소아의 Adenovirus 호흡기 감염증

표진원,이환종 대한감염학회 1996 감염 Vol.28 No.6

목적 : Adenovirus는 항원성에 따라 42가지 이상의 혈청형이 알려져 있으며, 소아 호흡기 감염의 중요한 병원체의 하나이나, 국내에서는 이에 대한 보고가 아직 없다. 이에 저자들은 비 흡인물(nasal aspirate)에서 임상 양상 및 adenovirus가 분리된 호흡기 감염증 환아들의 임상 양상 및 adenovirus의 혈청형을 분석하여 향후 이 질환의 진단과 치료 및 예방에 도움이 되고자 하였다. 방법 : 1990년 12월부터 1995년 3월까지 호흡기 감염 증상을 주소로 서울대학교 소아병원 소아과에 내원한 환아들의 비 흡인물을 채취하여 단클론 항체를 이용한 면역 형광염색법 및 HEp-2세포를 이용한 바이러스는 적혈구 응집억제 시험으로 혈청형을 결정하였다. Adenovirus가 분리된 59례 중 다른 바이러스와 중복 감염이었던 8례를 제외한 나머지 중 의무기록을 확인할 수 있었던 34명의 환아들의 병록을 고찰하여 그 임상 양상을 분석하였다. 결과 : 34례의 검체 중 23례에서 adenovirus의 혈청형이 확인되었던 바, 2형(8례), 3형(6례), 4형(3례), 5형(3례), 6형(2례) 및 1형(1례) 등이 확인되었다. 연구 기간 중 특별한 유행없이 산발적으로 발생하였고, 환아들의 연령은 6개월에서 5세사이가 23례(67.6%)로 가장 많았다. 임상양상은 폐렴이 23례(67.6%)로 가장 많았고, 모세기관지염이 6례(17.6%), 급성 기관지염이 3례(8.8%), croup과 인두결막열이 각각 1례(2.9%)씩 이었다. 선행 각 질환이 없었던 30명의 환아 중 25명에서 간 기능검사를 시행한 바, 17례(68.0%)에서 간 기능이상을 보였으나 선천성 심질환 등의 선행 질환이 없었던 경우 후유증 없이 정상으로 회복되었다. 폐렴의 흉부 X선 소견은 폐나 폐문주위의 침윤, 과환기, 기관지 공기조영, 흉막 삼출 등의 다양한 형태로 나타났다. 총 34명의 환아 중 3명(8.8%)이 사망하였으며, 2명은 복합성 심장기형이 있었고, 1례는 선천성 갑상선 기능 저하증 환아로 만성 설사를 하고 있었다. 결론 : 이상의 결과에서 adenovirus는 소아 호흡기 감염의 중요한 원인의 하나로서, 주로 6개월에서 5세 사이의 소아에서 시만 호흡기 감염을 일으킬 수 있으며, 특히 선천성 심질환이나 면역 기능이 저하된 환아의 경우는 사망과도 연관되어 있었다. 향후 이에 대한 진단과 치료뿐만 아니라 예방에 대한 연구를 더욱 진행시켜야 할 것으로 사료된다. Background : Adenovirus is an important cause of respiratory tract infections in children and more than 42 serotypes have been recovered from humans. The reports on adenoviral respiratory tract infections of Korean children has not been reported previously. This study was performed to characterize the clinical feature of adenoviral respiratory infection and establish the serotypes of adenovirus isolated from Korean children. Methods : Thirty-four cases of respiratory tract infections associated with isolation of adenovirus from nasal aspirates were reviewed retrospectively. The patients were seen at the Seoul National University Children's Hospital during the period from Dec., 1990 to Mar., 1995. Adenoviruses were isolated in HEp-2 cell culture, and serotyped by hemagglutination-inhibition test. Results : During the study period, adenoviruses were isolated from 59 out of 1,032 episodes of respiratory tract infections. Thirty four cases were reviewed, excluding 8 with mixed infection with other viruses and 17 whose medical records were not available. Of 23 cases serotyped, type 2(8 cases), 3(6 cases), 4(3 cases), 5(3 cases), 6(2 cases) and 1(1 case) were identified. Adenoviruses were isolated sporadically throughout the year without any specific epidemic pattern. Sixty-eight percent of patients were between 6 months and 5 years of age. The spectrum of clinical diagnosis was broad such as pneumonia(67.6%), acute bronchiolitis(13.6%), acute tracheobronchitis(8.8%), croup(2.9%) and pharyngoconjunctival fever(2.9%). Associated symptoms included cough(97.1%), fever(91.2%), sputum(73.5%), rhinorrhea(55.9%), tachypnea(52.9%) and dyspnea(44.1%). Gastrointestinal symptoms such as vomiting and diarrhea in conjunction with respiratory infection also occurred frequently. Conjunctival injection was found in 23.5% of 34 cases. Seventeen (68.0%) of 25 cases without underlying liver disease had elevated liver enzymes such as AST and ALT. Nine cases required oxygen therapy for 1-11 days(mean 6.4 days). Three cases(8.8%) expired, 2 of whom had underlying complex heart disease and one had congenital hypothyroidism with chronic diarrhea. Conclusion : These data confirm that adenovirus is an important cause of respiratory tract infection in pediatric age, and suggest that adenovirus may cause rather severe disease with occasional fatal outcome in the immunocompromised children. Further studies on adenoviral respiratory tract infection are needed to diagnose, treat and prevent this illness.

