Histopathological Analysis of Focal Infarction in Gerbil Brain Induced by Ferrite Infusion Through the Femoral Vein : New Experimental Model for Focal Infarction 조직학적 소견과 국소 뇌허혈 동물모델으로의 이용 가능성

Koo, Heasoo 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 1995 EMJ (Ewha medical journal) Vol.18 No.4

목 적 : 허혈성 뇌병변의 실험동물 모델은 임상에서 발병율과 유병율이 높아서 중요한 질환인 뇌혈관질환의 병태생리학적 기전, 예방, 치료의 연구에 중요한 역할을 한다. 국소허혈병변은 대부분의 연구에서 쥐 또는 고양이의 중뇌동맥 폐쇄법이나 gerbil의 일측 경동맥 폐쇄법이 가장 널리 이용되고 있다. 그러나 이런 방법들은 수술기법이 단순하지 않고 허혈 병변부위나 범위가 일정하지 않아 원하는 부위에 원하는 크기의 일정한 병변을 유발하기가 용이하지 않았다. 근래에 두개골 표면에 강력 소자석을 부착하고 미세한 자성체 입자를 혈중으로 투여하여 국소 뇌허혈병변을 유발하는 방법이고안되었다. 본 연구는 이 방법에 의해 발생하는 뇌허혈 병변의 시간에 따른 병리조직학적 소견을 분석하여 앞으로의 실험에 이용할 수 있는 기초로 하기 위하여 시행되었다. 방 법 : 성숙 gerbil(50-70 gm)의 두피를 박리후 측두부 혹은 전두부의 두개골 표면에 직경 7 mm, 두께 2 mm의 자석(표면자장 강도 2,000-2,400 Gauss)을 접착고정하고 대퇴정맥에 삽입된 소관을 통해 특수처리된 산화철 입자(γ-Fe^2O_3,0.2×0.02μm)의 생리 식염수 현탁액을 주입하였다. 투여후 1 2,6 시간과 1,2,3,7,8,10,14 일 후에 조직학적소견을 관찰하였다. 결 과 : 국소허혈병변인 뇌경색은 총 59예중 51예에서 발생하였고 전두엽과 두정엽의 대뇌 피질에 가장 흔히 관찰되었으며 , 해마, 시상, 기저핵에서도 관찰되었다 19예에서 작은 경색이 몇개씩 보였으며 32예에서는 큰 경색이 여러개 보였다. 9예에서 반대편 대뇌피질에 작은 경색이 동반되었다. 산화철 입자는 경색 주변이나 뇌막의 혈관에서 관찰되었고경색의 조직학적 소견은 비교적 전형적인 변화의 진행을 보였다. 결 론 : 본 실험방법을 자석의 강도나 산화철입자의 크기, 실험동물의 조건을 일정하게 유지하며 시행한다면 원하는위치에 원하는 크기의 경색을 비교적 간단한 방법으로 유발할 수 있어서 앞으로 색전에 의한 뇌경색의 연구에 이용할 수있다고 사료된다.

Changes of Cytoskeletal System in Neurodegenerative Disease : Immunohistochemical Characterization of Neurofibrillary Changes Induced by Mitotic Spindle Inhibitors 감수분열억제제 투여시의 신경섬유소의 변화에 대한 면역화학적 검색

Koo, Heasoo 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 1992 EMJ (Ewha medical journal) Vol.15 No.1

