined possible mechanisms of regulator protein which is associated with proliferation and apoptosis and caspase activity by EGCG in MDA-MB-231 breast cancer cells. We cultured MDA-MB-231 cells in presence of various concentrations (0, 5, 10 ,20 ㎛) of EGCG. EGCG inhibited breast cancer cell growth in a does-dependent manner (p〈 0.05) by MTT assay. ErbB2, and ErbB3 protein expression were significantly decreased does-dependently in cells treated with EGCG (p〈 0.05). In addition, phosphorylated Akt levels and total Akt levels were significantly decreased in cells treated with EGCG. Bcl-2 protein and mRNA expression were also decreased does-dependently in cells treated with EGCG. However, bax protein and mRNA expression was increased (p〈 0.05). Caspase-3 activity was increased does-dependently in cells treated with EGCG.
In conclusion, we have shown that EGCG inhibits cell growth and induces apoptosis in MDA-MB-231 human breast cancer cells

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 = 1
• Ⅱ. 문헌고찰 = 3
• 1. 암 발생빈도 = 3
• 2. 녹차와 epigallocatechin gallate의 항암효과 = 3
• 3. 암 세포증식 = 5
• 4. 암 세포사멸 = 6
• 1) 암 세포 사멸과 세포괴사의 형태 = 6
• 2) 암 세포 사멸의 주요 경로 = 7
• Ⅲ. 재료 및 방법 = 9
• 1. 재료 = 9
• 2. 세포 주 및 세포 배양 = 9
• 3. 세포증식 실험 (MTT assay) = 9
• 4. 단백질 발현 실험 (Western blot analysis) = 10
• 5. mRNA 발현 실험 (RT-PCR) = 11
• 6. Caspase-3 활성 실험 = 14
• 7. 통계처리 = 14
• Ⅳ. 실험 결과 = 15
• 1. 세포증식 = 15
• 2. 세포증식과 관련된 단백질 및 mRNA 발현 = 15
• 1) ErbB2와 ErbB3의 단백질 및 mRNA 발현 = 15
• 2) Akt의 단백질 및 mRNA 발현 = 15
• 3. 세포 사멸과 관련 있는 단백질 = 25
• 1) Bcl-2와 bax의 단백질 및 mRNA 발현 = 25
• 2) Caspse-3 활성 = 25
• Ⅴ. 고찰 = 32
• Ⅵ. 요약 및 결론 = 37
• 참고문헌 = 39
• Abstract = 47