Rotavirus 및 Adenovirus에 의한 급성 장염에 관한 비교 연구

권재봉,심재건,Kwon, Jae Bong,Sim, Jae Geon 대한소아감염학회 2000 Pediatric Infection and Vaccine Vol.7 No.1

목 적 : Rotavirus와 adenovirus는 영유아에서 급성장염을 유발하는 주요 원인인데 한국에서 adenovirus에 관한 연구 논문이 적어 저자들은 최근에 발생한 adenovirus와 rotavirus 장염의 분포를 조사하여 향후 질병 예방 및 발생 정보에 도움을 얻고자 연구 분석하였다. 방 법 : 1998년 3월에서 1999년 6월까지 대상으로 건국의대 부속병원에 급성 위장관염으로 입원 또는 통원 치료를 한 143명을 대상으로 하였다. 결 과 : 전체 환아 143명중 rotavirus 양성은 53명으로 37%의 양성률을 보였으며 1999년 1월에서 3월 사이의 초봄에 가장 많이 발생하였으며 2세 이하에서 가장 많이 발생함을 보였고 2~4세 사이에서도 16%의 양성률을 보였으며 9월에 전체 24례중 6례로 가장 많이 검출되었고 2개월에서 2세 사이에 많은 발생을 보였다. Adenovirus와 rotavirus에 동시 검출된 경우는 7명(5%)이였다. 결 론 : Rotavirus 장염은 1월부터 3월에 가장 많은 발생 빈도를 보여서 겨울 및 초봄에 유행시기를 보였으며 adenovirus는 9월에 가장 많이 검출 되었다. Rotavirus와 adenovirus의 발생의 중간 나이 분포는 각각 1세 4개월, 1세 3개월의 분포를 보였다. Purpose : Acute diarrhea in one of the most important diseases in children with high morbidity and mortality worldwide. Most of acute diarrhea is induced by viruses. Rotavirus and adenovirus are leading causes of severe gastroenteritis among infants and young children worldwide. Studies for adenovirus gastroenteritis in Korea are limited. We studied the prevalence of rotavirus and adenovirus gastroenteritis from March 1998 to June 1999 in Chungju area. Methods : Stool samples were collected from 143 children with acute diarrhea. Specimens were tested for group A rotavirus antigen and for adenovirus type 40 and 41 by using available commercial kits. Results : Among 143 samples, 37% were positive for rotavirus and 16% were positive for adenovirus. Rotavirus was most prevalent from January to March, 1999 and adenovirus was prevalent during September 1999. The greatest number of rotavirus infections occurred under 24 months of age, followed by 2~4 years of age. Adenovirus was most common in 2~24 months of age. Conclusion : Rotavirus was most prevalent in winter and early spring. In our study, rotavirus was prevalent in early spring and adenovirus was in autumn.