신경세포내의 신경섬유소의 축적과 변화는 사람에서 발생하는 여러질환들과 실험동물에서 일으키는 퇴행성 신경질환에서 흔히 보이는 소견이다. 그중에서 신경섬유의 인화(phosphorylation)의 변화는 여러 퇴행성 질환에서 보고되는 잘 알려진 변화로서 그 정확한 기전은 아직도 모른다. 본연구에서는 감수분열 억제제인 maytansine과 maytanprine을 토끼의 뇌간에 투여하여 신경세포내에 신경섬유소의 축적을 유발하였고 여러가지 항체를 사용하여 신경섬유소의 변화에 대해 면역화학적으로 검색하였다. 본실험에서 감수분열 억제제를 투여한 다음 축적된 신경섬유소는 정상 신경세포에서와 달리 인화된 형태로 세로질내에 존재하는 것이 관찰되었다. 비슷한 결과과 알루미늄중독과 같은 신경세포내에 섬유소 축적의 기전이 다른 경우에서도 관찰되고 있는 것으로 보아 이러한 변화는 신경섬유 축적의 원인으로서 보다는 오히려 결과로서 나타나는 것으로 여겨진다. In experimental neurogenerative diseases, aluminum(Al) intoxication and axotomized sensory neurons showed an abnormal accumulation of neurofilaments(NF) in the neuronal perikarya. These NF contain phosphorylated(ph) epitopes that are not detectable in normal perikaryal NF. Antimitotic drugs also cause accumulations of NF probably by depolymerization of microtubules(MT). The present study was designed to examine immunohistochemical changes of NFs following administration of antimitotic drugs, which result in accumulation of NFs in the cell body through a different pathogenetic mechanism than aluminum. Adult rabbits were injected intracisternally with 25-50㎍ of maytansine and maytanprine, two antimitotic agents. Tissues were obtained from experimental and control animals and processed for histological and immunocytochemical examinations. Large bundles of NF in the perikarya and proximal processes of large neurons from experimental animals reacted intensely with monoclonal antibodies(mAb) to ph epitopes of 200 KDa NF subunit as well as with mAb recognizing nonphosphorylated(non-ph) NF epitopes. Neuronal perikarya from control animals immunoreacted only with mAb to non-ph NF Immunoreaction of Ab to the microtubule associated protein 2(MAP-2) and to tubulin was similar in neurons from experimental and control animals. No immunoreaction was detected with antibodies to tau proteins. The abnormal presence of ph epitopes in accumulating NF under different conditions indicate that neurons affected in different diseases show aberrant phosphorylation of NF proteins associated with functional impairment.

Analysis of Histopathological Findings of Hirschsprung's Disease : Immunohistochemical Studies Including GDNF and Cathepsin D

Koo, Heasoo,Choi, Kum-Ja 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 2003 EMJ (Ewha medical journal) Vol.26 No.1

목적 : 이 연구는 Glial cell line-derived neurotrophic factor(GDNF), cathepsin D, neuron specific enolase(NSE), S-100 단백에 대한 항체를 사용한 면역화학염색에서 관찰되는 Hirschsprung병의 병리소견을 분석하기 위하여 시행하였다. 태생기(16+6주, 25주, 30주, 35주)의 대장에서 같은 방법으로 신경절과 신경섬유의 발달과정을 관찰하였다. 방법 : 임상소견과 병리소견에 의해 Hirschsprung병으로 진단된 34예를 신경절이 있는 정상부위, 신경절이 없는 부위, 이행부위로 분류하였다. 면역화학염색은 포르마린으로 고정하고 파라핀에 포매한 조직에서 peroxidase-antiperoxidase 방법을 사용하였다. 결과 : 태생기의 신경절은 크기가 작고 세포막이 불분명하지만 GDNF와 cathepsin D 항체에 대해 강한 양성 반응을 보여서 쉽게 구분할 수 있었다. 태생기 대장과 정상 부위에서 내인성 신경섬유에 비교해서 외인성 신경섬유는 GDNF 항체에 대해 더 강한 반응을 보였고 신경절이 없는 부위에서 증식하는 외인성 신경섬유는 S-100 단백과 NSE 항체에 대해 강한 양성 반응을 보였다. 점막과 점막내근육에 있는 증식된 신경섬유는 신경절이 있는 부위와 없는 부위에서 모두 관찰되었으며 대장창냄술을 시행한 부위에서 더 심해서 만성 자극과 관련이 있는 것으로 생각하였다. 결론: Hirschsprung병에서 신경절의 소실과 신경세포의 증식을 GDNF항체로 쉽게 파악할 수 있었고 태생기의 미성숙 신경절도 GDNF 항체에 강한 양성 반응을 보이므로 capthepsin D, S-100단백, NSE와 같은 항체와 GDNF 항체를 함께 사용하면 진단에 도움이 되리라고 생각한다. 그러나 Hirschsprung병에서 관찰되는 소견의 대부분이 부위에 따라 다양하게 나타나므로 신경절과 신경섬유의 분포와 변화를 함께 평가하여 진단해야 한다.

