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- 저자 : 한미영 ( Mee Young Han ) (검색결과 5 건)
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열내성이 유도된 세포에서 HSP70 단백질 증가에 의한 단백질 변성 감소
한미영(Mi Young Han),박영미(Young-Mee Park) 대한약리학회 1996 대한약리학잡지 Vol.32 No.3
본 연구에서는 열충격에 의한 세포내 단백질 변성을 정량하는 방법을 소개하고 있다. Thiol compound인 diamide [azodicarboxylic acid bis (dimethylamide)]는 단백질변성시 노출된 sulfyhydryl기를 cross-link 시킨다. 정상 상태에서는 노출되지 않는 sulfyhydryl group이 변성된 단백질에서는 노출되기 때문에 diamide에 의한 cross-linking이 선택적으로 일어날 것이다. 그러므로 diamide는 변성된 단백질을 trap 하는 작용을 할 수 있다. 본 연구진은 세포내 열충격후 고분자 단백질 응집물 (high molecular weight protein aggregate, HAA)이 나타남을 비환원 (non reducing) SDS-PAGE에서 관찰하였고 이를 gas flow counter로 scanning하여 정량하였다. 실험 결과 세포에 열충격을 가한후 diamide를 처리하면 HMA가 열충격 용량의존적으로 증가함을 관찰하였다. 이는 HMA의 양을 측정함으로써 열충격에 의하여 변성된 단백질을 정량할 수 있음을 반증한다. 열내성이 유도된 세포와 그렇지 않은 세포를 비교하였을 때 열내성이 유도된 세포에서는 열충격에 의한 HMA의 형성이 억제됨을 관찰하였다. 열충격후 정상온도에서 회복기를 주면서 시간대별로 diamide를 첨가하고 이때 형성된 HMA양을 측정하여, 단백질 원형복구의 역동성을 실험하였다. 그 결과, HMA는 열내성의 유도 여부와 상관없이 빠르게 없어짐을 알 수 있었다. 그러나 열내성이 유도된 세포에서 HSP70 단항체를 electroporation에 의하여 투여하였을 때 HMA가 현저히 증가하였고, 이는 열내성이 유도된 세포에서는 HSP70의 증가에 의하여 HMA생성이 억제되었음을 나타낸다. HSP70 항체를 이용하여 면역침전을 시행한 결과 변성된 세포내 단백질이 HSP70과 같이 침전됨이 관찰되었다. 이 결과는 HSP70 단백질이 변성된 단백질과 일시적으로 결합하여 정상 상태로 돌아가거나 복구될 수 있도록 도와줄 수 있음을 시사한다. We describe a novel approach to evaluate quantitatively the amounts of denatured proteins in cells upon heat exposure. A thiol compound, diamide [azodicarboxylic acid bis (dimethylamide)] causes protein cross-linking with exposed sulfyhydryl residues of denatured proteins. Since denatured proteins expose normally well-hidden sulfhydryl groups, these will be preferentially cross-linked by diamide. Thus diamide acts to trap denatured proteins. We observed that protein aggregates (high molecular weight protein aggregates, HMA) appeared on SDS-polyacrylamide gels run under non-reducing conditions and that the amount of HMA can be quantified by scanning the gels using a gas flow counter. Heating cells followed by a fixed dose of diamide exposure resulted in HMA increases in a heat-dose dependent manner, demonstrating that the quantitation of HMA could serve as a measure of heat-denatured proteins. We compared thermotolerant and nontolerant cells and found decreased HMA in tolerant cells upon heat treatment. As an attempt to examine the kinetics of protein renaturation (or repair ), we measured the amounts of aggregates formed by the addition of diamide at various times after heat shock. Such experiments demonstrate an equally rapid disappearance of HMA in previously unheated and in thermotolerant cells. Levels of HMA in tolerant cells increased significantly after electroporation of HSP70 specific mAbs, suggesting an involvement of HSP70 in reducing HMA levels in thermotolerant cells upon heat exposure. Immunoprecipitation studies using anti-HSP70 antibody indicated an association of HSP70 with heat-denatured proteins. Our results suggest that heat induces protein denaturation, and that elevated level of HSP70 present in thermotolerant cells protects them by reducing the level of protein denaturation rather than by facilitating the repair (or degradation) process.
