Enterococcus faecalis 특이적 박테리오파지의 분리와 특성규명

강희영,김석호,김정민,Kang, Hee-Young,Kim, Shukho,Kim, Jungmin 한국미생물학회 2015 미생물학회지 Vol.51 No.3

Enterococcus faecalis는 그람 양성의 조건 혐기성 세균으로 원내감염의 주요 원인균 중의 하나이다. E. faecalis에 특이적인 신규 박테리오파지 ECP3를 환경에서 분리하여 형태와 유전적 특성을 규명하였다. ECP3 파지는 형태적으로 수축성 꼬리를 갖는 미오비리대 과에 속하며 E. faecalis를 특이적으로 사멸하지만 Enterococcus faecium를 포함한 다른 세균은 사멸시키지 않았다. ECP3 파지의 게놈은 이중 선형 DNA로 GC 함량이 35.9%이었으며 크기가 145,518 bp이며 220개의 구조유전자로 구성되어 있었다. ECP3 게놈과 가장 유사한 염기서열은 미오비리대 PhiEF24C 파지이었으며 전체 게놈 90%의 영역에서 97%의 유사도를 보였다. ECP3 파지는 한국에서 처음 분리된 E. faecalis 미오비리대 파지이며 E. faecalis 감염에 대한 신규 항균제로서 유망하다. Enterococcus faecalis is a Gram-positive and facultative anaerobic bacterium that causes many hospital-acquired infections. Novel E. faecalis specific bacteriophage (phage) ECP3 that had been isolated from thirty-four environmental samples and characterized phenotypically and genotypically. ECP3 phage belongs to the family Myoviridae with contractile tail and lysed E. faecalis specifically but other bacteria including Enterococcus faecium. The genome was double-stranded linear DNA and its size was 145,518 bp comprising of 220 open reading frames. The GC content was 35.9%. The genome sequence showed 97% identity in 90% coverage region with Myoviridae phage PhiEF24C. ECP3 is the first E. faecalis-specific Myoviridae phage isolated in Korea which can be a promising antimicrobial agent against E. faecalis infections.

원유에서 분리한 Enterococcus faecalis MD366의 생리적 특성 및비만 억제 효과

박선영 ( Sun Young Park ),조성아 ( Seong A Cho ),한누리 ( Noo Ri Han ),임상동 ( Sang Dong Lim ) 한국유가공기술과학회 2014 Journal of Dairy Science and Biotechnology (JMSB) Vol.32 No.2

본 연구는 원유로부터 비만 억제 능력이 있는 젖산균을 분리 및 동정하고, 이균주의 생리적 특성을 규명하여 상업 적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 Modified MRS 분별배지를 사용하여 노란색 집락을 형성하는 균주를 대상으로 각각 Anti-lipase activity와 Anti-adipogenic activity가 우수한 균주를 선발한 결과, MD366 균주가 최종 선발되었다. MD366 균주는 lipase 억제활성 65.03±0.94%, 지방분화억제활성27.4±1.4%로나타났으며, 동정결과Enterococcus faecalis로 판명되었고, Enterococcus faecalis MD366으로 명명하였다. E. faecalis MD366의 최적 생장 온도는 37℃이 었으며, 담즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타내었다. 효소활성은 전반적으로 낮았으나 acid phosphatase 에 대해 비교적 높은 효소 활성을 나타내었다. 항생제 내성 실험 결과 neomycin, kanamycin, vancomycin에 내성이 있는 반면, novobiocin에 감수성을 나타냈으며, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium과 Staphyloccous aureus에 대해 각각 80.4%, 60.2%와 65.4%의 억제 효과를 지니고 있는 것으로 나타났다. The aim of this study was to investigate the physiological characteristics and anti-obesity effects of E. faecalis MD366 isolated from raw milk. E. faecalis MD366 inhibited lipase activity (65.0±0.9%) and differentiation of 3T3-L1 adipocytes (27.4±1.4%) at a concentration of 100 μg/mL (108 CFU/g E. faecalis MD366). The optimum growth temperature of E. faecalis MD366 was 37℃. Among 16 tested antibiotics, E. faecalis MD366 demonstrated the highest sensitivity to novobiocin and the highest resistance to neomycin, kanamycin, and vancomycin. The strain also showed high acid phosphatase activity. Moreover, E. faecalis was relatively tolerant to bile juice and acid, and displayed high resistance to Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, and Staphylococcus aureus (80.4%, 60.2%, and 65.4%, respectively). These results demonstrate that E. faecalis MD366 can be potentially used as a probiotic with anti-obesity effects.