Effects of Dexamethasone in Hypoxic-Ischemic Brain Injury in the Rats : 저산소성 병변에서의 덱사메타존의 영향

Koo, Heasoo 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 1993 EMJ (Ewha medical journal) Vol.16 No.2

급성 척수 손상과 뇌종양 등의 혈관성 부종을 동반하는 질환이 있는 환자에서 담질 코르티코이드를 다량 사용하는 경우 좋은 효과를 보이는 것은 잘 알려져 있고 현재에도 치료의일환으로 사용되고 있다. 그러나 허혈-저산소성 병변에서는 임상실험이나 실험동물에서 모두효과가 없거나 오히려 뇌세포의 손상을 악화시키므로 더 이상 사용이 금지되고 있다. 근래에시행된 한 실험에서 여태까지의 보고들과는 달리 7일 된 미성숙취에서 허혈-저산소성 병변이일어나기 전에 덱사메타존을 여러 번으로 나눠서 투여하는 경우 뇌세포의 손상을 적게 하는것이 관찰되었고 이러한 소견은 임상에서 미 성숙아에서 제의 기능을 증가시키기 위해 출생전후에 텍사메타존의 투여를 시도하므로 중요한 의미를 갖는다. 본 실험에서는 덱사메타존을투여방법과 용량을 다르게 투여하여 그에 따른 뇌세포의 손상을 관찰하였다. 덱사메타존 0.5mg/kg와 2.Omg/kg를 3회 전처치한 실험동물군이나 1.Omg/kg를 3회 후처치군에서 신경세포의손상에 의미있는 차이가 없었으며 단지 후처치군에서 해마의 일부에서 다른 군보다 더 심한손상을 보였다. 이러한 실험결과는 미성숙쥐와 성숙쥐에서 발생하는 허혈-저산소성 병변은그 기전이나 병변에 관여하는 여러가지 요소가 다른 것을 의미하고 그러한 요소들에 대한앞으로의 연구가 필수적이라고 생각된다. 또한 허혈-저산소성 병변에서 담질 코르터코이드의사용이 금지되어야 하는 것을 뒷받침한다. The efffect of high dose of glucocorticoid in acute spinal cord injury has been well provedexperimentally and clinically. In addition. the beneficial efffect of steroids in cerebral vasogenicedema has been well documented and clinically steroids are now a part of the treatment ofintracranial neoplasms. Consequent trials of high dose steroid therapy in CNS injury havebeen proved its ineffectiveness or adverse effecis in clinical and experimental studies. Also.dexamethasone treatment in hypoxic-ischemic brain damage in rats showed adverse effectson neurons in most of the studies in adult and immature rats, except one report which showedneuroprotective effects of dexamethasone pretreatment in 7-day-old immature rats. This study was designed to see if there was same neuroprotective effect in adult rat sinceno previous experiments used same amounts of steroid at this time intervals. Hypoxic-ischemicinjury was induced in adult Sprague-Dawley rats, 150∼240 gms, by Levine procedure withsome modification (left carotid artery ligation and exposure to 8% oxygen-92% nitrogen gasfor 2 hours). The animals were divided into four groups and dexamethasone was injectedas follows : (Ⅰ) hypoxic-ischemic control group without dexamethasone injection(n= 16) ; (Ⅱ)0.5fmg/kg i.p. 3 times, 48 and 24 hours, and immediately before the carotid artery ligationand 8% oxygen treatment(n=16) ; (Ⅲ) 2.Omg/kg at same time with (Ⅱ) (n=14) ; (Ⅳ)1.Ogm/kg 3 times at immediately after.24 and 48 hours after the procedure(n=20). The neuropa-thological changes were interpreted 7 days after the procedure. The results are summarized as follows : 1) In hypoxic-ischemic control group(Ⅰ), 5 out of 16 rats(31.3%) of rats showed large infarctioninvolving ipsilateral side of the brain and other 4∼5 rats showed severe neuronal damagein anterior and posterior cortex. hippocampus. striatum, and thalamus. 2) Compare to control group. dexamethasone 0.5mg/kg 3 times pretreatment group(Ⅱ) showedsimilar neuronal damage in all areas, although the infaction was focal in striatum and thalamus in group Ⅱ and generalized in group Ⅰ. The changes were not statistically significant. 3) Group Ⅲ showed no significant difference from groups Ⅰ, Ⅱ, and Ⅳ. 4) Group Ⅳ showed more neuronal damage in CA1-2 area of hippocampus compare togroups Ⅰ and Ⅱ(p<0.01, p<0.005. respectively). 5) Mortality rate was not significantly different between groups. In conclusion, dexamethasone pretreatment did not improve hypoxic-ischemic neuronal da-mage in adult rats. Dexamethasone posttreatment aggravated neuronal damages in CA1-2 areaof hippocampus compare to control and pretreatment groups.

