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임학태(Hak-Tae Lim),이규화(Kui-Hua Li),구동만(Dong-man Khu),양덕춘(Deok-Chun Yang),전익조(Ik-Jo Chun) 한국자원식물학회 2003 한국자원식물학회지 Vol.16 No.3
한국감자육종소재 은행(KPGR)에서 는 많은 감자유전자원을 수집함과 동시에 수집된 유전자원을 분석해서 감자육종에 활용하고 있다 다양한 유전자원 중에서 2001년 우리나라 준고냉지 지역인 장평과 양구에서 수확한 58가지 감자 계통 및 품종에서 식용 및 칩 가공에 적합한 품종 및 계통을 선발하였다. 감자의 선발 기준은 지역적 응성, 감자 괴경형태(눈 깊이, 모양, 표피색, 육색, 생산량, 더뎅이병 저항성과 중심공동 및 내부갈색저항성)와 감자의 칩 색도에 아주 큰 영향을 주는 환원당 함량 등 요소를 종합적으로 고려하였다. 기존 수미 와 대등한 흰색 표피 품종은 얼리밸리 , 썸머밸리 , 윈터밸리 , 태복밸리 였고, 골든밸리 는 노란색 품종으로, 고구밸리 와 주스밸리 는 적색표피 품종으로, 퍼플밸리 는 보라색 표피 품종으로 각각 선발되었다. 가공용 재배 품종인 대서 칩 색도와 비슷하고 생산량(4.0톤ha)이 비교적 높고 환원당 함량(0.30%이하)이 비교적 낮은 24계통 및 품종이 선발되었다. 선발된 계통 및 품종의 괴경형태 등을 종합적으로 고려하여 태동밸리 , 강심밸리 , 강원밸리 품종이 밝은 흰 색칩용으로 선발되었는데 환원당 함량은 각각 0.23%, 0.27%와 0.29%였으며; 보라밸리 , 로즈밸리 , Valley54는 칼라 칩용으로 선발하였는데 그중 보라밸리 의 환원당 함량은 0.26%로서 밝은 보라색 칩색도를 나타냈으며 로즈밸리 의 환원당 함량은 0.19%로서 칩 색도는 밝은 황색을 나타냈으며 밸리54의 환원당 함량은 0.27%였다. 스틱밸리 와 밸리72은 프렌치 프라이용으로 선발하였는데 환원당 함량은 각각 0.22%와 0.15%로서 괴경의 형태가 비교적 긴 형태로서 프라이 색도는 밝은 담황색을 나타냈다. Many potato genetic resources have been collected and improved for their diverse traits over the years using breeding program in KPGR. To select potential varieties for table and processing in Korea, 58 elite potato breeding lines and several Valley varieties were cultivated and harvested at Korea Alpine area in 2001. The cultivated lines and varieties were evaluated using their cultural adaptability in the environment and tuber characteristics, such as the depth of tuber eye, tuber shape, skin color, flesh color, scab resistance, yield, and the resistance of hollow heart and internal brown spot disease. Additionally, in the selection of potential processing varieties, reducing sugar content (sum of glucose and fructose concentration) of tubers is critically considered, because it mainly influence on the chip color of processing potato tuber. For table stock varieties with white skin color, Early Valley , Summer Valley , Winter Valley , and Taebok Valley were selected. In the aspect of diverse potato tuber color, several varieties were selected such as Golden Valley for its yellow fresh and skin color, Gogu Valley , Juice Valley , and Rose Valley for their red skin color, and Purple Valley for its purple skin. Compared with world wide known processing cultivar Atlantic , 24 lines (or varieties) were selected for the potential potato processing industry due to their low reducing sugar contents (below 0.3%), high yield (above 4.0 ton/ha), and unique chip colors. Selected white chipping varieties were Taedong Valley , Kangshim Valley , and Kangwon Valley , which have 0.23%, 0.27%, and 0.29% of reducing sugar contents, respectively. Bora Valley , having deep purple color in both skin and fresh, was selected for purple chip variety and has 0.26% of reducing sugar content. Light yellow chip varieties (lines) were Rose Valley and Valley 54, having 0.19% and 0.269% of reducing sugar content, respectively. For French frying potatoes, Stick Valley of 0.22% and Valley 72 of 0.151% in reducing sugars were selected. All of these selected lines and Valley varieties can be used as parents to improve potato genetic resources and to develop better varieties with unique traits and colors.