Gentamicin 고도내성 Enterococcus faecalis균주의 항균제감수성, R-플라스미드 및 항원의 특성연구

강현(Hyun Kang) 대한의생명과학회 1995 Biomedical Science Letters Vol.1 No.1

임상검체에서 분리 동정한 E. faecalis균주에 대하여 gentamicin 및 타 항균제에 대한 감수성을 조사했고, R-플라스미드 DNA 패턴 및 제한효소에 의한 DNA 단편분석, filter-mating에 의한 gentamicin 플라스미드 DNA 전이, R-플라스미드 DNA 제거, tetracycline 내성 유전자 확인, 항원분석을 실시하였다. 분리된 40주 E. faecalis 모두가 gentamicin에는 내성이었고, 25주는 요 검체에서 분리되었으며, 이 40균주들 중 95%가 입원환자에서 분리되어 중요한 원내감염균임을 알 수 있었다. Gentamicin 고도내성 E. faecalis는 24주(60%)이었고, 최소억제농도의 범위는 ampicillin이 1~64㎍/ml, Chroramphenicol이 8~128㎍/ml과 erythromycin 128㎍/ml, vancomycinol 1~2㎍/ml이었다. 분리한 Gentamicin 고도내성 E. faecalis HL-1은 4가지 항균제에 모두 내성이었고, 7종류의 플라스미드가 있었다. HL-2와 HL-3은 모두 6종류, HL-4는 7종류, HL-5는 4종류 그리고 HL-6은 5종류의 플라스미드가 있었다. E. faecalis HL-1과 HL-6의 내성전달 빈도는 6.3×10?⁴과 3.7×10??이었으며, E. faecalis HL-1의 내성전달 빈도가 높았다. 접합에 의해 E. faecalis HL-1과 HL-6의 플라스미드 중 51.7 Kb 크기의 전이된 DNA가 확인되어 gentamicin 내성이 플라스미드 전이에 의한 것임을 알 수 있었다. Tetracycline 유전자는 E. faecalis transconjugants R-1의 2.15 Kb 플라스미드에 있었다. 공여균주 및 transconjugants균주의 항원성을 Immunoblotting으로 분석한 결과 E. faecalis HL-1과 E. faecalis transconjugants R-1균주는 97.8, 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였고, E. faecalis HL-6와 E. faecalis transconjugants R-6균주는 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였다. 그 반응의 강도는 85.8, 97.8, 46.8, 33.7, 63.5와 74.8 Kd 순이었다. 공여균주 E. faecalis HL-6에서는 반응하지 않았던 97.8, 95.8, 74.8와 63.5 Kd의 단백질이 E. faecalis transconjugants R-6균주에서 반응하였다. 이들 종 특이성 단백질을 Invitro에서는 배양되지 않는 E. faecalis에 대한 혈청학적 진단의 항원으로 이용한다면 유용할 것이다. Forty gentamicin-resistant isolates of Enterococcus faecalis were selected from various clinical materials, determined their antimicrobial susceptibility, and studied there R-plasmid characteristics and polypeptide patterns. All of the isolates were susceptible to vancomycin. The MICs(㎍/ml) of antimicrobial agents to the isolates were as follows; the MIC of gentamicin was 128 and ≥2040, ampicillin 1 and 1, chloramphenicol 2 and 8, erythromycin 32 and 256, and vancomycin 1 and 2. E. faecalis HL-1 strain had 8 plasmid DNA elements, HL-2 and HL-3 strains had 6, HL-4 had 7, HL-5 had 4, and HL-6 had 5. The 51.7 Kb of gentamicin resistance plasmid DNA was conjugally transferred from two strains of E. faecalis HL-1 and HL-6 to S. aureus SK 982. The plasmid transfer frequency between S. aureus SK 982 and E. faecalis HL-1 or E. faecalis HL-6 was 6.3×10?⁴ and 3.7×10??, respectively. Plasmid curing ratio after the treatment of ethidium bromide(10 ㎍/ml) to E. faecalis tarnsconjugants R-1 and R-6 were about 51% and 67%, respectively. The tetracycline gene was located in 2.15 Kb plasmid of E. faecalis HL-1, but it was not found in the E. faecalis HL-6 by Southern blot analyses. The antigenic components of E. faecalis HL-l, HL-6, R-1 and R-6 strains were analyzed by SDS-PAGE and immunoblotting. The E. faecalis strains had 7 to 16 polypeptide bands, however their major proteins were 97.8 and 26.8 Kd. At the Immunoblotting, 97.8, 95.8, 74.8, 63.5, 33.7 and 26.8 Kd polypeptides of the strains showed major antigenic activities with patient's sera infected intra-abdominally with an E. faecalis strain.