Analysis of the Histopathology of the Irradiated Rat Brain with or Without Cisplatin in the First Post-Irradiation Month

Koo, Heasoo 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 1995 EMJ (Ewha medical journal) Vol.18 No.3

The histopathology of the brains of rats killed was studied, fo11owing various doses of 20 to 30 Gy X rays with or without cisplatin (cis-diamminedichloroplatinum Ⅱ) treatment. Choroid plexus in lateral ventricles, neuropil, and neuronal changes were evaluated in coronal sections of the brain. The changes were different depending on survival days regardless of dosage of irradiation or cisplatin treatment. At 4 days after irradiation, the changes of choroid plexus were marked and associated with diffuse perivascular edema. At 6 days after irradiation, choroid plexus showed congestion of blood vessels with no changes in epithelial cells and neuropil.The degenerative changes in neurons were marked at 6 days and minimal after 7 days, which suggests the reversible changes of neurons in radiation damage of rat brain. Those rats with 20 Gy irradiation, killed at 3 or 9 days, showed mild to moderate vacuolizatlon of epithelial cells and dilatation of capillaries with no perivascular edema. Cisplatin treatment showed mild to moderate changes in choroid plexus with no changes in neurons and neuropil.

Estrogen Receptor-related Protein(P29) in Gastric Cancer : Association with Histologic type and Stage 조직학적 분류와 임상병기와의 관계

Koo, Heasoo 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 1992 EMJ (Ewha medical journal) Vol.15 No.3

진행성위암 16예와 조기위암 7예의 위절제술에 의한 표본에서 종양세포내의 에스트로겐 관련 단백질의 표현을 면역조직화학적 방법으로 검사하여 각 조직학적 유형간의 차이와 임상병기와의 연관관계를 관찰하였다. 진행성암의 경우에는 16예중 7예(43.7%)에서 그리고 조기위암의 경우에는 8예중 4예(50%)에서 양성반응을 보여 거의 비슷하였다. 각 조직학적 유형간의 차이는 진행성과 조기위암 모두에서 분화가 나쁜 경우에 가장 많은 양성반응을 보였고 (66.7%) 분화가 잘되거나 중등도의 분화를 보이는 종양에서 그 다음으로 많은 양성을 보였으며 (50%) 인환세포종이나 점액세포종은 음성반응을 보였다. 이와 같이 분화의 정도에 따른 차이는 에스트로겐 관련 단백질이 종양세포의 증식능력에 관련이 있음을 시사한다. Estrogen receptor-related protein was examined on gastrectomy specime from 16 cases of advaced gastric adenocarcinoma and 7 cases of early gastric carcinoma(EGC) by using peroxidase-anti-peroxidase method on formalin-fixed paraffin-embedded sections. Positive reaction was seen in 7 out of 16 cases of advanced carcinoma and in 4 out of 8 cases of EGC(50%). Among advanced carcinoma, 3 cases of mucinous carcinoma were negative and 2 cases of signet ring cell carcinoma(SRC) showed focal positive reaction only in combined poorly differentiated(PD) area(10% of tumor cells). PD advanced carcinoma consisted of 4 cases of medullary type and 3 cases of individual cell type. Two out of 4 medullary type showed positive reaction in 20 and 80% of tumor cells and 2 out of 3 individual cell type showed positive reaction in 50 and 70% of tumor cells. Gland-forming type of advanced carcinoma consisted of 1 each case of intestinal and cardiac type and 1 mixed intestinal and cardiac type. Only 1 case of intestinal type showed positive reaction in 50% of tumor cells Among EGC, 2 cases of SRC were negative and 2 cases of PD carcinoma showed 5 and 10% positivity in PD area and 20 and 40% positivity in admixed gland-forming area. Gland-forming EGC consisted of 3 cased of intestinal type and 1 case of cardiac type. One case from each group showed positive reaction in 50 and 20% of tumor cells, respectively. In summary, positive reaction to antibody to estrogen receptor-related protein(P29) was expressed in PD(66.7%), gland-forming(50%), SRC, and mucinous type in order in both early and advanced carcinoma. The difference between age, sex, and other factors was not clear due to limitation of specimen.

