頭部에서 Pityrosporum orbiculare 및 Pityrosporum ovale의 硏究

이건섭,방용준 대구보건대학 1995 대구보건대학 論文集 Vol.15 No.-

The authors performed mycologic studies on Pityrosporum by direct smear culture. 1. The subjects with dandruff were 63.3% and subjects without dandruff were 36.7%. 2. The spores of Pityrosporum were observed in all subjects under the KOH microscopic examination. 3. The subjects in the group of more than 90% of P.orbiculare were 42, group of 90-60% of P.orbiculare were 2, group of more than 90% of P.oval were 34, group of 90-60% of P.ovale were 12. 4. Scales from the scalp of 60 subjects were cultured, positive culture colonies were observed in 60(100%).

광양만 해역에서의 고효율 질소-인 제거 해양박테리아 탐색 및 분리

이건섭(Lee, Gun-Sup),모상현(Moh, Sang-Hyun),정영재(Chung, Young-Jae),김소정(Kim, So-Jung),김영준(Kim, Young-Jun),이상섭(Lee, Sang-Seob),이택견(Lee, Taek-Kyun) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.7

371 균주의 해양박테리아를 광양만에서 분리하였다. 우점종은 Pseudomonas aeruginosa, Aeromonas hydrophila, P. fluorescens, P. paucimobilis, Chryseomonas luteola, P. vescularis 등이었다. 영양염과 유기물을 제거할 수 있는 해양박테 리아를 탐색하기 위하여 암모니아성 질소(100 mg/L), 질산성 질소(100 mg/L) 및 인(10 mg/L)이 각각 포함된 10 mL의 marine broth 2216 (DIFCO)에 해양박테리아를 접종(1.0%, v/v)하고 12시간 배양하였다. 스크리닝 테스트 결과 25% 이상 COD을 제거하는 해양박테리아는 16종, 15% 이상의 암모니아 질소를 제거하는 해양박테리아는 9종, 60% 이상의 질산 질소를 제거하는 해양박테리아는 11종 그리고 90% 이상의 인을 제거하는 해양박테리아는 13종이 분리되었다. Aeromonas hydrophila, Chryseomonas indologenes, Pseudomonas diminuta, Vibrio parahaemolyticus 균주가 유기물 및 영양염류 제거 실험을 위해 선정되었다. 회분식 시험을 위해 4종의 해양박테리아를 COD_Cr 250 mg/L, NH₃-N 40 mg/L, NO₃-N 40 mg/L, PO₄^3--P 10 mg/L이 각각 첨가되어 있는 변형 marine broth에 접종하고, 10시간 배양하면서 제거효율을 측정하였다. 371 strains of marine bacteria were isolated from Gwangyang bay in Korea. The dominant species were identified as Pseudomonas aeruginosa, Aeromonas hydrophila, P. fluorescens, P. paucimobilis, Chryseomonas luteola and P. vescularis. To screen marine bacteria capable of removing nutrients and organics, marine bacteria was inoculated in 10 mL of marine broth 2216 (DIFCO) with NH₃^-N (100 mg/L), NO₃^-N (100 mg/L), and PO₄^-P (10 mg/L) with 1.0% (v/v), and incubated for 12 h. Results from the screening test, showed that the removal efficiencies for COD_Cr, ammonia niterogen, nitrate nitrogen, and phosphate were over 25% for 16 strains, 15% for 9 strains, 50% for 63 strains, and 15% for 80 strains, respectively. Aeromonas hydrophila, Chryseomonas indologenes, Pseudomonas diminuta, Vibrio parahaemolyticus were selected for nutrients removal experiments. For the batch test, 4 species of marine bacteria were inoculated in modified marine broth containing with nutrients(COD_Cr 250 mg/L, NH₃^-N 40 mg/L, NO₃^-N 40 mg/L, PO₄^-P 10 mg/L, respectively), incubated for 10 hr and the removal efficiencies were measured.