Enterococcus faecalis의 퀴놀론 내성 유전자 변이 및 독성인자 유전자 분석

이승하(Seung Ha Lee),노광명(Gwang Myeong Noh),이상준(Sang Joon Lee) 대한안과학회 2021 대한안과학회지 Vol.62 No.2

목적: 안내염을 초래할 수 있는 원인 균주 중 하나인 Enterococcus faecalis의 3가지 퀴놀론 약제에 대한 내성률, 내성 유전자 변이 양상과 독성인자 유전자의 존재를 알아보고자 했다. 대상과 방법: 2014년 4월 1일부터 2018년 1월 16일까지 고신대학교 복음병원 안과를 방문하여 유리체절제술, 백내장수술, 안구내주입술을 한 208명의 416안에서 결막상재균을 동정하였다. 각막염, 안내염에서 동정된 E. faecalis도 연구 대상에 포함했다. 결막상재균은 양안 하부 결막낭에서 표본을 채취했고, 각막염, 안내염 환자는 각각 각막과 유리체에서 채취했다. 표본을 배양하여 분리된 E. faecalis를 대상으로 약제 감수성, 유전자 염기서열 변이 및 독성인자 유전자를 확인했다. 결과: 결막 채취 표본에서 342균주가 동정되었고 이 중 E. faecalis는 6균주였다. 각막염의 2균주, 안내염에서 8균주를 포함하여 총 16균주로 연구를 진행했다. 16균주 중 6개에서 퀴놀론 약제 내성을 보였다. 유전자 변이는 주로 gyrA, parC에 점 돌연변이가 관찰되었다. 독성인자 유전자 분석 결과 esp, efba, asa1, ace, cylA, gelE를 가지고 있었으며 퀴놀론 내성균과 감수성 균의 차이는 없었다. 젤라틴분해효소 활성 검사 결과 모든 균에서 음성이었다. 결론: E. faecalis에서 37.5%의 퀴놀론 항균제 내성률을 보였다. gyrA, parC 두 유전자 변이가 있는 경우 높은 내성을 보였다. esp, efba, asa1, ace, cylA, gelE 유전자를 독성인자로 가지고 있었다. Purpose: To investigate the resistance rate of Enterococcus faecalis which is one of the causative strains of endophthalmitis to three fluoroquinolone drugs, the quinolone resistance gene mutation patterns, and the presence of virulence factor genes. Methods: Between April 1, 2014, and January 16, 2018, 416 eyes of 208 patients undergoing cataract surgery, intravitreal injection, or vitrectomy were examined to identify conjunctival commensals. Patients with infective keratitis and infective endophthalmitis were also examined for the presence of E. faecalis. Before the procedure and surgery, samples for identification of conjunctival commensals were collected from the lower conjunctival sac of both eyes. In addition, corneal and vitreous specimens were collected from patients with keratitis and endophthalmitis, respectively. E. faecalis isolated by culturing the samples was tested for drug susceptibility, the presence of gene sequence mutations, and virulence factor genes. Results: In total, 342 strains were identified in samples from the conjunctiva and included six isolates of E. faecalis. The study was conducted with a total of 16 isolates of E. faecalis, including two from cases of keratitis and eight from cases of endophthalmitis. Six of the 16 strains (37.5%) were resistant to quinolone antibiotics. Point mutations were detected mainly in gyrA and parC. The virulence factors esp, efba, asa1, ace, cylA, and gelE were present in the strains and showed no differences between the quinolone-resistant and quinolone-sensitive strains. Gelatinase activity test was negative for all strains. Conclusions: The resistance rate of enterococcal clinical isolates identified in the ocular area was 37.5%. The increase in resistance to quinolone antibiotics seems to be related to the presence of mutations in gyrA and parC genes. E. faecalis identified in the eye is thought to possess the virulence factors genes esp, efba, asa1, ace, cylA, and gelE.