Adenovirus 7 형 폐렴후 Bronchiolitis Obliterans 발생에 관한 연구

김창근(Chang Keun Kim),정철영(Churl Young Chung),김정숙(Jung Suk Kim),이환종(Hoan Jong Lee),(Pedro A . Piedra) 대한소아알레르기호흡기학회(구 대한소아알레르기 및 호흡기학회) 1997 소아알레르기 및 호흡기학회지 Vol.7 No.2

목 적 : Adenovirus 7형 폐렴은 높은 치사율을 보이고 생존자 중에는 장기 합병증으로 brochiolitis obliterans(BO)를 포함하여 그의 변형(variant)인 Swyer-James 증후군이 올 수 있으며, 이 경우 천명 등의 만성적인 기관지 폐쇄중상을 보이고 영구적인 폐손상을 남기기도 한다. 본 연구의 목적은 adenovirus 7형 폐렴후 생존자들에서 장기 폐합병증의 하나인 BO의 발생을 규명하고, 그의 가능한 위험 인자를 알아 보고자 했다. 방 법 : 1996년 5월부터 1996년 7월까지 인제대학교 상계백병원 소아과 병동에서 adonovirus 폐렴으로 입원 치료를 받았던 39명의 환아중 바이러스 배양 및 혈청형 검사에서 adenovirus 7형 폐렴으로 확진된 11례를 연구 대상으로 하였다. 1년후(12.1±1.9개월) 대상환아 11명 모두를 소아과 외래로 불러 HRCT를 시행하고, 병력 고찰을 후향적 하고 1년동안의 임상 경과를 추적하였다. 결 과: 1) HRCT소견상, 7/11(64%)례에서 모자이크성 관류, 패혈관크기 감소, 기관지 확장중 등의 BO 소견(BO군)을 보였으며, 4/11(36%)례는 정상소견(Non-BO군)을 보였다. 2) 감염당시 환아들의 평균연령은, BO군(15.3±7.1개월)이 Non-BO군(35.3±14.2개월)보다 의미있게 어린연령이었다(P<0.05). 3) 감염당시 환아둘의 평균 발열기간은, BO군(14.4±2.8일)이 訓on-BO군(6.3±2.5일)보다 의미있게 길었다(P<0.01). 4) 감염당시 환아들의 평균 입원기간은, BO군(28.0±10.8일)이 Non-BO군(9.8±3.6일)보다 의미있게 길었다(P<0.01). 5) 성별비교에서는 두군간에 의미있는 차이가 없었다. 6) adenovirus감염전 천식이 있었던 경우는 4/11(36%)례였고, 이들모두 BO군에 속하였으며, 4례중 3례에서 지속적인 천명이 있었다. 결 론 : Adenovirus 7형 폐렴후의 생존자들의 64%에서 BO 및 그의 변형인 Swyer-james 증후군을 규명한 바 adenovirus 7형 폐렴은 BO와 밀접한 관계가 있으며, 또한 환아의 어린 나이, 긴 발열 기간, 긴 입원 기간 등이 BO발생의 가능성을 증가시키는 인자이다. Purpose: The purpose of this study was to document bronchiolitis obliterans, the long term pulmonary sequelae of adenovirus type 7 pneumonia, using High Resolution CT(HRCT) and to identify risk factors that increase the likelihood of developing bronchiolitis obliterans. Methods: Thirty-nine children were admitted to the Inje University, Sanggye Paik Hospital in the early summer of 1996 with clinical adenoviral pnemonia. Type 7 adenovirus was isolated from 11 children. All eleven were reassessed clinically and performed HRCT in 1997, one year (12.1±1.9 mo) after the adenovirus type 7 pnemonia. Results : Seven (64%) had HRCT findings of BO(BO group) including mosaic perfusion, attenuation of pulmonary vessel and bronchiectasis, Four(36%) had a normal HRCT finding(Non-BO group). The mean age of the children on admission was lower in BO group(15.3±7.1 mo) than Non-BO group(35.3±14.2 mo) (P<0.05). The mean duration of fever was longer in BO group(14.4±2.8 days) than Non-BO group(6.3±2.5 days)(P<0.01). The mean duration of initial hospital admission was longer in BO group(28.0±10.8 days) than Non-BO group (9.8±3.6 days)(P<0.01). But the sex ratio between the two groups was not statistically significant. Four of the seven BO group subjects had bronchial asthma, and three of the four patients had persistent wheezing. Conclusions : Adenovirus type 7 pneumonia is closely associated with bronchiolitis obliterans, the important long term pulmonary sequelae. The risk factors which increase the possibility of developing bronchiolitis obliterans are: the young age of the child, the long fever duration, and the long admission duration.