광양만 해양바이러스 개체수와 물리화학적 요인의 계절적 변동

최은석(Choi, Eun Seok),이건섭(Lee, Gun-Sup),김동균(Kim, Dong-Giun),오정균(Auh, Chung-Kyoon),박종범(Park, Jongbum),정영재(Chung, Young-Jae),이택견(Lee, Taek-Kyun) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.11

광양만의 3개의 다른 지역에서 바이러스 개체수와 물리화학적 요인의 계절적 분포도를 분석하였다. 또한 바 이러스의 형태적 구조를 투과전자현미경을 이용하여 관찰하였다. 대부분의 해양바이러스는 박테리오파지와 유사한 구조를 갖고 있었으나, 일부는 진핵 미세조류 바이러스인 Ectocarpus siliculosus virus (EsV)와 유사하였다. 그룹 1 (폐쇄된 부영양 지역)에서의 바이러스 개체수는 그룹 2 (폐쇄된 빈영양 지역) 및 그룹 3 (개방된 빈영양 지역)에서의 바이러스 개체수보다 높았다. 그룹 1 바이러스의 계절적 개체수는 크게 변화하였다. 바이러스 개체수는 8월에 가장 높은 7.33×10⁸ ml^-1에서 12월에 가장 낮은 0.3×10⁸ ml^-1로 변화하였고, 봄과 가을에는 중간값을 유지하였다. 질소원 및 인산원의 농도는 바이러스 개체수에 상관관계를 보였다. 특히 용존산소의 계절적 변화는 바이러스 개체수와 반대 경향을 보였다. 이러한 결과는 광양만에서의 해양바이러스 개체수가 물리화학적 환경과 밀접하게 연관되어 있음을 보여준다. Seasonal distributions of the viral abundance and physicochemical parameters were analyzed at three different regions in Gwangyang Bay. Morphological structure of marine virus was observed using transmission electron microscopy. Most of marine virus had bacteriophage-like structure, but some were similar with eukaryotic microalgal virus, Ectocarpus siliculosus virus (EsV). Viral abundance at Group 1 (closed eutrophic region) was higher than viral abundances at Group 2 (closed oligotrophic region) and Group 3 (open oligotrophic region). Seasonal abundances of marine virus at Group 1 were dynamically changed. The viral density was variably changed from maximum 7.33×10⁸ ml^-1 in August to minimum 0.3×10⁸ ml^-1 in December and maintained middle value in spring and autumn. The concentration of nitrogen and phosphate sources was correlated with viral abundance. Particularly, seasonal change of dissolved oxygen concentration was opposite to the variation of viral abundance. These results showed that viral abundances were closely related with fluctuation of marine physicochemical environment in Gwangyang bay.

카드뮴과 구리에 노출된 Rhizophora stylosa 의 phytochelatin synthase 1 유전자 클로닝 및 발현

이건섭(Lee, Gun-Sup),황진익(Hwang, Jin-Ik),박미례(Park, Mirye),정영재(Chung, Young-Jae),이택견(Lee, Taek-Kyun) 한국산학기술학회 2013 한국산학기술학회논문지 Vol.14 No.6

망그로브 생태계는 수생태계로 유입되는 중금속을 받아들이는 기능을 가지고 있다. 중금속에 오염된 퇴적물 에 노출됨에도 불구하고 망그로브는 중금속에 내성을 가지고 있다. 이 연구에서 우리는 망그로브로부터 중금속 저항 성 관련 유전자를 클로닝하고, 중금속 노출에 유전자 발현 변화를 분석하였다. 미크로네시아 축라군의 웨노섬에서 채 취한 Rhizophora stylosa의 잎과 뿌리조직으로부터 CTAB 방법을 이용하여 RNA를 분리하였고, gene specific primers 를 이용하여 phytochelatin synthase 1(PCS1) 유전자를 클로닝하였다. R. stylosa 태생종자를 100 ppb의 Cd과 10 ppb 의 Cu에 노출하였을 때 각각 1.91배 및 2.72배 발현이 증가하였다. 이러한 결과는 PCS1 유전자의 발현분석이 망그 로브 생태계의 건강성을 평가하기 위한 좋은 도구가 될 수 있음을 나타낸다. The mangrove ecosystems have the capacity to act as a sink of heavy metals entering aquatic ecosystems. Despite their potential exposure to metal contaminated sediments, mangroves appear to be highly tolerant to heavy metals. In this study, we cloned metal tolerance gene from mangrove plant. Using CTAB method, RNA were isolated from leaves and root tissue of Rhizophora stylosa habitated at Weno island in Micronesia Chuuk lagoon using CTAB method and phytochelatin synthase 1 (PCS1) gene was cloned using gene specific primers. Expression of PCS1 gene was increased 1.91 fold and 2.72 fold in mangrove propagules exposed to 100 ppb Cd and 10 ppb Cu, respectively. These results indicate that expression of PCS1 gene are promising tools for health assessment of mangrove ecosystem.