백내장 수술 후 발생한 Enterococcus faecalis 재발성 안내염 2예

안민원,신민규,박성후,이지은 대한안과학회 2015 대한안과학회지 Vol.56 No.4

목적: Enterococcus faecalis (E. faecalis)에 의한 재발성 안내염 2예를 경험하였기에 보고하고자 한다. 증례요약: 증례1: 75세 여성이 백내장 수술 3일 후 발생한 우안 시력저하와 안구 통증으로 내원하였다. 안내염으로 진단하였고 안내 항생제 주사 후 염증이 조절되었으나 1달 후 재발하여, 유리체절제술을 시행하고 실리콘 기름과 항생제를 안내 주입하였다. 증례2:74세 여성이 백내장 수술 2일 후 발생한 우안 시력저하로 내원하였다. 안내염으로 진단하였고, 안내 항생제 주사 후 염증은 조절되었으나 1달 후 재발하여, 유리체절제술, 후낭절제술, 안내 항생제 주입술 시행하였고, 염증은 조절되었다. 유리체절제술 40일 후 다시재발하여 인공수정체를 제거하고, 실리콘 기름과 항생제를 안내 주입하였다. 두 증례 모두 첫 발생 및 재발에서 시행한 균 배양검사에서 각각 E. faecalis가 동정되었고, 안내 항생제는 vancomycin과 ceftazidime을 사용하였다. 증례 1은 이후 실리콘 기름을 제거하였고, 5개월 후 교정시력 20/400이었다. 증례 2는 이후 실리콘 기름을 제거하고 인공수정체 공막고정술을 시행하였으며, 5개월 후 최대교정시력은 20/40이었다. 결론: 백내장 수술 후 발생한 안내염의 원인균이 E. faecalis일 경우 감염이 조절된 후에 재발할 수 있음을 염두에 두어야 한다. Purpose: To report 2 cases of recurrent Enterococcus faecalis (E. faecalis) endophthalmitis after uneventful phacoemulsification and posterior chamber intraocular lens (IOL) implantation. Case summary: Case 1: A healthy, 75-year-old female presented with a sudden visual loss and ocular pain 2 days after phacoemulsification and IOL implantation. After successful treatment with intravitreal antibiotics injection, the infection was apparently cleared. At 1 month after the initial presentation, recurrent endophthalmitis occurred and was resolved with vitrectomy, silicon oil tamponade, and intravitreal antibiotics injection. Two months after vitrectomy, the silicone oil was removed and the patient’s final visual acuity improved to 20/400 5 months later. Case 2: A healthy, 74-year-old female presented with a sudden visual loss 2days after phacoemulsification and IOL implantation. After successful treatment with intravitreal antibiotics injection, the infection was apparently cleared. One month later, recurrent endophthalmitis occurred and was resolved with vitrectomy, posterior capsulotomy,and intravitreal antibiotics injection. Forty days later, the patient had a similar relapse. The infection resolved with IOL explantation, silicon oil tamponade, and repeated intravitreal antibiotics injections. E. faecalis was identified at the first and recurrent episode. Vancomycin and ceftazidime were used for each intravitreal administration. Silicone oil removal and IOL scleral fixation were performed and the patient’s final visual acuity was 20/40 5 months later. Conclusions: Close monitoring for recurrences is recommended in endophthalmitis due to E. faecalis after phacoemulsification even after a successful initial treatment.