흰쥐의 직장에 X-선조사와 Cis-Dichlorodiammineplatinum(Ⅱ)의 효과에 관한 실험적 연구

구혜수,이경자 梨花女子大學校 醫科大學 醫科學硏究所 1992 EMJ (Ewha medical journal) Vol.15 No.3

The effects of radiation and Cis dichlorodiammineplatinum(Ⅱ) (Cis-DDP) were assessed in rectum of rats by histopathological changes. Rats were exposed to single doses of X ray(6~10 Gy) without or with Cis-DDP(2.5㎎/㎏). In combined group, Cis-DDP was given 30 minntes before or immediately after irradiation. Cis-DDP alone showed inflammatory cell infiltration and increased goblet cells in the mucosa and edema and fibrosis of submucosa with vascular sclerosis. With increased radiation dosage. such changes were aggravated. Necrosis of muscle layer developed 8 Gy irradiation. In groups with combination treatment of X-ray and Cis-DDP. changes of mucosa and submucosa were not significantly different from radiation alone group, but necrosis of the muscle layer was developed in 6 Gy combination group and degree was more severe in 8 and 10 Gy combination group compared to radiation alone group. There was no difference according to the timing of Cis DDP administration before or after irradiation. This result suggests Cis DDP enhance the radiation effect on the rectum of rats and enhancement ratio was 1.3 as the endpoint was necrosis of the muscle layer.

實驗的 局所 腦虛血에 對한 Pentoxifylline 效果

辛圭萬,丘惠琇 梨花女子大學校 韓國生活科學硏究院 1990 韓國生活科學硏究院 論叢 Vol.46 No.-

The purpose of this experimental study is to determine the protective effect of pentoxifylline against the actue focal cerbral ischemia. The acute focal cerbral ischemia was induced by postorbital occlusion of the proximal portion of the left middle cerbral artery for 4 hours with reperfusion for 8 hours. The experimental animals were divided into two groups ; group Ⅰ(ischemic group) was the cats without pretreatment and group Ⅱ(pentoxi group) was given pentoxfylline(15㎎/㎏) intravenously 2 hours prior to occlusion of the artery. The total areas of infarction in left cerebral hemisphere were measured by image analysis system. In group Ⅰ and Ⅱ the total infarcted areas were 4034.274㎟ and 1385.536㎟, respectively. The significant reduction of infarcted areas in group Ⅱ suggests that the pretreatment of petoxifylline has a beneficiical effect on the acute focal cerebral ischemia in cats and would be applicable in the clinical field in which the ischemia is anticipated during major cerbral artery occlusion.

대장암에서 nm23 단백의 면역조직화학적 발현양상과 다른 예후인자와의 상관관계

이시내,구혜수,한운섭 대한병리학회 1998 Journal of Pathology and Translational Medicine Vol.32 No.6

수술치료를 한 영아기 특발성 장 폐색증

염차경(Chakyong Yom),구혜수(Heasoo Koo),최금자(Kumja Choi) 대한외과학회 2008 Annals of Surgical Treatment and Research(ASRT) Vol.74 No.4

Purpose: Intestinal neuronal dysplasia (IND) causes intestinal pseudo-obstruction and shares clinical features with Hirschsprung’s disease. Diagnosis of IND involves histopathological features of an intestinal biopsy, but diagnostic criteria are controversial and optimal treatment is unclear. We determined the pathological findings for diagnosing IND in infants and the significance of surgical treatment. Methods: We retrospectively studied 4 patients who received bowel surgery for an intestinal obstruction without a definite obstructive cause that were subsequently diagnosed as IND by postoperative pathology. The clinical history and results of immunohistochemistry for ganglion and nerve fibers (NCAM, NSE, cathepsin D, synaptophysin) were compared between patients and control cases. Results: All 4 patients were premature babies with symptoms of poor oral intake and abdominal distention. Surgical treatment was segmental resection of the small bowel in one case, segmental resection of the small bowel and double-barreled ileostomy in one case with NEC, and a temporary ileostomy for decompression and appendectomy for biopsy in 2 cases. The first 2 patients died of sepsis and DIC, respectively. The postoperative course of the other 2 patients was excellent for long-term follow up (30±6months). Patients with IND showed significantly more submucosal giant plexuses and ganglia in the submucosal plexus, a higher percentage of giant plexus in the 20 submucosal plexus, as well as increased incidence of heterotopic ganglia in the lamina propria, bud-like ganglia, anisomorphic ganglia, and immature ganglia. Conclusion: Proper surgical treatment of persistent intestinal pseudo-obstruction, including IND, can affect the prognosis and recovery of bowel function, with positive pathological findings helpful for diagnosing IND in infancy.