세라믹 담체에 적용된 해양박테리아 4종의 저농도 질소-인 제거

이건섭(Lee, Gun-Sup),김소정(Kim, So-Jung),정영재(Chung, Young-Jae),김동균(Kim, Dong-Giun),이상섭(Lee, Sang-Seob),오정균(Auh, Chung-Kyoon),이택견(Lee, Taek-Kyun) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.10

세라믹담체에 적용한 4종의 해양박테리아 (Aeromonas hydrophila, Chryseomonas indologenes, Pseudomonas diminuta, Vibrio parahaemolyticus)의 저농도 질소‧인 제거 효율의 변화를 분석하였다. 해양박테리아는 광양만에서 분 리 동정하였다. 담체에 적용한 4종의 해양박테리아 모두 대조군에 보다 약 3배 정도의 성장률이 증가하였으며, 암모 니아서 질소 제거효율도 30% 이상 증가하였다. 질산성 질소의 제거 효율은 A. hydrophila 균주가 가장 높았으며, 인 의 제거는 P. diminuta 균주가 가장 높은 것으로 나타났다. 본 연구의 결과는 세라믹담체는 질소-인 제거 효율 증진 에 좋은 재료이며, 분리된 해양박테리아는 현장의 저농도 질소-인 조절에 유용할 수 있음을 보여준다. Changes of low concentrated nitrogen-phosphate removal efficiency were investigated in 4 strains of marine bacteria applied to ceramic media. Marine bacteria were isolated and identified from Gwangyang bay. Growth rates and removal efficiencies of NH₃-N of 4 strains of marine bacteria applied to ceramic media were increased approximately 3 fold and over 30% than control group, respectively. A. hydrophila and P. diminuta had highest NO₃-N and phosphate removal efficiencies, respectively. This results showed that ceramic media is very nice material for improvement of nitrogen-phosphate removal efficiency and isolated marine bacteria may be useful to control nitrogen-phosphate at low concentration in field.

둥근성게 (Strongylocentrotus nudus )의 수정과 초기 배발생에 미치는 빈산소의 영향

이건섭(Lee, Gun-Sup),황진익(Hwang, Jin-Ik),정영재(Chung, Young-Jae),김동균(Kim, Dong-Giun),모상현(Moh, Sang-Hyun),장만(Chang, Man),이택견(Lee, Taek-Kyun) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.8

용존산소란 수생생물의 생장을 조절하는 가장 중요한 요소 중의 하나이다. 일반적으로 빈산소란 2.8 mg O₂/L (91.4 mM과 동량) 이하의 용존산소로 정의된다. 따라서 빈산소 해역은 해양생태계에서 심각한 문제를 야기할 수 있다. 본 연구에서는 성게에 대한 빈산소의 배아독성 (수정 및 배발생률) 영향을 연구하기 위하여 둥근성게 (Strongylocentrotus nudus)를 용존산소 7.6 mg O₂/L (normoxia)과 1.8 mg O₂/L (hypoxia)에서 2일, 15°C 및 33 ‰에 노출하였다. 또한 빈산소에 노출된 성게에서의 스트레스 관련유전자인 HSP70과 항산화 관련 유전자인 glutathione reductase의 발현을 immunoblotting assay와 RT-PCR을 통하여 확인하였다. 연구결과 배발생률이 현저하게 감소하였다. 분자분석 결과 빈산소에 노출된 성게 가 정상상태의 성게에 비해 HSP70 단백질은 약 5.5배 glutathione reductase는 약 2.79배 증가하였다. 본 연구의 결과는 빈산소가 성게의 비정상적 배발생을 유도하며, 스트레스와 항산화 반응을 유발할 수 있음을 추측케 한다. Dissolved oxygen is one of the most important factors controlling growth in aquatic organisms. Hypoxia is generally defined as dissolved oxygen less than 2.8 mg O₂/L (equivalent to 2 mL O₂/L or 91.4 mM). Therefore, hypoxia zone can cause a serious problem in marine ecosystem. In this study, to investigate embryotoxic (fertilization and embryo development rates) effects of hypoxia on sea urchin Strongylocentrotus nudus were exposed to dissolved oxygen levels of 7.6 mg O₂/L (normoxia) and 1.8 mg O₂/L (hypoxia) for 2 days at 15°C and 33 ‰. Also, Expression levels of stress related gene (HSP70) and antioxidant related gene (glutathione reductase) in the sea urchins exposed to hypoxia were confirmed by Immunoblotting and RT-PCR analysis. In results, we showed that developmental rates were dramatically reduced in hypoxia condition. Molecular analysis demonstrated that higher HSP70 (5.5 fold) and gilutathione reductase gene (2.79 fold) were present in the sea urchin exposed to hypoxia. Our results suggested that hypoxia can cause the abnormal development and elicits a stress and antioxidant response on sea urchin.