Gentamicin 고도내성 Enterococcus faecalis균주의 항균제감수성, R-플라스미드 및 항원의 특성연구

강현 THE KOREAN SOCIETY FOR BIOMEDICAL LABORATORY SCINE 1995 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.1 No.1

임상검체에서 분리 동정한 E. faecalis균주에 대하여 gentamicin 및 타 항균제에 대한 감수성을 조사했고, R-플라스미드 DNA 패턴 및 제한효소에 의한 DNA 단편분석, filter-mating에 의한 gentamicin 플라스미드 DNA 전이, R-플라스미드 DNA 제거, tetracycline 내성 유전자 확인, 항원분석을 실시하였다. 분리된 40주 E. faecalis 모두가 gentamicin에는 내성이었고, 25주는 요 검체에서 분리되었으며, 이 40균주들 중 95%가 입원환자에서 분리되어 중요한 원내감연균임을 알 수 있었다. Gentamicin 고도내성 E. faecalis는 24주(60%)이었고, 최소억제농도의 범위는 ampicillin이 1∼64㎍/ml, Chroramphenicol 이 8∼128㎍/ml과 erythromycin 128㎍/ml, vancomycinol 1∼2㎍/ml이었다. 분리한 Gentamicin 고도내성 E. faecalis HL-1은 4가지 항균제에 모두 내성이었고, 7종류의 플라스미드가 있었다. HL-2와 HL-3은 모두 6종류, HL-4는 7종류, HL-5는 4종류 그리고 HL-6은 5종류의 플라스미드가 있었다. E. faecalis HL-1과 HL-6의 내성전달 빈도는 6.3×10-⁴과 3.7×10 이었으며, E. faecalis HL-1의 내성전달 빈도가 높았다. 접합에 의해 E. faecalis HL-6의 플라스미드 중 51.7 Kb 크기의 전이된 DNA가 확인되어 gentamicin 내성이 플라스미드 전이에 의한 것임을 알 수 있었다. Tetracycline 유전자는 E. faecalis transconjungants R-1의 2.15 Kb 플라스미드에 있었다. 공여균주 및 transconjugants균주의 항원성을 Immunoblotting으로 분석한 결과 E. faecalis HL-1과 E. faecalis transconjugants R-1균주는 97.8, 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였고, E. faecalis HL-6와 E. faecalis transconjugants R-6균주는 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였다. 그 반응의 강도는 85.8, 97.8, 46.8, 33.7, 63.5와 74.8 Kd 순이었다. 공여균주 E. faecalis HL-6에서는 반응하지 않았던 97.8, 95.8, 74.8와 63.5 Kd의 단백질이 E. faecalis transconjugants R-6균주에서 반응하였다. 이들 종 특이성 단백질을 Invitro에서는 배양되지 않는 E. faecalis에 대한 혈청학적 진단의 항원으로 이용한다면 유용할 것이다. Forty gentamicin-resistant isolates of Enterococcus faecalis were selected from various clinical materials, determined their antimicrobial susceptibility, and studied there R-plasmid characteristics and polypeptide patterns. All of the isolates were susceptible to vancomycin. The MICs(㎍/ml) of antimicrobial agents to the isolates were as follows; the MIC of gentamicin was 128 and ≥2040, ampicillin 1 and 1, chloramphenicol 2 and 8, erythromycin 32 and 256, and vancomycin 1 and 2. E. faecalis HL-1 strain had 8 plasmid DNA elements, HL-2 and HL-3 strains had 6, HL-4 had 7, HL-5 had 4, and HL-6 had 5. The 51.7 Kb of gentamicin resistance plasmid DNA was conjugally transferred from two strains of E. faecalis HL-1 and HL-6 to S. aureus SK 982. The plasmid transfer frequency between S. aureus SK 982 and E. faecalis HL-1 or E. faecalis HL-6 was 6.3×10-⁴ and 3.7×10 , respectively. Plasmid curing ratio after the treatment of ethidium bromide(10 ㎍/ml) to E. faecalis tarnsconjugants R-1 and R-6 were about 51% and 67%, respectively. The tetracycline gene was located in 2.15 Kb plasmid of E. faecalis its HL-1, but it was not found in the E. faecalis HL-6 by Southern blot analyses. The antigenic components of E. faecalis HL-1, HL-6, R-1 and R-6 strains were analyzed by SDS-PAGE and immunoblotting. The E. faecalis strains had 7 to 16 polypeptide bands, however their major proteins were 97.8 and 26.8 Kd. At the Immunoblotting, 97.8, 95.8, 74.8, 63.5, 33.7 and 26.8 Kd polypeptides of the strains showed major antigenic activities with patient's sera infected intra-abdominally with an E. faecalis strain.