Helper virus-free gutless adenovirus (HF-GLAd): a new platform for gene therapy

Jida Liu,Dai-Wu Seol 생화학분자생물학회 2020 BMB Reports Vol.53 No.11

Gene therapy is emerging as a treatment option for inherited genetic diseases. The success of this treatment approach greatly depends upon gene delivery vectors. Researchers have attempted to harness the potential of viral vectors for gene therapy applications over many decades. Among the viral vectors available, gutless adenovirus (GLAd) has been recognized as one of the most promising vectors for in vivo gene delivery. GLAd is constructed by deleting all the viral genes from an adenovirus. Owing to this structural feature, the production of GLAd requires a helper that supplies viral proteins in trans. Conventionally, the helper is an adenovirus. Although the helper adenovirus efficiently provides helper functions, it remains as an unavoidable contaminant and also generates replicationcompetent adenovirus (RCA) during the production of GLAd. These two undesirable contaminants have raised safety concerns and hindered the clinical applications of GLAd. Recently, we developed helper virus-free gutless adenovirus (HF-GLAd), a new version of GLAd, which is produced by a helper plasmid instead of a helper adenovirus. Utilization of this helper plasmid eliminated the helper adenovirus and RCA contamination in the production of GLAd. HF-GLAd, devoid of helper adenovirus and RCA contaminants, will facilitate its clinical applications. In this review, we discuss the characteristics of adenoviruses, the evolution and production of adenoviral vectors, and the unique features of HF-GLAd as a new platform for gene therapy. Furthermore, we highlight the potential applications of HF-GLAd as a gene delivery vector for the treatment of various inherited genetic diseases.

Pocine Adenovirus-3의 E1B Region의 鹽基序列 分析

朴鍾賢,宋載永,李重馥,玄芳勳,安東濬,車相昊,裵用泰,姜永源,Reddy, P S,全茂炯,安壽煥 충남대학교 생물공학연구소 1999 생물공학연구지 Vol.7 No.-

돼지 아데노바이러스(PAV-3). 6618주의 EIB region이 包含되어 있는 map unit 4.0에서 9.7까지의 유전자에 대한 1,984 bp의 염기서열을 決定하였으며, 이 結果를 알려진 여러 아데노바이러스 유전자와 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. PAV-3의 EIB유전자는 10개의 ORF로 구성되어 있으며, 그 중 아데노바이러스의 단백질과 유사성이 있는 것은 ORF1, ORF2 및 ORF3이었다. ORF1은 Ad41의 19kd 와 BAV-2에서의 EIB ORF2에서의 아미노산의 一致率은 각각 32%와 31%이었다. 2. ORF2는 Ad2 55kd protein과 tupaia adenovirus 44kd protein가 각각 34%로 아미노산 一致率이 가장 높았으며, Ad41의 52kd protein. BAV-3의 EIB ORF3에서도 33%의 一致率을 보였다. 3. ORF1은 61-666 uncleotide (606 bp), ORF 2에서는 429-1,850 uncleotide (1,422 bp)의 부위로 각각 202, 474 a.a로 構成되었으며, 예상되는 분자량은 20 kd와 52 kd이었다. 4. ORF3는 hexon-associated pIX유전자로 추정되며 내부에 1개의 polyadenylation signal(ATAAA)이 1938-1942 uncleotide에 위치하였으며, 이 부위는 TATA box (1937-1942 uncleotide)와 중복되어 존재하였다. Porcine adenovirus type 3 (PAV-3) does not cause severe infection in pigs. Adenovirus has been suggestive of live vaccine vector carrying foreign gene. One of insertion regions is delayed early (EIB) region. However, EIB region of PAV-3 has not been molecularly characterized to date. Nucleotide sequence of EIB of PAV-3 was determined. The EIB region was composed of 1,984 bp and located between 4.0 and 9.7 map units. Three potential open reading frames(ORFs) with low level of homology to other adenoviruses and a polyadenylation signal were identified in the rightward direction of genome. The nucleotide and the predicted amino acid sequences of EIB were compared to those of human and animal adenoviruses. One of the three potential ORFs. ORF1 encoded a polypeptide homologous to bovine adenovirus type 2(BAV-2) ORF2 and human adenovirus type 41(Ad41) 19 kd protein. ORF2 encoded a polypeptide homologous to human adenovirus type 2(Ad2) 55 kd protein, bovine adenovirus type 3(BAV-3) ORF3 and porcine adenovirus type 4(PAV-4) ORF2. The predicted protein of ORF1 had homology to those of Ad41 and BAV-2 with 32 and 31% respectively, whereas the deduced protein of ORF2 had homology to those of Ad2. BAV-3 and PAV-4 with 34, 33 and 29%, respectively.