다시마 유래 항미세조류 물질 추출 및 알긴산 올리고 유도체의 막전위에 대한 영향

이건섭(Lee, Gun-Sup),장만(Chang, Man),신경순(Shin, Kyoungsoon),김동균(Kim, Dong-Giun),오정균(Auh, Chung-Kyoon),이택견(Lee, Taek-Kyun) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.12

알긴산 올리고 유도체를 갈조류로부터 추출하였고, 추출물의 항미세조류 효과와 작용기작을 연구하였다. 고분자 알긴산을 2 N HCl과 1% H₂O₂.로 순차적 가수분해하여 알긴산 올리고 유도체를 제조하였다. 추출물의 항미세조류 활성은 반응시간에 비례하였으며 4시간에 가장 높았다. 알긴산 올리고 유도체를 Akashiwo sanguinea와 Cochlodinium polykrikoides 에 처리하였을 때, 세포의 움직임이 정지하였다. A. sanguinea 세포는 파쇄되었고, C. polykrikoides 세포에는 원형질 분리가 유도되었다. 알긴산 올리고 유도체의 작용기작을 연구하기 위하여, 세포내(pHi) 및 세포외 pH(pHe)의 변화를 0.05% 알긴산 올리고 유도체에 노출된 미세조류에서 측정하였다. pHi는 0.3 unit 감소하였고, pHe는 0.9 unit 증가하였다. 이러한 결과로부 터 알긴산 올리고 유도체에 의한 막전위의 변화가 미세조류의 세포사멸을 유도할 수 있을 것으로 추측된다. Oligo-alginate derivatives were extracted from brown algae and its antimicroalgal effects and reaction mechanism were investigated. Oligo-alginate derivatives were produced from sequential hydrolysis of high molecular weight alginate by treatment of 2 N HCl and 1% H₂O₂. Antimicroalgal activity of extracts was proportional to reaction time and activity was highest at 4 hrs. When oligo-alginate derivatives were treated to Akashiwo sanguinea and Cochlodinium polykrikoides, mobilities of cells were ceased. A. sanguinea cells were crushed and plasmolysis was induced in C. polykrikoides cells. To investigate the action mechanism of oligo-alginate derivatives, changes of intracellular (pHi) and extracellular pH (pHe) were determined in the microalgal cells exposed to 0.05% of oligo-alginate derivatives. pHi was decreased about 0.3 unit and pHe was increased about 0.9 unit. These results suggested that change of membrane potential by oligo-alginate derivatives could led to microalgal cell death.

p-nitrobenzoic acid 를 첨가(添加)한 배지(培地)로 Mycobacterium tuberculosis 및 Mycobacterium bovis 를 동정(同定)하기 위(爲)한 연구(硏究)

이건섭 ( Gun Sup Lee ) 대한임상검사과학회 1975 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.7 No.1