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Carrageenan으로 염증을 유도한 Stat 6 유전자제거 생쥐의 족삼리 침치료에 대한 시상하부 유전자의 마이크로어레이 프로파일
홍미숙 ( Mee Suk Hong ),박히준 ( Hi Joon Park ),엄윤경 ( Yoon Kyung Um ),정경희 ( Kyung Hee Jung ),김수철 ( Soo Cheol Kim ),한미영 ( Mi Young Han ) 대한경락경혈학회 2007 Korean Journal of Acupuncture Vol.24 No.2
목적: Signal transducers and activators of transcription 6 (Stat 6) 유전자는 면역세포의 발달에 있어서 중요한 유전인자이며, IL-4와 같은 사이토카인에 의해 유전자 발현이 조절된다. 본 연구에서는 Stat 6 유전자 제거 생쥐와 정상 (wild type, W/T) 생쥐에 carrageenan으로 염증을 유도한 후 족삼리에 침치료를 시행하여 시상하부에서의 유전자 발현 양상을 분석하고자 하였다. 방법: BALB/c (W/T, n=12) and BALB/c-Stat 6 유전자 제거 생쥐 (n=12)의 발뒤꿈치 표피에 1% carrageenan을 30 ul 주사하여 염증을 유도하였다. 침은 염증 유도 30분 후에 족삼리(ST36)에 시침하였으며, 염증유도에 의한 부종 증가율은 매 시간마다 측정하여 총 5시간동안 측정하였다. 마이크로어레이는 Stat 6 유전자 제거 생쥐를 염증 유발 군과 염증유발 후 침을 처치한 군으로 나누고, 시상하부를 적출하여 RNA를 분리한 뒤. 마이크로어레이 프로파일을 분석하였다. 결과: 염증에 의한 부종증가율을 비교한 결과, Stat 6 유전자 제거 생쥐 그룹의 부종증가율이 W/T 생쥐의 부종 증가율보다 약 50 % 정도 감소하였으며, 각 3, 4, 5시간째에 유의한 차이를 나타내었다 (각 p<0.05). W/T생쥐군과 Stat 6 유전자 제거 생쥐군 모두에서, 침 처치군이 염증 유발 군에 비해, 염증 유발 2시간 후부터 유의한 감소를 나타내었다. 시상하부의 유전자 발현을 관찰한 결과, 39개의 유전자가 3배 이상 감소하였으며, 19개의 유전자는 3배 이상 증가하였다. 결론: W/T 생쥐군과 Stat 6 유전자 제거 생쥐 모두에서 침의 진통효과는 나타나며, 이의 기전에는 시상하부에서의 침 치료에 의한 염증관련 유전자들의 감소와, 항염증과 관련된 유전자들이 증가가 관여하는 것으로 보인다.
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제왕절개 반흔 부위에 착상한 자궁벽내임신의 보존적 치료
김희진 ( Hee Jin Kim ),이경순 ( Kyoung Soon Lee ),한미영 ( Mee Young Han ),이은희 ( Eun Hee Lee ),최원영 ( Won Young Choi ) 대한산부인과학회 2004 Obstetrics & Gynecology Science Vol.47 No.9
Objective : To evaluate of safety and effectiveness of conservative treatment of previous cesarean section scar pregnancy. Methods : Ten patients with previous cesarean section scar pregnancy were treated systemic methotrexate or intra-amnionic methotrexa
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김우정,고순남,한미영 한국조리과학회 1999 한국식품조리과학회지 Vol.15 No.4
고춧가루 공장에서 폐기물로 발생되는 고추씨를 매운 맛을 지닌 향신 조미 물질로서의 효과적인 활용하기 위하여 실험하였다. 고추씨는 열수추출하였으며 추출시 추출온도와 시간 및 소금, 당, 인산염과 유기산등의 첨가영향을 검토하였다. 또한 추출전 100℃에서의 증자나 215℃와 330℃에서의 볶음의 영향도 검토하였다. 그 결과 고추씨를 증자 또는 볶음하여 추출한 경우에 수율은 증가하였지만 탁도는 감소하였으며 매운 향미는 비가열처리구에서 높았다. 고추씨를 70℃-100℃에서 10-60분간 열수추출하였을 때 80℃에서 30분간 추출한 시료가 비교적 높은 27%의 수율을 나타내었으며 매운맛도 높았다. 한편, 소금, 당, 인산염과 유기산을 첨가하여 80℃에서 30분간 추출한 수율은 0.5% NaCl이 27.21%, 0.2% Na₂HPO₄은 29.21%로 대조구보다 약간 증가하였으며 매운 향미에는 큰 영향이 없었다. The red pepper seeds(RPS), an industrial waste produced from red pepper powder industry, were investigated for its possible use as natural hot taste seasoning. The RPS was extracted with water with addition of salt, sugar, phosphate and citric acid at 70-100℃ Effects of preheat treatments of steaming at 100℃ and roasting at 215℃ and 330℃ were also studied on the flavor of the RPS extracts. The results showed that steaming and roasting increased the solid yield and reduced the turbidity. The hot flavow of RPS extracts was generally decreased by steaming and roasting. Extraction of RPS at the temperature range of 70-100℃ for 10-60 minutes showed that solid yield were relatively high of 27% at 80℃ for 30 minutes with the highest score of hot flavor. When the extraction was carried out with addition of NaCl, sucrose, Na₂HPO₄ and citric acid, the solid yield was little affected by their addition except a little increase by 0.5% NaCl and 0.2% Na₂HPO₄ and hot flavor was little affected.
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