소아의 Adenovirus 하기도 감염증에 관한 연구 - 유행 양상과 임상 양상에 대하여 -

홍정연,이환종,Hong, Jung Youn,Lee, Hoan Jong 대한소아감염학회 2000 Pediatric Infection and Vaccine Vol.7 No.1

Purpose : The purpose of this study is to know the clinical manifestations and the severity of adenoviral lower respiratory tract infections(LRTI) in Korean children. Methods : Adenoviral respiratory infection was diagnosed by viral culture in HEp-2 cell and indirect immunofluorescent technique with nasal aspirates. Isolated adenoviruses were typed by neutralization test. Retrospective chart review was done in patients with adenoviruses were typed by neutralization test. Retrospective chart review was done in patients with adenoviral lower respiratory tract infection, who were brought to Seoul National University Children's Hospital from November 1990 through February 1998. Results : Adenovirus was isolated in 87 cases. Of 84 cases serotyped, type 1 was recovered in 3 cases, type 2 in 13 cases, type 3 in 13, type 4 and 5 in 4 cases each other, type 6 in 1 cases, type 7 in 36 cases, type 11 in 1 case and the other types in 9 cases. Adenoviral lower respiratory infection occurred sporadically throughout the year but from November 1995 through February 1998, an outbreak of adenovirus type 7 lower respiratory infection was observed in number upto 36 case. The incidence of adenoviral infection peaked in young children between 6 months and 5 years of age and the mean age was 1 year 11 months old. There were 10 cases of mixed infection with another pathogen. Clinical diagnosis were pneumonia(88%), acute broncholitis(5.4%), acute tracheobronchitis(5.4%), croup(1.3%). The clinical features of adenoviral lower respiratory infection were severe especially in type 3 and 7 infections in aspect of fever duration, ventilator care. Extrapulmonary manifestations were gastrointestinal symptoms in 23 cases(31%), hepatomegaly in 36 cases(53%), seizure and mental alteration in 13 cases(20.3%). In chest radiographic findings, parahilar and peribronchial infiltration were in 49 cases(67%), hyperaeration in 21 cases(29%), atelectasis in 14 cases(19%), consolidation in 39 cases(53%) and