本 硏究는 M. tuberculosis와 M. bovis를 同定하기 爲한 寶驗이 다. 그 方法은 Tsukamura, Strltch-Dickionson의 方法을 적용해서 양성오로 판명된 객담에서 75건의 균을 혈액배치에 배양하여 그 중 71 건은 균색형이 형성되었다. Slide slip 에 도말한 객담을 설은에서 건조시킨후 INHC에 처리하고 별균증류수르 세척한후 각각 血液培地, PNB 500μg/ml 헐액배지에 7日간배양시킨마음각기 배지에서 slide slip을 꺼내서 증류수에 세척하여 hot plate 에 서 30分間 加溫한후 Ziehl-Neelsen 法으로 染色을 하였다. 染色된 slide를 광학현미경으로 검경한 결과결핵균이 발육형성 되였음을 볼수 있었다. 이 균색형성된균이 人型結核菌인가 확실히 알기위하여 egg배치에서 배양된 균집 락을 Niacin test 를 하여 감별하였고 Table2에서와 같이 人型및 牛型 結核菌은 PNB 혈액배지에사증식 되 지 못하고 他 Mycobacterium은 증식되였음으로 PNB를 이용하면 人型및 牛型 결핵균 同定에 도움이 된다. (이 論文을 준비하는데 많은 지도와 협조를 해주신 가톨릭 의대 성모명원 임상병리과 이종무 교수께 깊은 감사를 드립니다) An attempt was made to distinguish Mycobacterium tuberculosis and M. bovis from other mycobacterial species, by demonstrating cord-formation of mycobacteria, particularly tubercle bacilli, which are frequently encountered in diagnostic laboratories. A total of 71 sputum specimens with positive results and 75 strains of mycobacteria were employed for _the purpose applied combine with Tsukamuras and Stritch-Dickinsons method. Blood media were prepared two ways which with the incorporation of p-nitrobenzoic acid (PNB, 500μg per ml) and without PNB. Sputums mears, which were allowed to dry thoroughly, treated with 1N HCl and washed in sterile distilled water. Then the sputum smears were submerged in to the media both PNB added and without PNB respectlvely. After incubation at 37 0 C for a week, the slides were removed out from the tube, then rinsed by distilled water and dried on hot plate for 30 minutes, and stained with Ziehl-Neelesens or fluorochrome dyes. Upon examining them by ordinary optical microscope, growing bacteria were confirmed firstly and the development of cord-formation secondary. To make sure of the differentiation, the sputa were simultaneously decondaminated, inoculated and incubated at 37 0 C until the growth is seen. The cultures were then examined for niacin production in order to identify M. tuberculosis. As seen in table 1, both results obtained in this study appear to be identical in discriminating Mycobacterium tuberculosis and M. bovis from other mycobacterial species. In conclusion, the blood medium containing p-nitrobenzoic acid can be readily used as a diagnostic aid.

Trichophyton mentagrophytes의 교배형과 진균학적 성상

방용준 ( Young Jun Bang ),이건섭 ( Gun Sup Lee ) 대한임상검사과학회 1994 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.26 No.1

Potato Dextrose Corn meal Tween-80 agar에서 Trichophyton mentagrophyte 아형의 진균학적 성상

방용준 ( Young Jun Bang ),이건섭 ( Gun Sup Lee ),김쌍용 ( Ssang Young Kim ) 대한임상검사과학회 1999 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.31 No.2

Gross and microscopic findings of their colonies were examined. The colonial morphology and microscopic appearance were compared with those of subtype Trichop매ton(T) mentagrophytes on potato dextrose corn meal Tween-80 agar (PDCT). The results were as fol1ows; T. mentagrophν, tes was c1assified into 4 subtypes granular type, powdery typered purple type and cottony type, according to the color and surface morphology. The granular type showed a fawn brown color with coarse granular grossly, and many c1ub-shaped macroconida and grape shaped microconidia but many spiral hyphae microscopically. The powdery type showed a yellow brown colored, a fine powdeη surface, each colony being surrounded by a mild cottony border and c1ub-shaped macroconidia, round microconidia and spiral hyphae microscopically. The persicolor type showed a characteristic red purple color with cottony and powderγ surface, and microconidia and spiral hyphae but chlamydoconidia microscopically. The cottony type showed abundant whitish cottony surface and round microconidia and spiral hyphae microscopically. All strain showed positive hair perforation and urease test.