항종양활성을 지닌 Enterococcus faecalis 2B4-1의 분리 및 동정

박상진,임대석,윤상군,백영진,김창한 한국미생물 · 생명공학회 1998 한국미생물·생명공학회지 Vol.26 No.6

신생아 분변으로부터 장내세균 127균주를 분리하였다. 각각의 균주들의 배양균체를 검정종양세포들에 대해 항종양활성을 측정한 결과, 항종양활성을 나타내는 분리균주는 27균주였고, 그 중 비교적 강한 항종양활성을 보이는 균주는 5균주였으며, 5균주중 위암세포주, SNU-1에 선택적으로 강한 항종양활성을 나타내는 2B4-1 균주를 최종분리하였다. API 20 S system kit를 이용하여 분리 균주 2B4-1을 동정한 결과, Enterococcus faecalis와 99.9%의 % ID value를 나타내었다. 동정된 분리균주 2B4-1과 type strain, Enterococcus faecalis NCTC 775와의 생리생화학적 특성들을 비교해 본 결과, 온도별대 성장률, 내염성, 내산성, arabinose등의 당 이용성 및 통성혐기 상태에서의 생육 등에서는 일치된 결과를 나타내었으나 hippurate hydrolysis test의 음성반응 및 $\beta$-hemolysis test의 음성반응을 나타낸 것으로 보아 Enterococcus faecalis NCTC 775와 2가지의 다른 특성을 나타내었다. 따라서 분리균주 2B4-1은 Enterococus faecalis NCTC 775와는 약간의 특성이 다른 변종으로 확인되어 Enterococcus faecalis 2B4-1으로 동정하였다. The aim of the present research program was to develop a strain of gastrointestinal bacteria containing antitumor substances. Fecal samples were collected from neonates and a number of gastrointestinal bacteria were isolated from the fecal samples by applying selective agar for intestinal bacteria. Among 127 isolates, a strain 2B4-1 containing an antitumor substance against stomach cancer, SNU-1, was selected. The strain 2B4-1 was identified as a strain similar to Enterococcus faecalis NCTC 775 with respect to morphological characteristics, growth temperature, salt and acid tolerance, growth under facultative anaerobic conditions and utilization of carbon sources such as arabinose and melibiose and so on. However, it showed some differences such as a negative reaction to hippurate hydrolysis and negative reaction to $\beta$-hemolysis. We assigned to the strain 2B4-1 to Enterococcus faecalis.