bilateral pneumonic infiltration in 28 cases(38%). Among thirty six adenovirus type 7 LRTI, 15 patients(41.6%) had pleural effusion and 3 patients had chest tube insertion. Number of fetal cases related to adenovirus were 9 cases(12%) and fetal cases due to ventilatory failure were 7(11%). Conclusion : During 7 year period of studying adenoviral lower respiratory infection, we identified the serotypes of adenovirus. Among the serotypes, adenovirus type 7 were epidemically isolated. Adenovirus were isolated in severe lower respiratory infection of young children aged between 6 months and 5 years and related to death of the patients, especially when the patients had underlyng diseases or were infected by adenovirus type 7. 목 적 : 우리나라 하기도 감염 소아에서 분리되는 아데노바이러스 각 혈청형의 유행 양상과 아데노바이러스에 의한 하기도 감염의 임상적 특징을 알아보고자 한다. 방 법 : 1990년 11월부터 1998년 2월까지 호흡기 감염증상을 주소로 서울대학교 어린이병원 소아과를 내원한 환아들을 대상으로 비흡인물을 채취하여 단일 클론항체를 이용한 면역 형광염색법 및 HEp-2 세포주를 이용한 바이러스 배양법으로 87례의 아데노바이러스에 의한 호흡기 감염증을 진단하고, 분리된 바이러스는 중화 항체 시험으로 혈청형을 결정하였다. 아데노바이러스 감염증이 확인되고 혈청형 결정 시험이 시행된 84명의 환아 중에서 혼합감염과 병록 고찰이 불가능한 환아들을 제외한 74명의 환아들의 병록 고찰을 하였다. 결 과 : 혈청형 검사가 시행된 84례 중에 7형이 36례로 가장 많았다. 그리고 나머지는 혈청형 1은 3례, 혈청형 2는 13례, 소아 혈청형군이 13례, 기타 혈청형군이 12례였다. 혈청형 7형은 95년 10월부터 97년 초까지 유행성으로 발병하였고 그 외의 다른 혈청형은 7형이 유행할 당시에는 거의 분리되지 않았다. 그 외의 기간 동안에는 98년을 제외하고는 7형은 분리되지 않았고 주로 2형과 3형이 연중 산발적으로 발생하였다. 환아의 평균 연령은 1년 11개월로 주로 6개월에서 5세 사이였고 6개월 이하의 영아도 14례 있었다. 아데노바이러스에 의한 폐렴의 흉부방사선 소견은 폐나 폐문 주위의 침윤, 과환기, 무기폐, 폐경화 등의 다양한 형태로 나타났으며, 정상소견도 있었다. 그러나 7형의 경우는 세균성 폐렴과 구별이 어려울 정도의 병변으로 폐경화와 늑막 삼출, 그리고 대엽성이나 소엽성 무기폐 등이 관찰되었고 양측 폐야를 동시에 침범한 경우도 7형에서 20례(55%)에서 있었다. 호흡곤란으로 인공호흡기 치료를 받는 경우는 혈청형 7의 36례 중의 14례(38.9%)였다. 사망한 환자는 총 9명(12%)이었고 그 중 호흡 부전으로 사망한 경우는 7명(9.4%)였다. 그 중 7례는 혈청형 7이 분리되었고 소아 혈청형군 1례와 2형이 1례씩 있었다. 결 론 : 아데노바이러스는 주로 6개월에서 5세사이의 소아에서 심한 호흡기 감염을 일으키며, 특히 혈청형 7형에 의한 심한 폐렴이나 선행질환으로 선선청 심질환이나 면역 기능이 저하된 경우 혹은 만성 폐질환을 앓는 경우에 사망과도 연관되는 것으로 생각된다. 과거 5년간 관찰되지 않던 7형에 의한 폐렴은 유행성으로 많은 정상 환아에서도 사망이나 심각한 후유증을 초래하였으므로 앞으로 이에 대한 진단과 치료 뿐만 아니라 예방에 대한 연구를 더욱 진행시켜야 할 것으로 생각된다.

신경세포의 퇴화기전이해와 신경성장인자를 이용한 신경재생촉진 연구(Ⅰ) : Recombinant leukmia inhibitory factor (LIF)-adenoviral vector를 이용한 신경재생 연구