두 가지 제초제에 대하여 저항성을 가지는 항생제 마커-프리 형질전환 감자 육성
방일란,김진석,공수,모황성,민석기,권석윤,이규화,임학태,Fang, Yi-Lan,Kim, Jin-Seog,Gong, Su,Mo, Hwang-Suk,Min, Seok-Ki,Kwon, Suk-Yoon,Li, Kui-Hua,Lim, Hak-Tae 한국식물생명공학회 2007 식물생명공학회지 Vol.34 No.3
본 연구에서는 제초제 저항성 bar 유전자 및 CP4-EPSPS 유전자를 포함하는 발현벡터로 형질전환되고 항생제 마커 유전자를 포함하지 않는 제초제 복합 저항성 감자 식물체를 육성하고자 실험하였다. Bar 유전자를 포함하는 pCAMBIA3300에 CaMV35S 프로모터에 의해 조절되는 CP4-EPSPS 유전자를 도입하여 식물체용 발현 운반체를 제작하고, 이를 Agrobacterium tumafaciens EHA105에 도입하였다. 태동밸리 잎 절편체를 Agrobacterium과 공동배양한 다음, phosphinothricin 0.5 mg/L이 첨가된 배지에서 선발하고 호르몬 무처리 MS발근시켜 형질전환체 (E3-6)를 얻었다. PCR, Southern 분석, 효소면역반응 분석 등을 통해 두 가지 유전자가 도입되었으며 이들이 정상적으로 발현됨이 확인되었다. E3-6 식물체는 glufosinate-ammonium의 어린 식물체 잎 도포처리, glyphosate 용액에 치상한 식물체 조직에서의 shikimate 축적 여부 조사를 통하여 조사한 결과, 두 제초제에 대해 저항성을 나타내었다. 또한 형질전환감자의 전식물체에 대해 glyphosate와 glufosinate-ammonium 각각의 용액 또는 이들의 혼합물을 처리한 후 제초활성 반응을 조사한 결과, E3-6 형질전환 감자는 두 제초제를 각각 단독으로 처리할 때나 혼합하여 동시 처리할 때에도 동일한 저항성이 나타남을 확인하였다. This study was conducted to develop an antibiotics marker-free potato (Solanum tuberosum L., cv. Taedong valley) plant having resistance against two herbicides. Agrobacterium tumefaciens strain EHA105, harboring a binary vector plasmid pCAMBIA3300 containing bar gene under the control of a promoter CaMV35S and linked CP4-EPSPS genes driven by CaMV35S promoter, was used in the current study. The leaf segments of newly bred potato variety (cv. Taedong Valley) was co-cultured with Agrobacterium. Then, the regenerated individual shoots were excised and transferred to potato multiplication medium supplemented with 0.5 mg/L phosphinothricin. The shoots were rooted in MS medium without hormone and obtained putative transgenic plant E3-6. Integration of target genes into the E3-6 plant and their expression was confirmed by PCR, Southern analysis, and ELISA test. The tissue necrosis test on young leaf blade and shikimic acid accumulation test using the tissue of E3-6 plant were conducted to investigate the resistance to glufosinate-ammonium and glyphosate, respectively. The transgenic plants (E3-6) simultaneously showed a high resistance to both herbicides. The same results were surely obtained also in the whole plants foliar-treated with alone or mixture of two herbicides, glufosinate-ammonium and glyphosate.