모유에서 분리한 Enterococcus faecalis의 다제내성 균에 대한 항용혈 및 항균 효과

이은지 ( Eun-ji Yi ),이정은 ( Jeong-eun Lee ),조소연 ( So-yeon Jo ),김수빈 ( Soo-bin Kim ),유두나 ( Du-na Yu ),국무창 ( Moochang Kook ),김애정 ( Ae Jung Kim ) 한국미생물 · 생명공학회 2021 한국미생물·생명공학회지 Vol.49 No.4

본 연구에서는 국내 건강한 산모의 모유에서 분리한 E. faecalis BMSE-HMP 4주의 용혈여부와 다제내성 균에 대한 항용혈 효능 및 항균 효과를 확인하였다. 분리 균주의 효소 활성을 측정 결과, E. faecalis BMSE-HMP 4주는 지질에 대한 가수분해 효소인 esterase 및 esterase lipase에 대한 활성이 우수하였다. 용혈여부를 확인한 결과, 분리균 모두 용혈반응이 나타나지 않았다. 또한 용혈을 일으키는 다제내성 균주에 대한 항용혈 효능을 검토한 결과, S. aureus CCARM 3855에 대한 항용혈 효능은 BMSE-HMP002가 75.71 ± 10.00%로 가장 높았으며, E. coli DC 2 CCARM 0238과 P. aeruginosa CCARM 0223에 대한 항용혈 효능은 BMSEHMP001이 각각 76.92 ± 2.99%와 87.93 ± 1.93%로 가장 높게 나타났다. 다제내성균 Staphylococcus spp., Escherichia spp., Pseudomonas spp., Salmonella spp., Klebsiella spp. 및 Enterobacter spp.에 대한 항균활성을 검토한 결과, E. faecalis BMSE-HMP 4주는 그람 양성균주와 그람 음성균주에서 모두 항균력을 보였으며, 분리균 4주 중에서는 BMSEHMP001과 BMSE-HMP002가 가장 우수한 결과를 보였다. 본 연구에서는 모유유래 유산균 E. faecalis BMSE-HMP 4주의 안전성과 다제내성 균에 의한 용혈 및 항균 효과를 검토하여 유용 유산균으로써 가능성을 확인하였으며, Enterococcus 균주는 항생제 내성 유전자 및 독성 유전자가 없는 경우에 한하여 사용이 가능한 것으로 고시된 바와 같이 본 연구에서 분리한 모유유래 유산균 E. faecalis BMSEHMP 4주의 항생제 내성 및 독성에 대한 추가적인 연구를 통해 안전성에 대한 입증이 필요할 것으로 생각된다. In this study, the hemolysis of Enterococcus faecalis BMSE-HMP strains, isolated from human breast milk, was investigated, and the anti-hemolytic and antimicrobial effects on multidrug-resistant (MDR) bacteria were investigated. The enzyme activity of E. faecalis BMSE-HMP 4 strains was measured, and it was found that the activities of esterase and esterase lipase were the highest. In addition, no hemolytic reaction was observed in any of the isolates. Subsequently, the anti-hemolytic activity against MDR strains causing hemolysis was evaluated. E. faecalis BMSE-HMP002 had the highest anti-hemolytic activity against Staphylococcus aureus CCARM 3855 at 75.71 ± 10.00%. The anti-hemolytic activity against Escherichia coli DC 2 CCARM 0238 and Pseudomonas aeruginosa CCARM 0223 showed that the activity of BMSE-HMP001 was highest at 76.92 ± 2.99% and 87.93 ± 1.93%, respectively. Examination of the antimicrobial effects against the MDR bacteria Staphylococcus spp., Escherichia spp., Pseudomonas spp., Salmonella spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., and E. faecalis BMSE-HMP strains showed antimicrobial effects against both gram-positive and gram-negative strains. Breastfeeding delivers enterococci into the intestinal tract of newborns by lactation, and its usefulness is attracting attention as it has been reported that enterococci have a potential effect on neonatal immune development. In this study, the hemolytic and antimicrobial effects of E. faecalis BMSE-HMP strains on MDR bacteria were investigated, to confirm their potential as useful lactic acid bacteria. Additional studies on the antibiotic resistance and toxicity of the E. faecalis BMSE-HMP strains, isolated in this study, are necessary to prove it safe for use.