조철만,안상미 국립보건연구원 1999 국립보건원보 Vol.36 No.-

폐렴으로 입원한 소아에서 Mycoplasma pneumoniae와 Adenovirus에 의한 혼합 감염에 대한 연구

박혜경,서주영,김경희 이화여자대학교 생명과학연구소 1993 생명과학연구논문집 Vol.4 No.-

There are many reports that mixed infection of respiratory tract caused by virus and bacteria are of current interest. However, there is almost no report about the study of mixed viral and bacterial respiratory infection in Korean children. The purpose of this study was to evaluate the Mycoplasma pneumoniae and adenovirus type 3 mixed infection in hospitalized children with pneumonia, with lower respiratory tract syndrome and others. Mycoplasma pneumoniae and adenovirus infection were serologically assyed by enzyme-linked immunosorbent assay. The results showed that 31.6%(18/57) of the hospitalized children simultaneously had antibodies against Mycoplasma pneumoniae and adenovirus type 3. In particular, the mixed infection rate was high in hospitalized children who were clinically suspicious of Mycoplasma pneumoniae infection. The mixed infection pattern was the combination of primary, past and reinfection of Mycolplasma pneumoniae and adenovirus type 3. Howereve, the leading type was the combination of primary Mycoplasma pneumoniae infection and past adenovirus type 3 infection, inferring that previous adenovirus infection predisposed to Mycoplasma pneumoniae infection. It was also detected a case of simultaneous primary Mycoplasma pneumoniae infection and adenovirus type 3 reinfection. Therefore, it should be taken clinical interest about mixed viral and bacterial respiratory infection.

Electrostatic interaction of tumor-targeting adenoviruses with aminoclay acquires enhanced infectivity to tumor cells inside the bladder and has better cytotoxic activity

Kim, Soo-Yeon,Kwon, Whi-An,Shin, Seung-Pil,Seo, Ho Kyung,Lim, Soo-Jeong,Jung, Yuh-Seog,Han, Hyo-Kyung,Jeong, Kyung-Chae,Lee, Sang-Jin Informa Healthcare 2018 DRUG DELIVERY Vol.25 No.1

<P><B>Abstract</B></P><P>In a previous report, 3-aminopropyl functionalized magnesium phyllosilicate (aminoclay) improved adenovirus transduction efficiency by shielding the negative surface charges of adenovirus particles. The present study analyzed the physicochemical characterization of the electrostatic complex of adenoviruses with aminoclay and explored whether it could be utilized for enhancing tumor suppressive activity in the bladder. As a result of aminoclay-adenovirus nanobiohybridization, its transduction was enhanced in a dose-dependent manner, increasing transgene expression in bladder cancer cells and in <I>in vivo</I> animal models. Physicochemical studies demonstrated that positively charged aminoclay led to the neutralization of negative surface charges of adenoviruses, protection of adenoviruses from neutralizing antibodies and lowered transepithelial electrical resistance (TEER). As expected from the physicochemical properties, the aminoclay enabled tumor-targeting adenoviruses to be more potent in killing bladder cancer cells and suppressing tumor growth in orthotopic bladder tumors, suggesting that aminoclay would be an efficient, versatile and biocompatible delivery carrier for intravesical instillation of adenoviruses.</P>

Human Papillomavirus E6 Knockdown Restores Adenovirus Mediated-estrogen Response Element Linked p53 Gene Transfer in HeLa Cells

Kajitani, Koji,Ken-Ichi, Honda,Terada, Hiroyuki,Yasui, Tomoyo,Sumi, Toshiyuki,Koyama, Masayasu,Ishiko, Osamu Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 2015 Asian Pacific journal of cancer prevention Vol.16 No.18

The p53 gene is inactivated by the human papillomavirus (HPV) E6 protein in the majority of cervical cancers. Treatment of HeLa S3 cells with siRNA for HPV E6 permitted adenovirus-mediated transduction of a p53 gene linked to an upstream estrogen response element (ERE). Our previous study in non-siRNA treated HHUA cells, which are derived from an endometrial cancer and express estrogen receptor ${\beta}$, showed enhancing effects of an upstream ERE on adenovirus-mediated p53 gene transduction. In HeLa S3 cells treated with siRNA for HPV E6, adenovirus-mediated transduction was enhanced by an upstream ERE linked to a p53 gene carrying a proline variant at codon 72, but not for a p53 gene with arginine variant at codon 72. Expression levels of p53 mRNA and Coxsackie/adenovirus receptor (CAR) mRNA after adenovirus-mediated transfer of an ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) were higher compared with those after non-ERE-linked p53 gene transfer in siRNA-treated HeLa S3 cells. Western blot analysis showed lower ${\beta}$-tubulin levels and comparatively higher p53/${\beta}$-tubulin or CAR/${\beta}$-tubulin ratios in siRNA-treated HeLa S3 cells after adenovirus-mediated ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) transfer compared with those in non-siRNA-treated cells. Apoptosis, as measured by annexin V binding, was higher after adenovirus-mediated ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) transfer compared with that after non-ERE-linked p53 gene transfer in siRNA-treated cells.