Hovenia Monofloral Honey can Attenuate Enterococcus faecalis Mediated Biofilm Formation and Inflammation

유리,권오윤,우현주,이승호 한국축산식품학회 2022 한국축산식품학회지 Vol.42 No.1

We evaluated the anti-biofilm formation and anti-inflammatory activity of Hovenia monofloral honey (HMH) against Enterococcus faecalis. Co-culture of HMH with E. faecalis attenuated the biofilm formation of E. faecalis on a polystyrene surface. In addition, HMH effectively eradicated the established E. faecalis biofilm. HMH significantly attenuated E. faecalis growth but did not affect the production of extracellular polymeric substances on E. faecalis, indicating that reduction of E. faecalis biofilm is a result of HMH-mediated killing of E. faecalis. Furthermore, we found that HMH can effectively attenuate E. faecalis-induced expression of a proinflammatory interleukin-8 (IL- 8) in HT-29 cells. Interestingly, treatment of HMH significantly attenuated the E. faecalis-mediated expression of Toll-like receptor-2 (TLR-2) and its adaptor molecules, myeloid differentiation primary response 88 (MyD88), in HT-29 cells. In addition, E. faecalis-induced mitogen-activated protein kinases (MAPKs) phosphorylation was significantly attenuated by HMH administration. Furthermore, HMH-mediated antiinflammatory efficacy (0.2 mg/mL of HMHs) had an equal extent of inhibitory efficacy as 5 μM of MyD88 inhibitor to attenuate E. faecalis-mediated IL-8 expression in HT-29 cells. These results suggest that HMH could effectively inhibit E. faecalis-mediated gastrointestinal inflammation through regulating the TLR-2/MyD88/MAPKs signaling pathways. Collectively, our data suggest that HMH could be developed as a potential natural agent to control E. faecalis-mediated biofilm formation and inflammation.

임상 거체에서 분리된 Enterococcus faecalis와 Enterococcus faecium의 최근 3년간 항균제 내성 추이

최영진,김휘준 순천향의학연구소 2008 Journal of Soonchunhyang Medical Science Vol.14 No.1

Being predominantly inhabitants of gastrointestinal tract in human, enterococci are opportunistic pathogens of infections that causes UTI, wound infection, septicemia and endorcarditis. Enterococci are not only the etiologic agents of most hospital acquired infections with increasing frequency, but also resistant to many antimicrobial agents at the same time. In this study, the trends of antimicrobial resistance for E. faecalis and E. faecium isolated from clinical specimens at Soonchunhyang University Cheonan Hospital between 2005 and 2007 were determined. Susceptibility were tested by disk diffusion using CLSI guideline and criteria. The percentage of gentamicin high-level resistant isolates of E. faecalis were 54% in 2006 and 65% in 2007 but a higher level of resistance to that gentamicin was found among E. faecium as it was 83% in 2006 and 73% in 2007 respectively. The high-leve1 resistance rates to streptomycin were also increased in 2006 and 2007 from 19% to 24% in E. faecalis and 25% to 31% in E. faecium. Resistance rates to ciprofloxacin in E. faecalis increased significantly in the year 2005 to 2007 from 28% to 42% but these resistance rates were more than 90% in cases of E. faecium isolates. Virtually all of E. faecalis were susceptible to vancomycin, but E. faecium isolates were found resistant to some extent like 16% in 2005, 21% in 2006 and 23% in 2007 respectively. From these findings it was evident that the resistance to many antimicrobial agents are increasing in both E. faecalis and E. faecium isolated from clinical specimens.